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基因診斷genediagppt課件-資料下載頁

2025-04-28 22:02本頁面
  

【正文】 是第 12 、 13和 61位密碼子 .如 90%的胰腺癌 ,50%的結直腸癌和 1/3的肺腺癌都在是 Kras基因第 12位密碼子突變 . ras癌基因點突變檢測方法 : :檢測速度快,靈敏度高,檢測樣品量大等優(yōu)點; 但點突變的檢出僅限于寡核苷酸探針的探測位點和突變類 型。 : 根據 PCR擴增的目標 DNA片段在非變性凝膠電泳中遷移率,將突變基因檢測出來。該法檢測點突變更方便; 缺點:不能檢測出突變的具體位點和具體類型。 通過檢測癌基因和抑癌基因診斷腫瘤(續(xù)) 2 .P53基因與腫瘤 : p53基因是最常被失活的抑癌基 因,失活的分子機制主要是基因突變,也有因為基 因表達異常而使 p53失活,約 50%以上的惡性腫瘤有 p53基因突變。 突變類型: 130? 290密碼子間常發(fā)生點突變,也有少量的插入或缺失突變。 基因檢測方法: ① PCRSSCP:可檢出有無突變 ② PCRRFLP:通過內切酶位點的消 失或增加檢測 p53的基因突變。 三 .通過檢測腫瘤相關病毒診斷腫瘤 已經發(fā)現多種病毒與腫瘤的發(fā)生有關,它們有 DNA病毒,也有 RNA病毒 ,其中逆轉錄病毒(retrovirus)對動物細胞的致瘤作用已得到公認 .還發(fā)現一些與人腫瘤發(fā)生有關的病毒如 : Burkitt 淋巴瘤 人類乳頭瘤病毒 (HPV) 宮頸癌 通過檢測這些病毒的基因就可以幫助診斷相應的腫瘤 . EB病毒 四 .通過檢測腫瘤標記物基因或 mRNA診斷腫瘤 腫瘤標志物 ( tumor marker)是由腫瘤組織細胞產生的,與腫瘤形成和發(fā)展相關的物質,包括:腫瘤抗原,激素,酶和同工酶。僅存在腫瘤細胞中。 類型 : 基因標志 :是指基因本身突變和異常表達,能反映癌前啟動階段的變化。 基因表型標志 :基因產物表達和調控異常,表現為所編碼的表達產物合成紊亂,產生胚胎性抗原,一般出現較晚。 基因診斷方法 : ① 基因變異導致腫瘤標記物的產生或含量改變,可選擇: PCRRFLP,PCRASO,PCR測序, PCRSSCP等技術。 ②導致腫瘤標記物產生或含量改變分子機制不清楚,可用 RTPCR技術檢測腫瘤標記物 mRNA的存在或含量的改變。如:端?;钚悦富钚员挥脕碜鳛槟[瘤標記物,在腫瘤細胞中該酶的活性增高。 第五節(jié) 感染性疾病的基因診斷 每種病原體都有各自特異的遺傳物質 ,可以是 DNA,也可以是 基因 . 一 .病毒感染性疾病的診斷 : 目前采用免疫法檢測血清中病毒抗原 . HBV基因組包含 4個開放閱讀框 ,S、 C 、 P和 X區(qū) ,C區(qū)變異性小 ,是基因診斷采用的目標部位 .在用 PCR檢測時可擴增 HBV的特異核苷酸序列 ,通過 PCR產物的直接電泳分析 、或內切酶譜分析、或點雜交、或 Southern印跡等結果作出判斷 .也可采用基因芯片技術 . (SARS): 是由新型變異冠狀病毒 (SARSCoV)感染引起 . SARSCoV基因組為正鏈單股 RNA,有 11個開放閱讀框 ,基因組的特異保守序列為編碼 RNA聚合酶的序列 . 基因診斷方法 : ① 采用 RTPCR技術擴增保守序列 ② DNA芯片 二 .診斷細菌感染性的疾病 用 PCR技術通過對致病細菌所含質粒的特異序列 ,設計引物 ,檢測引起的疾病的細菌類型 . 第五節(jié) 基因診斷存在的問題與發(fā)展前景 一 .基因診斷技術應用存在的問題 目前找到的致病基因不多 ,由多基因及基因 與環(huán)境互作所引發(fā)多種疾病的分子機制還不 清楚 設備條件 。操做人員 。污染造成的假陽性 . 二 .發(fā)展前景 結束語 基因診斷利用分子生物學技術 ,從 DNA/RNA水平檢測基因的存在、分析基因的結構變異和表達狀態(tài) ,從而對疾病作出診斷 .基因診斷的基本技術是核酸分子雜交和 PCR擴增 .前者是最直接 、最準確的基因診斷技術 ,后者則是應用前景最為廣闊的診斷技術 .目前 ,基因診斷技術已廣泛地應用到遺傳病、腫瘤和感染性疾病的診斷 .隨著醫(yī)學和分子生物學技術的不斷發(fā)展 ,基因診斷技術將會更加廣泛
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