【正文】
/cm2* 酸 酸 敏 98% —可見(jiàn),經(jīng)典光引導(dǎo)聚合技術(shù)所存在的問(wèn)題在于: ?探針密度低、分辨力差 ?每步反應(yīng)合成產(chǎn)率低 十三、光敏抗蝕技術(shù) 為此 , Glenn McGall等將光引導(dǎo)合成技術(shù)與半導(dǎo)體工業(yè)所用的光敏抗蝕技術(shù)相合 , 以酸作為保護(hù)劑 , 使探針密度達(dá)到 16,000 spots/cm2以上( 有望接近 106spots/cm2) 。 光具有波粒二象性 , 所以具有衍射的特性 。 當(dāng)擋光板透光孔間的距離足夠小的時(shí)候 , 由于光的衍射 , 使受光部分與非受光部分光照對(duì)比度下降 , 如果仍用前述光引導(dǎo)合成技術(shù)就會(huì)使去保護(hù)作用不夠理想 , 受照射部分與其它部分差別不夠大 , 聚合純度不高 , 降低了檢測(cè)結(jié)果的信噪比 (signalnoise ratio), 從而影響了聚合點(diǎn)陣的密度的提高 。 光敏抗蝕劑的解離對(duì)照度的依賴是非線性的 , 所以當(dāng)照度達(dá)到一定值時(shí)它就會(huì)解離 , 這樣就部分地解決了由于光衍射引起的問(wèn)題雖然由此增加了技術(shù)的復(fù)雜性 , 但卻明顯地提高了聚合點(diǎn)陣的密度 。 玻璃支持物c o a tp h o t o r e s i s t暴光m a s kh υ去保護(hù)NHH偶聯(lián)r e p e a t圖 4 光敏抗蝕法光引導(dǎo)原位合成技術(shù)示意圖十四、基因芯片技術(shù)的應(yīng)用 ? 利用基因芯片進(jìn)行雜交測(cè)序 基因芯片不僅可對(duì)大量基因或序列同時(shí) 、快速進(jìn)行定性 、 定量分析 , 而且作為一種極有發(fā)展前途的測(cè)序策略也倍受人們的重視 。 以圖 5為例 , 首先將八聚體寡核苷酸所有可能的序列組合合成或固定于片基上 , 對(duì)于每一序列其在片基上的位置是預(yù)先決定好的 。 樣品擴(kuò)增并經(jīng)標(biāo)記后與片基上所有序列進(jìn)行雜交反應(yīng) 。 這樣 , 就會(huì)出現(xiàn)特定的雜交圖譜 , 有雜交信號(hào)部位的寡核苷酸片段與待測(cè)樣品序列是互補(bǔ)的最后分析產(chǎn)生雜交信號(hào)的寡核苷酸序列的重疊情況進(jìn)而推導(dǎo)出樣品的核酸序列 。 利用基因芯片進(jìn)行雜交測(cè)序的原理 1 A T A C G T T A2 G T T A G A T C3 A C G T T A G A4 C G T T A G A T5 G T T A G A T CD N A 樣品 T A T G C A A T C T A G與基因芯片上 65 , 00 0 種可能的八聚體進(jìn)行雜交從而形成特定的結(jié)合圖形計(jì)算機(jī)分析雜交圖象并由探針的重疊情況推導(dǎo)樣品的核酸序列1 A T A C G T T A3 T A C G T T A G4 A C G T T A G A2 C G T T A G A T5 G T T A G A T C3 T A C G T T A G4 A C G T T A G A2 C G T T A G A T互補(bǔ)序列為: A T A C G T T A G A T C樣品序列為: T A T G C A A T C T A G? 基因芯片技術(shù)與生物傳感器的結(jié)合應(yīng)用 ? 基因芯片技術(shù)在分子免疫學(xué)中的應(yīng)用 ? 基因芯片技術(shù)在基因表達(dá)譜測(cè)定中的應(yīng)用 ? 基因芯片技術(shù)在突變檢測(cè)及多態(tài)性分析方面的應(yīng)用 ? 基因芯片技術(shù)在基因組文庫(kù)作圖中的應(yīng)用