【正文】 et復(fù)合物。起始復(fù)合物的生成除了需要 GTP提供能量外，還需要 Mg2+,NH4+，三個(gè)起始因子（IF1，IF2，IF3） 。38 為什么核糖體可以與 mRNA上的 SD序列結(jié)合？細(xì)菌 30S亞基具有專一性的識(shí)別和選擇 mRNA起始點(diǎn)的性質(zhì)，二 IF3能協(xié)助該亞基完成這種選擇。30S 亞基通過其 16S rRNA的 3’端與 mRNA5’端起始密碼子上游堿基配對結(jié)合。幾乎所有原核生物 mRNA上都有一個(gè) 5’－AGGAGGU－3’序列即 SD序列，這個(gè)富嘌呤區(qū)與30S亞基上 16S rRNA3’端的富嘧啶區(qū)序列 5’－GAUCACCUCCUUA－3’相互補(bǔ)，進(jìn)行識(shí)別，幫助從起始 AUG處開始翻譯。39 蛋白質(zhì)合成的基本過程如何？P122蛋白質(zhì)的生物合成包括氨基酸活化、肽鏈的起始、伸長、終止以及新合成多肽鏈的折疊和加工。氨基酸的活化：蛋白質(zhì)合成的起始需要核糖體大、小亞基，起始 tRNA和幾十個(gè)蛋白因子的參與，在模板 mRNA編碼區(qū) 5’端形成核糖體－mRNA－起始 tRNA復(fù)合物并將甲酰甲硫氨酸放入核糖體 P位點(diǎn)。氨基酸必須在氨?！猼RNA 合成酶的作用下生成活化氨基酸——AAtRNA。原核：七種成份：①30S 小亞基②模板 mRNA③fMettRNA fMet④3 個(gè)翻譯起始因子（IFIFIF3）⑤GTP⑥50S 大亞基⑦M(jìn)g 2＋翻譯的起始：30S 小亞基首先與翻譯起始因子 IF1，IF2 結(jié)合，通過 SD序列與mRNA模板相結(jié)合。在 IF2和 GTP的幫助下，fMettRNA fMet進(jìn)入小亞基的 P位，tRNA 上的反密碼子與mRNA上的起始密碼子配對。帶有 tRNA,mRNA，3 個(gè)翻譯起始因子的小亞基復(fù)合物與 50S大亞基結(jié)合，GTP 水解，釋放翻譯起始因子。真核：與原核生物基本相同，但存在差異 真核 mRNA存在 m7GpppNp帽子結(jié)構(gòu)，能促進(jìn)起始反應(yīng)，核糖體 40S起始復(fù)合物形成過程中有帽子結(jié)合蛋白，能專一地識(shí)別 mRNA帽子結(jié)構(gòu)，與 mRNA5’端結(jié)合生成蛋白質(zhì)－mRNA 復(fù)合物，并利用該復(fù)合物對 eIF3的親和力與含有 eIF3的 40S亞基結(jié)合。 40S 亞基能識(shí)別起始密碼子 AUG。40S 亞基先結(jié)合再 mRNA上 5’端，然后沿 mRNA移動(dòng)至遇到 AUG發(fā)生較為穩(wěn)定的相互作用（由于 MettRNAiMet的反密碼子與 AUG配對的結(jié)果） ，與 60S亞基生成 80S起始復(fù)合物。肽鏈的延伸：生成起始復(fù)合物，第一個(gè)氨基酸與核糖體結(jié)合以后，肽鏈開始伸長。按照 mRNA模板密碼子的排列，氨基酸通過新生肽鍵的方式被有序地結(jié)合上去。肽鏈延伸由許多循環(huán)組成，每加一個(gè)氨基酸就是一個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)包括 AAtRNA與核糖體結(jié)合、肽鍵的生成和位移。后續(xù) AAtRNA與核糖體結(jié)合：起始復(fù)合物形成后，第二個(gè) AAtRNA在延伸因子 EFTu及 GTP作用下，生成 AAtRNA?EFTu?GTP復(fù)合物，然后結(jié)合到核糖體的 A位上。肽鍵的生成：AAtRNA 占 A位，fMettRNA fMet占 P位，在肽基轉(zhuǎn)移酶催化下，A 位上的 AAtRNA轉(zhuǎn)移到 P位，與 fMettRNAfMet上的氨基酸生成肽鍵，起始 tRNA在完成使命11 / 12后離開核糖體 P位點(diǎn)，A 位點(diǎn)準(zhǔn)備接受新的 AAtRNA，開始下一輪合成反應(yīng)。位移：核糖體向 mRNA3’端方向移一個(gè)密碼子，此時(shí)，氨基酸與第二個(gè)密碼子相結(jié)合的二肽基 tRNA2從 A位進(jìn)入 P位，去氨酰－tRNA 被擠入 E位，mRNA 上的第三位密碼子則對應(yīng)于 A位。肽鏈的終止：肽鏈的延伸過程中，當(dāng)終止密碼子 UAA、UAG 或 UGA出現(xiàn)在核糖體的 A位時(shí)，沒有相應(yīng)的 AAtRNA能與之結(jié)合，而釋放因子能識(shí)別這些密碼子并與之結(jié)合，水解 P位上多肽鏈與 tRNA之間的二酯鍵。接著，新生的肽鏈和 tRNA從核糖體上釋放，核糖體大、小亞基解體，蛋白質(zhì)合成結(jié)束。蛋白質(zhì)前體的加工：N 端 fMet或 Met的切除。不管是原核生物還是真核生物，N 端的甲硫氨酸往往在多肽鏈合成完畢之前就被切除。二硫鍵的形成。mRNA 中沒有胱氨酸的密碼子，而不少蛋白質(zhì)都含有二硫鍵，這是蛋白質(zhì)合成后通過兩個(gè)半胱氨酸的氧化作用生成的。特定氨基酸的修飾。氨基酸側(cè)鏈的修飾作用包括磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羥基化和羧基化等。40 原核、真核細(xì)胞核糖體大小亞基的基本組成成分有哪些？已知大腸桿菌核糖體小亞基由 21中蛋白質(zhì)組成，分別用 S1,……，S 21表示，大亞基由36種蛋白質(zhì)組成，分別用 L1，……，L 36表示。真核生物細(xì)胞核糖體蛋白質(zhì)種，大亞基含有 49種蛋白質(zhì)，小亞基由 33種蛋白質(zhì)，它們的相對分子質(zhì)量在 8103～10 4之間。41 核糖體上存在有哪些位點(diǎn)，各個(gè)位點(diǎn)的作用是什么？mRNA結(jié)合部位：A位：結(jié)合或接受 AAtRNA的部位；P位：肽基轉(zhuǎn)移部位；結(jié)合或接受肽基 tRNA的部位；轉(zhuǎn)肽酶中心：肽鍵形成的部位；各種延伸因子的結(jié)合位點(diǎn)。42 肽鏈終止過程中釋放因子 RF1，RF2 和 RF3的主要作用是什么？RF1能識(shí)別 UAG和 TAA,RF2識(shí)別 UGA和 UAA，一旦 RF與終止密碼相結(jié)合，它們就能誘導(dǎo)肽基轉(zhuǎn)移酶把一個(gè)水分子而不是氨基酸加到延伸中的肽鏈上。RF3 可能與核糖體的解體有關(guān)。43 蛋白質(zhì)合成的抑制劑有哪些？其主要作用的特點(diǎn)是什么？蛋白質(zhì)生物合成的抑制劑主要是一些抗生素，如嘌呤霉素、鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素等，此外，如 5－甲基色氨酸、環(huán)己亞胺、白喉毒素、蓖麻蛋白和其他核糖體滅活蛋白等都能抑制蛋白的合成?？股貙Φ鞍踪|(zhì)合成的作用可能是阻止 mRNA與核糖體結(jié)合（氯霉素） ，或阻止 AAtRNA與核糖體結(jié)合（四環(huán)素類） ，或干擾 AAtRNA與核糖體結(jié)合而產(chǎn)生錯(cuò)讀（鏈霉素、新霉素、卡那霉素等） ，或作為競爭性抑制劑抑制蛋白質(zhì)合成。鏈霉素是一種堿性三糖，能干擾 fMettRNA與核糖體的結(jié)合，從而阻止蛋白質(zhì)合成的正確起始，也會(huì)導(dǎo)致 mRNA的錯(cuò)讀。若以多聚（U）作模板，則除苯丙氨酸（UUU）外，異亮氨酸（AUU）也會(huì)被摻入。嘌呤霉素是 AAtRNA的結(jié)構(gòu)類似物，能結(jié)合在核糖體的 A位上，抑制 AAtRNA的進(jìn)入。此外，青霉素、四環(huán)素和紅霉素只與原核細(xì)胞核糖體發(fā)生作用，從而阻遏原核生物蛋白質(zhì)的合成，抑制細(xì)菌生長。氯霉素和嘌呤霉素既能與原核細(xì)胞核糖體結(jié)合，又能與真核生物核糖體結(jié)合，妨礙細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成，影響細(xì)胞生長。44 信號(hào)肽有什么特點(diǎn)？該序列常常位于蛋白質(zhì)的氨基末端，長度一般在 13～36 個(gè)殘基之間，有如下 3個(gè)特點(diǎn)：12 / 12（1）一般帶有 10～15 個(gè)疏水氨基酸；（2）在靠近該序列 N端常常有 1個(gè)或數(shù)個(gè)帶正電荷的氨基酸；（3）在其 C－末端靠近蛋白酶切割位點(diǎn)處常常帶有數(shù)個(gè)極性氨基酸，離切割位點(diǎn)阿最近的那個(gè)氨基酸往往帶有很短的側(cè)鏈（丙氨酸或甘氨酸） 。45 試述轉(zhuǎn)運(yùn)同步機(jī)制在蛋白質(zhì)合成過程中信號(hào)肽的作用。信號(hào)肽假說： 蛋白質(zhì)合成開始于核糖體，當(dāng)翻譯進(jìn)行到 50～70 個(gè)氨基酸殘基后，信號(hào)肽從大亞基中露出，被粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上受體識(shí)別，并與之結(jié)合。信號(hào)肽過膜后被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔信號(hào)肽酶水解，正在合成的新生肽隨之通過蛋白孔道穿越疏水的雙層磷脂，一旦核糖體移到 mRNA的“終止”密碼子，蛋白質(zhì)合成即告完成，翻譯系統(tǒng)解散，膜上的蛋白孔道消失，核糖體處于自由狀態(tài)。（1）完整的信號(hào)多肽是保證蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)的必要條件。信號(hào)序列中疏水性氨基酸突變成親水性氨基酸后，會(huì)阻止蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)而使新生蛋白質(zhì)以前體形式積累在胞質(zhì)中。（2） 、僅有完整信號(hào)肽還不足以保證蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生。 （要求蛋白質(zhì)信號(hào)序列以外的部分有相應(yīng)的結(jié)構(gòu)變化）（3）信號(hào)肽切除并不是運(yùn)轉(zhuǎn)所必需的。（4）并不是所有的運(yùn)轉(zhuǎn)蛋白質(zhì)都有可降解的信號(hào)