【正文】 潔塊等。手工清潔方式的特征是：清洗前通常需要將設(shè)備進(jìn)行一定程度的拆卸，并轉(zhuǎn)移到專門的清洗場所。很多固體制劑的生產(chǎn)設(shè)備如制粒機(jī)、壓片機(jī)、膠囊填充機(jī)，因死角較多或生產(chǎn)的產(chǎn)品易粘結(jié)在設(shè)備表面等情況而難以清潔，大多采用人工清洗方式。（二） 自動(dòng)清潔方式該方式由專門的清洗裝置按一定的程序自動(dòng)完成整個(gè)清潔過程。自動(dòng)清潔方式的特征是：只要將清洗裝置同待清洗的設(shè)備相連接，即可完成整個(gè)清潔過程，亦稱在線清潔方式。某些體積龐大且內(nèi)表面光滑無死角的設(shè)備，殘留的物料易溶于水或某種清潔劑，如注射用水貯罐、大容量注射劑的配制系統(tǒng)大多采用自動(dòng)或半自動(dòng)的在線清洗方式。清潔劑和淋洗水在泵的驅(qū)動(dòng)下以一定的溫度、壓力、速度和流量流經(jīng)待清洗設(shè)備的管道，或通過專門設(shè)計(jì)的噴淋頭均勻噴灑在設(shè)備內(nèi)表面從而達(dá)到清洗的目的二、 清潔程序不管采取何種清潔方式清潔設(shè)備，都必須制定設(shè)備清潔程序，從而保證每個(gè)操作人員都能以相同的方式實(shí)施清洗，并獲得相同的清潔效果。清潔程序的要點(diǎn)如下：1. 拆卸 規(guī)定設(shè)備在清潔前需要拆卸的程度，如制粒機(jī)，大容量注射劑、小容量注射劑的灌裝機(jī)等在清潔前均需要預(yù)先拆卸到一定程度。拆卸應(yīng)制訂包括拆卸操作步驟、示意圖等內(nèi)容的拆卸指導(dǎo)文件，以使操作人員容易理解。2. 預(yù)洗 預(yù)洗的目的是除去可見的殘留物料，為清洗和淋洗等操作創(chuàng)造一個(gè)基本一致的起始條件。預(yù)洗操作可手持水管或手持高壓噴槍，用熱自來水或經(jīng)過濾處理的自來水，持續(xù)噴淋機(jī)器的所有表面以除去所有可見的殘留物料。判斷預(yù)洗質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)是目測不易清潔的部位無可見的殘留顆粒。3. 清洗 清洗是用清潔劑以一定的操作程序除去設(shè)備上肉眼觀察不到的殘留物。操作程序必須明確規(guī)定清潔劑的名稱、規(guī)格、組成、使用濃度、配制該清潔劑的方法。配制清潔劑的水可根據(jù)需要采用自來水或純化水。清洗是溶劑對(duì)殘留物的溶解過程，而溶解往往隨溫度的升高而加快，因此，清洗時(shí)必須規(guī)定清潔劑的溫度范圍及控制溫度的方法。為提高清洗效率，可采用多步清洗的方式，往往在兩步清洗之間插入一步淋洗操作。4. 淋洗 在清洗步驟雖然已除去了大部分殘留物，但設(shè)備上殘留的清潔劑中仍然含水、清潔劑和殘留的物料。淋洗是用水對(duì)設(shè)備表面進(jìn)行充分沖洗，使殘留物的濃度降至預(yù)定限度以下，自動(dòng)執(zhí)行淋洗程序（包括壓力、流速、淋洗持續(xù)時(shí)間及水溫）較人工淋洗的效果可靠。為了防止造成新的潛在污染，淋洗水應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的類型選用符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的純化水或注射用水。5. 干燥 除去設(shè)備表面的殘留水分可防止微生物生長。設(shè)備是否需要干燥可根據(jù)具體情況決定，如須暴露保存的設(shè)備應(yīng)進(jìn)行干燥，如設(shè)備淋洗后要進(jìn)行滅菌處理，或是采用高溫、無菌的注射用水淋洗后并保持密閉的設(shè)備則不一定要進(jìn)行干燥處理。6. 目檢　通常經(jīng)過驗(yàn)證的清潔程序應(yīng)保證清潔后的設(shè)備無可見的殘留物。目檢如發(fā)現(xiàn)殘留物，應(yīng)及時(shí)采取糾偏措施。7. 儲(chǔ)存 規(guī)定已清潔設(shè)備和部件的儲(chǔ)存條件和最長儲(chǔ)存時(shí)間，以防止再次污染。8. 裝配 應(yīng)規(guī)定將被拆卸部件重新裝配的各步操作，附以圖表和示意圖以利于操作者理解。此外，要注意裝配期間避免污染設(shè)備和部件。三、 清潔劑的選擇原則清潔劑的選擇原則有以下幾點(diǎn)：1. 清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備，且本身易被清除；2. 清潔劑組成簡單、成分確切，可運(yùn)用一般分析手段檢測清潔劑的殘留情況；3. 清潔廢液有可靠的方法回收或進(jìn)行無害化處理；根據(jù)這些原則，對(duì)于水溶性殘留物水是首選的清潔劑，亦可選擇一定濃度的酸、堿溶液，但一般家用清潔劑因其組成不詳細(xì)、質(zhì)量不易控制，因此不宜采用。第二節(jié) 清潔驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)清潔驗(yàn)證是證實(shí)對(duì)某一臺(tái)確定設(shè)備按清潔程序清潔后是否合格。制訂驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)遇到的關(guān)鍵技術(shù)問題是如何確定最難清潔物質(zhì)、最難清潔部位、最大允許殘留限度和相應(yīng)的檢測方法。一、 確定最難清潔物質(zhì)一個(gè)清潔過程實(shí)際上是溶劑對(duì)殘留物的溶解過程，因此最難溶解的物質(zhì)的殘留量最大，也就是最難清潔的物質(zhì)。在清潔驗(yàn)證中，可以采取制定最難溶解物質(zhì)的殘留量限度標(biāo)準(zhǔn)來證明設(shè)備的清潔效果。對(duì)于一個(gè)復(fù)方制劑，處方中各種組分的活性成分殘留物對(duì)下批產(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性影響更大，所以一般將殘留物中的活性成分確定為最難清潔物質(zhì)。當(dāng)制劑中存在兩個(gè)以上活性成分時(shí)，通常將其中最難溶解的成分定為最難清潔物質(zhì)。以復(fù)方18氨基酸注射液為例，它有18種氨基酸，均為活性成分。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其確定為最難清潔物質(zhì)。二、 確定最難清潔部位和采樣點(diǎn)無論手工清潔方式還是自動(dòng)清潔方式，清洗過程總是先依靠機(jī)械摩擦力和清潔劑對(duì)殘留物的溶解作用，然后依靠流動(dòng)的清洗液對(duì)殘留物的沖擊作用，最終實(shí)現(xiàn)預(yù)定的清洗效果。因此從溶解的化學(xué)動(dòng)力學(xué)與流體力學(xué)的角度評(píng)價(jià)，以下幾種情況應(yīng)視為最難清潔部位：1. 死角、清潔劑不易接觸的部位，例如，混合攪拌機(jī)中攪拌葉片與軸之間的連接處；2. 管道內(nèi)壓力、流速迅速變化的部位，例如，有歧管或岔管處、管徑由小變大處排氣管等；3. 容易吸附殘留物的部位，例如，內(nèi)表面不光滑處。顯然，采樣點(diǎn)應(yīng)包括各類最難清潔部位。三、 確定殘留量限度藥品生產(chǎn)中，產(chǎn)品不同使用的工藝設(shè)備亦不同，因此為清潔驗(yàn)證設(shè)立統(tǒng)一的限度標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)方法顯然是不妥當(dāng)?shù)?。歐美國家采用的確定殘留量限度標(biāo)準(zhǔn)的一般性原則，目前已被世界各國普遍接受。我國制藥企業(yè)可作為清潔驗(yàn)證的內(nèi)控限度標(biāo)準(zhǔn)。①分析方法能達(dá)到的靈敏度能力；②生物學(xué)活性限度； ③以目測為依據(jù)的限度。其中第③項(xiàng)可作為①、②項(xiàng)限度標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充。（一） 分析方法能達(dá)到的靈敏度能力：殘留物濃度限度標(biāo)準(zhǔn)（10106）殘留物濃度限度標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：由上一批產(chǎn)品殘留在設(shè)備中的物質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中所致的濃度不得高于10106。對(duì)液體制劑而言，這就是進(jìn)入下批各瓶產(chǎn)品的殘留物濃度。殘留物濃度限度（10106）也可進(jìn)一步簡化成最終淋洗水中的殘留物濃度限度為10mg/kg。取10106為殘留物濃度限度的理論依據(jù)是高效液相色譜儀、紫外可見分光光度計(jì)、薄層色譜儀等常規(guī)實(shí)驗(yàn)分析儀器的靈敏度一般都能達(dá)到10106以上。驗(yàn)證時(shí)一般采用收集清潔程序最后一步淋洗結(jié)束時(shí)的水樣，或淋洗完成后在設(shè)備中加入一定量的水（小于最小生產(chǎn)批次量），使其在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)后采樣，測定相關(guān)物質(zhì)的濃度。（二） 生物學(xué)活性限度：最低日治療劑量的1/1000上述推算過程的前提是殘留物溶解到下批產(chǎn)品后均勻分配到各瓶／片產(chǎn)品中。而在實(shí)際生產(chǎn)中，殘留物并不是均勻分布的，可能存在某些特殊表面，如灌封頭，殘留物溶解后并不均勻分散到整個(gè)批中，而是全部進(jìn)入一瓶或幾瓶產(chǎn)品中。在這種情況下上述限度就不適用了，必須為這些特殊部位制定特殊的限度。依據(jù)藥物的生物學(xué)活性數(shù)據(jù)——最低日治療劑量（minimum treatment daily dosage，MTDD）確定殘留物限度是制藥企業(yè)普遍采用的方法。取最低日治療劑量的1/1000為殘留物限度的理論依據(jù)是：不同人群對(duì)不同藥物產(chǎn)生活性或副作用的劑量存在個(gè)體差異，某些患者即使服用較最低日治療劑量更小的某種藥物仍會(huì)產(chǎn)生藥理反應(yīng)。根據(jù)臨床藥理學(xué)、毒理學(xué)和臨床應(yīng)用的統(tǒng)計(jì)和報(bào)導(dǎo)，至今尚未見到這種個(gè)體差異達(dá)到1000倍的報(bào)導(dǎo)，也就是說，即使對(duì)于某些高敏患者，MTDD的1/1000殘留量也不會(huì)產(chǎn)生藥理反應(yīng)。因此高活性、敏感性的藥物宜使用本法確定殘留物限度。（三） 肉眼觀察限度：不得有可見的殘留物清潔規(guī)程中都要求在清潔完成或某些步驟完成后目檢不得有可見的殘留物。雖然這是非常經(jīng)驗(yàn)化的數(shù)據(jù)，與個(gè)人的視力、照明、設(shè)備的尺寸形狀和觀察的角度等許多因素有關(guān)，不可能作為定量、半定量的依據(jù)也無法驗(yàn)證，但是目檢最簡單，而且能直觀、定性地評(píng)估清潔的程度，有助于發(fā)現(xiàn)已驗(yàn)證的清潔程序在執(zhí)行過程中發(fā)生的偏差，可以作為上述定量標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充，對(duì)于日常監(jiān)控是有價(jià)值的。（四） 殘留物成分不穩(wěn)定時(shí)限度標(biāo)準(zhǔn)的確定方法上述殘留物濃度限度、生物學(xué)活性限度方法的合格標(biāo)準(zhǔn)是最難清潔物質(zhì)的殘留量或產(chǎn)品中的活性成分應(yīng)低于規(guī)定的限度，而對(duì)活性成分的化學(xué)穩(wěn)定性未加考慮。應(yīng)該看到，清洗過程中和清洗結(jié)束后殘留物以薄膜形式，充分暴露在水分、氧氣和通常較高的溫度下（如需高溫清洗和滅菌），其活性成分的化學(xué)性質(zhì)不很穩(wěn)定，有可能通過化學(xué)反應(yīng)部分轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)。清潔驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)自然失去了意義。另一方面，通過化學(xué)反應(yīng)生成的其它物質(zhì)可能對(duì)人體有更大的毒性，則更須嚴(yán)格限制其在后續(xù)成品中的含量。因此，殘留物成分不穩(wěn)定時(shí)制定限度標(biāo)準(zhǔn)必須考慮這類物質(zhì)對(duì)下批產(chǎn)品帶來的不利影響。四、確定微生物污染限度微生物污染限度的確定應(yīng)滿足生產(chǎn)和質(zhì)量控制的要求。如滅菌制劑強(qiáng)調(diào)生產(chǎn)過程中降低或消除微生物及熱原對(duì)注射劑的污染，對(duì)葡萄糖、氨基酸產(chǎn)品而言，它們的殘留物對(duì)微生物生長有利，因此清潔驗(yàn)證的可接受標(biāo)準(zhǔn)確定為殘留物小于10106，最終淋洗水pH必須與原來注射用水一致，雜菌＜25CFU/ml；內(nèi)毒素＜25EU/ml。又如設(shè)備清洗后存放的時(shí)間越長，被微生物污染的機(jī)率就越大，制藥企業(yè)應(yīng)綜合考慮其生產(chǎn)實(shí)際情況自行制定控制微生物污染的限度及清洗后到下次生產(chǎn)的最長貯存期限。第三節(jié) 采樣與采樣方法的驗(yàn)證清潔驗(yàn)證的另一關(guān)鍵技術(shù)難題是采樣與采樣方法的驗(yàn)證。一、 擦拭采樣1. 采樣原則擦拭采樣的原則是選擇最難清潔部位采樣，通過驗(yàn)證其殘留物水平來評(píng)價(jià)整套生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。通過選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過程中未溶解的，已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來。2. 擦拭工具常用的擦拭工具為擦拭棒，為一定長度的尼龍或塑料棒，一端纏有不掉纖維的織物，該織物應(yīng)能被擦拭溶劑良好潤濕。3. 擦拭溶劑擦拭溶劑用于溶解殘留物，并將吸附在擦拭工具上的殘留物萃取出來以便檢測。用于擦拭和萃取的溶劑可以相同也可不同，一般為水、有機(jī)溶劑或兩者的混合物。選擇溶劑時(shí)，應(yīng)注意保證擦拭采樣有較高的回收率并不得對(duì)隨后的檢測產(chǎn)生干擾。4. 擦拭采樣操作規(guī)程（1） 最小采樣面積的確定　每個(gè)擦拭采樣面積應(yīng)保證擦拭獲取殘留物的量能用常規(guī)檢測方法檢測。通常設(shè)定大于25cm2。（2） 擦拭采樣軌跡　取用適宜溶劑潤濕的擦拭棒，使棒頭按在采樣表面上，平穩(wěn)而緩慢地擦拭采樣表面。在改變擦拭移動(dòng)方向時(shí)翻轉(zhuǎn)擦拭棒，用擦拭棒的另一面進(jìn)行擦拭，擦拭過程應(yīng)覆蓋整個(gè)表面。（3） 擦拭完成后，將采樣擦拭棒放入試管，并用螺旋蓋旋緊密封，在試管上注明有關(guān)采樣信息。用同樣溶劑潤濕的空白擦拭棒作為對(duì)照樣品放入試管并旋緊密封，送檢。5. 采樣驗(yàn)證采樣過程需經(jīng)過驗(yàn)證。通過回收率試驗(yàn)驗(yàn)證采樣過程的回收率和重現(xiàn)性。要求包括采樣回收率和檢驗(yàn)方法回收率在內(nèi)的綜合回收率不低于50%，體現(xiàn)重現(xiàn)性的多次采樣回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）不大于20%。采樣驗(yàn)證程序如下：（1） 準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的500mm500mm的平整光潔的板材，一般為不銹鋼板；（2） 在鋼板上劃出400mm400mm的區(qū)域，并每隔100mm劃線，形成16塊100mm100mm的方塊；（3） %的溶液，定量裝入噴霧器；（4） 將約10ml溶液盡量均勻地噴在400400mm的區(qū)域內(nèi)；（5） 根據(jù)實(shí)際噴出的溶液量計(jì)算單位面積的物質(zhì)量（約1μg／cm2）；（6） 自然干燥或用電吹風(fēng)吹干不銹鋼板；（7） 用選定的擦拭溶劑潤濕擦拭工具，按前述擦拭采樣操作規(guī)程擦拭鋼板，每擦一個(gè)方塊（100cm2）換一根擦拭棒，共擦6～10個(gè)方塊；（8） 將擦拭棒分別放入試管中，蓋上試管蓋，加入預(yù)定溶劑10ml，加塞，輕搖試管，并放置10min，使物質(zhì)溶出；（9） 用預(yù)定的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)，計(jì)算回收率和回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差。擦拭采樣能有效彌補(bǔ)淋洗采樣的缺點(diǎn)，檢驗(yàn)的結(jié)果能直接反應(yīng)出各采樣點(diǎn)的清潔狀況，為優(yōu)化清潔規(guī)程提供依據(jù)。擦拭采樣的缺點(diǎn)是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能接觸到采樣部位。二、 最終淋洗水采樣1. 采樣方法最終淋洗水采樣為大面積采樣方法。該方法根據(jù)淋洗水流經(jīng)設(shè)備的線路，選擇淋洗線路相對(duì)最下游的一個(gè)或幾個(gè)排水口為采樣口，分別按照微生物檢驗(yàn)樣品和化學(xué)檢驗(yàn)樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時(shí)的水樣。對(duì)于殘留物難溶于水或干結(jié)在設(shè)備表面時(shí)，可采用淋洗完成后在設(shè)備中加入一定量的工藝用水（用量必須小于最小生產(chǎn)批量），使其在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)后在相應(yīng)位置采樣，其結(jié)果的可靠性要好一些。2. 適用范圍（1） 適用于設(shè)備表面平坦、管道多而長的液體制劑的生產(chǎn)設(shè)備；（2） 適用于擦拭采樣不宜接觸到的表面，因此對(duì)不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能采樣。對(duì)淋洗水樣一般檢查殘留物濃度和微生物污染水平。如生產(chǎn)有檢查澄明度與不溶性微粒項(xiàng)目的制劑，通常要求淋洗水符合相關(guān)劑型不溶性微粒和澄明度的標(biāo)準(zhǔn)。第四節(jié) 清潔驗(yàn)證方案的實(shí)施與再驗(yàn)證清潔驗(yàn)證不是驗(yàn)證某一設(shè)備，而是驗(yàn)證某一設(shè)備的清潔規(guī)程。一、 清潔驗(yàn)證方案一般包括驗(yàn)證目的、清潔規(guī)程、建立驗(yàn)證小組、確定殘留物限度標(biāo)準(zhǔn)、確定采樣方法及檢驗(yàn)方法、驗(yàn)證報(bào)告等內(nèi)容。（一） 驗(yàn)證目的驗(yàn)證設(shè)備（或生產(chǎn)線）按清潔規(guī)程進(jìn)行清洗后的清洗效果能否始終達(dá)到預(yù)定要求。（二） 清潔規(guī)程待驗(yàn)證的清潔規(guī)程應(yīng)根據(jù)設(shè)備的結(jié)構(gòu)、產(chǎn)品中物料的性能與特點(diǎn)在驗(yàn)證工作開始前制定。清潔規(guī)程應(yīng)明確清潔方法、清潔工具、清潔劑、清潔時(shí)間與相應(yīng)的清潔程序、待清潔設(shè)備的結(jié)構(gòu)以及設(shè)備清潔后如何預(yù)防再污染的措施等內(nèi)容。（三） 驗(yàn)證小組建立驗(yàn)證小組，列出驗(yàn)證小組成員名單，明確各自的職責(zé)，確定相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求。（四） 確定殘留物限度標(biāo)準(zhǔn)確定殘留物限度標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)，確定該限度標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)算過程和結(jié)果。（五） 確定采樣方法及檢驗(yàn)方法為了能正確評(píng)估清潔后污染物的殘留量，選擇合適的采樣方法和正確的檢測方法是非常重要的。如選擇擦拭采樣，由于擦拭速度、擦拭軌跡和擦拭力不能有效地控制等原因，樣品采集容易產(chǎn)生較大誤差。檢測方法的選擇應(yīng)注意其他成分對(duì)被檢物的干擾及儀器的靈敏度。確定采樣方法和檢測方法后，必須用示意圖、文字等方法指明采樣點(diǎn)的具體位置和采樣計(jì)劃，說明采樣方法、工具、溶劑，主要檢驗(yàn)儀器，采樣方法和檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證情況等。（六） 可靠性判斷標(biāo)準(zhǔn)為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性，應(yīng)規(guī)定驗(yàn)證試驗(yàn)必須重復(fù)的次數(shù)（一般為連續(xù)3次），所有數(shù)據(jù)均應(yīng)符合限度標(biāo)準(zhǔn)。二、 清潔驗(yàn)證方