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2025-05-03 22:02本頁(yè)面
  

【正文】 是哪種具體化合物的 缺陷 型; 鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型 ① 含營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的基本培養(yǎng)基平板的制備 。 ② 營(yíng)養(yǎng)缺陷型營(yíng)養(yǎng)類別的鑒定 。 ③ 缺陷型菌株單一營(yíng)養(yǎng)因素的鑒定。 第一組 第二組 第三組 第四組 第五組 第六組 第七組 第八組 第九組 丙氨酸 谷氨酸 亮氨酸 絲氨酸 精氨酸 谷氨酰氨 賴氨酸 蘇氨酸 天冬酰氨 甘氨酸 蛋氨酸 色氨酸 天冬氨酸 組氨酸 苯丙氨酸 酪氨酸 半胱氨酸 異亮氨酸 脯氨酸 纈氨酸 第八節(jié) 誘變選育 ?一 誘變處理 ?1 一般采用生理狀態(tài)一致(用選擇法或誘導(dǎo)法使微生物同步生長(zhǎng)) 的單細(xì)胞或孢子進(jìn)行誘變處理。所處理的細(xì)胞必須是 均勻而分散 的單細(xì)胞懸液。分散狀態(tài)的細(xì)胞可以均勻地接觸誘變劑,又可避免長(zhǎng)出不純菌落。 ?由于某些微生物細(xì)胞是多核的,即使處理其單細(xì)胞,也會(huì)出現(xiàn)不純的菌落。 ?因此用于誘變育種的細(xì)胞應(yīng)盡量選用單核細(xì)胞,如霉菌或放線菌的孢子或細(xì)菌的芽孢 ? 2 細(xì)胞的生理狀態(tài)對(duì)誘變處理也會(huì)產(chǎn)生很大的影響。細(xì)菌在 對(duì)數(shù)期誘變處理 效果較好; ? 霉菌或放線菌的分生孢子一般都處于休眠狀態(tài),所以培養(yǎng)時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)孢子影響不大,但稍加萌發(fā)后的孢子則可提高誘變效率。 ? 在實(shí)際工作中,要得到均勻分散的細(xì)胞懸液,通常可用無(wú)菌的玻璃珠來(lái)打散成團(tuán)的細(xì)胞, ? 一般處理真菌的孢子或酵母細(xì)胞時(shí),其懸浮液的濃度大約為 106個(gè) /ml,細(xì)菌和放線菌孢子的濃度大約為 108個(gè) /ml。 ? 2 劑量的選擇 受處理?xiàng)l件、菌種情況、誘變劑的種類等多種因素的影響。劑量一般指強(qiáng)度與作用時(shí)間的乘積。 ? 要確定一個(gè)合適的劑量,通常要進(jìn)行多次試驗(yàn)。在實(shí)際工作中,突變率往往隨劑量的增高而提高, 但達(dá)到一定程度后,再提高劑量反而會(huì)使突變率下降。 ?根據(jù)對(duì)紫外線、 X射線和乙烯亞胺等誘變效應(yīng)的研究結(jié)果, 發(fā)現(xiàn)正變較多地出現(xiàn)在偏低的劑量中 , 而負(fù)變則較多地出現(xiàn)于偏高的劑量中 , 還發(fā)現(xiàn)經(jīng)多次誘變而提高產(chǎn)量的菌株中,更容易出現(xiàn)負(fù)變。 ?因此,在誘變育種工作中,目前比較傾向于采用較低的劑量。例如,過(guò)去在用紫外線作誘變劑時(shí), 常采用殺菌率為 99%的劑量 ,而近年來(lái)則傾向于采用殺菌率為 30%~ 75%的劑量 。 3 中間培養(yǎng) 讓變異處理后細(xì)胞在 液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)幾小時(shí) , 以讓細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制 , 讓細(xì)胞繁殖幾代 , 以得到純的變異細(xì)胞 。 若不經(jīng)液體培養(yǎng)基的中間培養(yǎng) , 直接在平皿上分離就會(huì)出現(xiàn) 變異和不變異 細(xì)胞同時(shí)存在于一個(gè)菌落內(nèi)的可能 ,形成混雜菌落 , 以致造成篩選結(jié)果的不穩(wěn)定和將來(lái)的菌株退化 。 ? 篩選分初篩和復(fù)篩 。 初篩以迅速篩出大量的 達(dá)到初步要求 的分離菌落為目的 , 以量為主 。 ? 復(fù)篩則是 精選 , 以質(zhì)為主 , 也就是以精確度為主 。 因此在具體方法上就有差異 . ?二 高產(chǎn)菌株篩選 ? 初篩一般通過(guò)平板稀釋法獲得單個(gè)菌落,然后對(duì)各個(gè)菌落進(jìn)行有關(guān)性狀的初步測(cè)定,從中選出具有優(yōu)良性狀的菌落。例如,對(duì)抗生素產(chǎn)生菌來(lái)說(shuō),選出抑菌圈大的菌落;對(duì)于蛋白酶產(chǎn)生菌來(lái)說(shuō),選出透明圈大的菌落。此法快速、簡(jiǎn)便,結(jié)果直觀性強(qiáng)。缺點(diǎn)是培養(yǎng)皿的培養(yǎng)條件與三角瓶、發(fā)酵罐的培養(yǎng)條件相差大,兩者結(jié)果常不一致。 ? 復(fù)篩指對(duì)初篩出的菌株的有關(guān)性狀作精確的定量測(cè)定。一般要在搖瓶或臺(tái)式發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng),經(jīng)過(guò)精細(xì)的分析測(cè)定,得出準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。 變異菌株的初步篩選 透明圈法 瓊脂塊培養(yǎng)法
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