基因轉染技術ppt課件-資料下載頁
2025-05-12 07:53本頁面
【正文】 原代細胞； 操作較簡便但 重復性差 細胞毒性較大；效率較低 DEAE葡聚糖轉染法 抑制核酸酶 內吞作用 瞬時表達 操作相對簡單；但需高濃度DNA ； DEAE葡聚糖濃度 ；溫育時間 陽離子脂質體法 帶正電的脂質體和核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 適用細胞廣；轉染效率高，重復性好但轉染時需除血清和抗生素；相對具有一定毒性 陽離子聚合物 陽離子聚合物與核酸等形成穩(wěn)定的復合物被細胞內吞 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 為最新一代的轉染試劑，具有操作簡單；穩(wěn)定性好；轉染效率高，細胞毒性低的特點；通過調節(jié)聚合物 /DNA比例優(yōu)化實驗。 5. 各種 轉染方法 比較 轉染方法 原理 應用 特點 電穿孔法 細胞暴露在短暫的高場強電脈沖中，將誘導沿細胞膜的電壓差異，這種電壓差異會導致細胞膜暫時穿孔。 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 所有細胞 適用細胞廣，但細胞致死率高，DNA和細胞用量大， 需 根據(jù)不同細胞類型 優(yōu)化實驗條件 顯微注射法或基因槍法 使用一根細針頭將 DNA， RNA或蛋白直接轉入細胞質或細胞核；基因槍使用高壓 microprojectile將大分子導入細胞。 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 所有細胞 適用細胞廣，細胞致死率高，操作復雜 病毒介導法 通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中 穩(wěn)定轉染 瞬時轉染 特定宿主細胞 可用于難轉染的細胞；但攜帶基因不能太大；需考慮安全因素 磷酸鈣法 磷酸鈣 DNA復合物吸附細胞膜被細胞內吞。 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 不適用于原代細胞； 操作較簡便但 重復性差 細胞毒性較大；效率較低 DEAE葡聚糖轉染法 抑制核酸酶 內吞作用 瞬時表達 操作相對簡單；但需高濃度DNA ； DEAE葡聚糖濃度 ；溫育時間 陽離子脂質體法 帶正電的脂質體和核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 適用細胞廣；轉染效率高，重復性好但轉染時需除血清和抗生素；相對具有一定毒性 陽離子聚合物 陽離子聚合物與核酸等形成穩(wěn)定的復合物被細胞內吞 穩(wěn)定轉染 瞬時性轉染 為最新一代的轉染試劑，具有操作簡單；穩(wěn)定性好；轉染效率高，細胞毒性低的特點；通過調節(jié)聚合物 /DNA比例優(yōu)化實驗。 LOGO
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