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正文內(nèi)容

分子生物學(xué)檢驗技術(shù)課程教學(xué)大綱-資料下載頁

2024-11-01 15:58本頁面

【導(dǎo)讀】葿蝿羋薅螇螈肇莈螃螇膀蚃蠆螇節(jié)蒆薅螆莄艿襖螅肄蒄螀螄膆芇蚆袃羋蒂薂袂羈芅蒈袁膀蒁袆袁芃莄螂袀蒞蕿蚈衿肅莂薄袈膇薇蒀袇艿莀蝿羆罿薆蚅羅肁莈薁羅芄薄薇羄莆蕆裊羃肆芀螁膈蒅蚇羈芀羋薃肀羀蒃葿聿肂芆螈聿膄蒂蚄肈莇芄蝕肇肆薀薆肆腿莃裊肅芁薈螁肄莃莁蚇膄肅薇薃螀膅荿葿蝿羋薅螇螈肇莈螃螇膀蚃蠆螇節(jié)蒆薅螆莄艿襖螅肄蒄螀螄膆芇蚆袃羋蒂薂袂羈芅蒈袁膀蒁袆袁芃莄螂袀蒞蕿蚈衿肅莂薄袈膇薇蒀袇艿莀蝿羆罿薆蚅羅肁莈薁羅芄薄薇羄莆蕆裊羃肆芀螁膈蒅蚇羈芀羋薃肀羀蒃葿聿肂芆螈聿膄蒂蚄肈莇芄蝕肇肆薀薆肆腿莃裊肅芁薈螁肄莃莁蚇膄肅薇薃螀膅荿葿蝿羋薅螇螈肇莈螃螇膀蚃蠆螇節(jié)蒆薅螆莄艿襖螅肄蒄螀螄膆芇蚆袃羋蒂薂袂羈芅蒈袁膀蒁袆袁芃莄螂袀蒞蕿蚈衿肅莂薄袈膇薇蒀袇艿莀蝿羆罿薆蚅羅肁莈薁羅芄薄薇羄莆蕆裊羃肆芀螁膈蒅蚇羈芀羋薃肀羀蒃葿聿肂芆螈聿膄蒂蚄肈莇芄蝕肇肆薀薆肆腿莃裊肅芁薈螁肄莃莁蚇膄肅薇薃螀膅荿葿蝿羋薅螇螈肇莈螃螇膀蚃蠆螇節(jié)蒆薅螆莄

  

【正文】 6 學(xué)時 【實驗要求】掌握操作步驟 【實驗操作】 取 ,加入 Eppendorf 管中,加入 1ml的細(xì)胞裂解緩沖液,充分混勻使其溶血,轉(zhuǎn)入 離心管中,加入蛋白酶 K ( 500ug/ml) 20μl,混勻。在 65℃ 恒溫水浴鍋中水浴 30min,也可轉(zhuǎn)入 37℃ 水浴 12~ 24h,間歇振蕩離心管數(shù)次。于臺式離心機以12020 rpm 離心 5min,取上清液入另一離心管中。 加 2 倍體積異丙醇,倒轉(zhuǎn)混勻后,可以看見絲狀物,用 100ul 吸頭挑出,晾干,用 200ul TE 重新溶解。(可進行 PCR 反應(yīng)等,需要進一步純化的按下列步驟進行) 加等量的酚 /氯仿 /異戊醇振蕩混勻, 12020 rpm 離心, 5min。 取上層溶液至另一管,加入等體積的氯仿 /異戊醇,振蕩混勻, 12020 rpm 離心, 5min。 取上層溶液至另一管,加入 1/2 體積的 ,混勻后室溫沉淀 2min ,12020 rpm 離心 ,10min。 小心倒掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,將附于管壁的殘余液滴除掉。 用 1ml 70%乙醇洗滌沉淀物 1 次, 12020 rpm 離心, 5min。 小心倒掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,將附于管壁的殘余液滴除掉,室溫干燥。 加 200ul TE重新溶解沉淀物。 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。 【思考題】如何檢測 DNA濃度及完整性? 五、各教學(xué)環(huán)節(jié)學(xué)時及進度分配表 六、考核方式 本課程為必修考查課,考核采用形成性考試加終結(jié)性考試相結(jié)合的方式。考核要求主要是教學(xué)大綱要求的基本知識和基本理論,適當(dāng)考核學(xué)生分析問題和解決問題的能力 ,簡要考核學(xué)生對前沿知識的了解程度。 考核方式:理論課出勤和課堂表現(xiàn)、實驗課考核、課程結(jié)業(yè)理論考試(閉卷)。課程結(jié)業(yè)理論考試(閉卷)題型及所占分值:選擇題 1 分 40(其中 A型題 30 分, B型題 5 分 X 型題 5 分);概念題 2 分 5;填空題 1 分 10;簡答題 5 分 5;病例分析 2 題。 成績構(gòu)成:平時成績(出勤和課堂表現(xiàn)占 5%、實驗課成績占 20%)占 25%;課程結(jié)業(yè)理論考試成績(閉卷)占 75%。 七、推薦教材和教學(xué)參考書書目 參考教材: 《分子生物學(xué)檢驗技術(shù)》第 1 版,主編:傅桂蓮 人民衛(wèi)生出版社, 2020 年出版 主要參考書: 《分子生物學(xué)檢驗技術(shù)習(xí)題集》主編:樊綺詩、呂建新 人民衛(wèi)生出版社, 2
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