【正文】 的初始速率減慢（圖 252）。圖252 脂肪酶催化脂的拆分Tsukube等人研究發(fā)現(xiàn)脂肪酶催化的水解反應的速率和立體選擇性可以通過加入冠醚來改變 [77]。冠醚的加入盡管可以提高反應的速率，立體選擇性改善卻與冠醚本身的性質有關。作者考察了一系列冠醚和幾種聚醚發(fā)現(xiàn)，在添加苯丙冠醚、氮雜冠醚和硫雜冠醚時，脂肪酶催化的水解反應的立體選擇性可以明顯提高。環(huán)糊精也可以提高反應速率及立體選擇性。環(huán)糊精本身是一種大環(huán)結構物質，它過化學修飾具有了內部疏水空腔和外部親水邊緣，就使它在水溶液中能夠穩(wěn)定蛋白質。在THF中，MβCD的添加可以提高枯草桿菌蛋白酶對sec苯乙醇的立體選擇性 [78]，且導致S對映體的反應速率比 R對映體快約兩倍。當脂肪酶受到MβCD活化時，對R對映體的選擇性可以提高約17倍，立體選擇性提高約3倍。Kim課題組在研究酶促立體選擇性水解外消旋的酮洛芬乙酯時[79]，發(fā)現(xiàn)在反應體系中加入手性的環(huán)糊精，對映體過量值和轉化率大大提高了。Quiros等人在脂肪酶可以通過在介質中加入一系列胺和固相緩沖劑來控制酰化反應[80]。當加入堿和已知pKa的固相緩沖劑時，Candida antarctica 脂肪酶和Mucor miehei 脂肪酶催化oxazalone醇解反應的立體選擇性明顯的提高。作者還系統(tǒng)的地考察了pKa 值對脂肪酶的立體選擇性的影響。高pKa值的堿能夠明顯地加快反應速率并能維持一個穩(wěn)定E值。同時還發(fā)現(xiàn)氯化三甲胺或氯化三乙胺能夠顯著的提高Novozym435催化2乙烯環(huán)己醇的酯化反應的立體選擇性[81]。如果在沒有添加劑，該反應沒有任何立體選擇性。在甲基環(huán)己醇的拆分中也能夠觀察到類似的現(xiàn)象，E值從10提高到86。 Klibanov等人發(fā)現(xiàn)，Pseudomonas cepacia脂肪酶在多種溶劑中催化苯丙氨酸甲酯和正丙醇的酯交換反應[82]。首先，將底物與苯甲酸結合成體積龐大的鹽，而該鹽對兩種對映體的反應活性都降低，但對于R對映體活性的降低更加明顯，因此，E值可以提高四倍。用堿與托品酸形成鹽也能夠得到了類似的結果。堿絡合物體積越大，酶的立體選擇性就越高。（圖 253）。通過過渡態(tài)進行分子模擬表明鹽對酶立體選擇性的影響主要存在空間效應，該方法用手性鹽能夠得到更大差異的立體選擇性。 圖253 脂肪酶催化脂的拆分Shin課題組報道在苯丙氨酸甲酯與(S)10樟腦磺酸絡合中，脂肪酶催化的苯丙氨酸甲酯與正丙醇的酯交換反應的立體選擇性高達53[83]。該立體選擇性是沒有酸存在時的10倍?？赡婷附j合物的形成也能夠影響酶的反應活性。例如，辣根過氧化物酶（HRP）可以催化非手性的氧化反應。異羥肟酸與血紅素輔酶結合，能夠抑制酶得活性。在苯基異羥肟酸存在的條件下，在甲醇中催化苯硫基甲烷硫化氧化反應的立體選擇性能夠提高4倍。在體積更大的異羥肟酸衍生物下，HRP的立體選擇性可提高到10倍[84]。分子模擬研究表明：龐大的異羥肟酸絡合物可以抑制HRP 對對映體的選擇性。 有些報道表明通過使用濃度較小的表面活性劑來改善酶的立體選擇性。在異丙醚中Candida rugosa脂肪酶可以催化2(4取代苯氧基)丙酸和正丁醇的酯交換反應[85]。當加入SDS時。許建和等人研究酶促拆分酮洛芬酯的過程時，考察了不同的表面活性劑對酶促反應的影響[86]。研究結果表明加入Tween80可以提高脂肪酶的立體選擇性。Tsai 課題組研究發(fā)現(xiàn)在異辛烷中外消旋萘普生和三甲基硅甲醇的立體選擇性的酯化反應可以通過Candida cyclindracea脂肪酶催化得到[87]，AOT的加入可以明顯改善(S)萘普生酯的產率和立體選擇性。參考文獻[1]. 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