基因診斷ppt課件-資料下載頁
2025-04-28 22:56本頁面
【正文】 產(chǎn)物長度： 77 bp ? 檢測標本 痰液、咽拭子、鼻拭子、支氣管肺 泡灌洗液 、血漿、糞便。 ? 檢測方法 逆轉(zhuǎn)錄 巢式 PCR 討 論 ? 疾病的早期即可獲得陽性結(jié)果（早 于血清轉(zhuǎn)換期）。 ? 特異性較高（ SARS患者中的陽性 率約為 80%，對照中的陰性率約為 98%~100%）。 ? 現(xiàn)有的方法敏感性較差，陰性結(jié)果 不能排除病毒感染。 討 論 ?痰液中病毒 RNA濃度極高，說明病毒從呼吸道 排放是主要傳播途徑。 ?血清中檢測到極低濃度的病毒 RNA，提示病毒 復制不僅發(fā)生于呼吸道。 ?病人恢復晚期的糞便中存在病毒 RNA，說明糞 便可能也是一種傳播途徑。 ?鼻、咽拭子中含有的病毒 RNA顯著少于痰液， 提示不適合作為標本（有可能漏檢）。 三、腫瘤的基因診斷 ? 腫瘤是由于遺傳物質(zhì)（腫瘤相關 基因）發(fā)生突變而導致的疾病。 ? 腫瘤相關基因的突變只是增加了 個體對腫瘤的易感性 而并不一定 馬上產(chǎn)生腫瘤， ? 腫瘤的發(fā)生是一個多因素、多步驟 的過程。 ?生物芯片技術(shù) 在今后的腫瘤發(fā)病機制研究和腫瘤的診斷等方面將發(fā)揮越來越顯著的作用 1. 檢測腫瘤相關基因 癌基因、抑癌基因、腫瘤轉(zhuǎn)移基因 2. 檢測腫瘤相關病毒的基因 鼻咽癌 — EB，宮頸癌 — HPV 3. 檢測腫瘤標志物基因或 mRNA 肝癌 — 甲胎蛋白（ AFP） 結(jié)腸癌 — 癌胚抗原（ CEA） ㈠ ras癌基因的檢測 ras基因中最常見的點突變是第 12， 13或 61密碼子突變 檢測方法： 1. PCR/ASO 2. PCRSSCP ㈡ p53的檢測 p53基因突變主要為點突變，熱點區(qū)域位于密碼子 130~290，其中 17 27284密碼子突變最常見。 檢測方法： 1. PCR— SSCP 2. PCR— 測序 3. PCR— RFLP Total RNA from HeLa or NCIH23 cells were reversetranscribed into cDNAs in the presence of BiotindUTP. The biotinlabeled cDNA probes were then hybridized individually to the Human TranSignal p53 Target Gene Array. p53 Target Gene Array 四、基因診斷在法醫(yī)學上的應用 DNA指紋 人類個體的多樣性和個性取決于基因組DNA核苷酸序列的差異，即 DNA的多態(tài)性。其中，微衛(wèi)星 DNA和小衛(wèi)星 DNA等 是重要 的多態(tài)性標志。 DNA指紋 針對重復序列人工合成寡核苷酸短片段作為探針，與經(jīng)過酶切的人基因組 DNA進行 Southren blot 雜交，可以得到大小不等的雜交帶，而且雜交帶的數(shù)目和分子量大小具有個體特異性，就像人的 指紋一樣，因而把這種雜交帶圖譜稱為 DNA指紋或基因指紋。具以下特征： （ 1）一個 DNA指紋探針可同時檢測多個位點的變異，因而更能反映基因組的特異性 （ 2）具有高度的特異性，只有同卵雙生的子女才有完全相同的 指紋 （ 3）具有穩(wěn)定的遺傳性 （ 4） DNA指紋圖譜具有體細胞穩(wěn)定性，即從同一個體中不同組織、血液、肌肉、毛發(fā)等產(chǎn)生的 DNA指紋完全相同。 法醫(yī)學上的應用 ?個人識別 ?親子鑒定 ?性別鑒定
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