【正文】 求 2022 ? 化學(xué)藥品注射劑基本要求 — 2022（ 征求意見(jiàn) P13） 注射劑滅菌工藝 1） 輸液劑的滅菌應(yīng)采用熱壓滅菌 ， 首選過(guò)度殺滅法 ， 保證滅菌后的SAL≤10－ 12， 如不能耐受過(guò)度殺滅 ， 可考慮殘存概率法 ， 但需保證 SAL≤10－ 6。 必要時(shí)可通過(guò)優(yōu)化處方工藝以改善藥物的耐熱性 。 74 GMP對(duì)滅菌工藝驗(yàn)證要求 ? Before any sterilization process is adopted, its suitability for the product amp。 its efficacy in achieving the desired sterilizing conditions in all parts of each type of load to be processed should be demonstrated by physical measurements and by biological indicators, where appropriate. The validity of the process should be verified at scheduled intervals, at least annually, … 新版 GMP附錄 1 ? 第 63條： 任何滅菌工藝在投入使用前，必須通過(guò)物理檢測(cè)手段和 生物指示劑 試驗(yàn)，驗(yàn)證其對(duì)產(chǎn)品的適用性 及所有部位達(dá)到了滅菌效果 。 ? 第 64條： 應(yīng)定期對(duì)滅菌工藝的有效性進(jìn)行再驗(yàn)證（每年至少一次）。設(shè)備重大變更后，須進(jìn)行再驗(yàn)證 。 75 濕熱滅菌工藝驗(yàn)證 1. 滅菌工藝驗(yàn)證資料包括 ? 滅菌設(shè)備的安裝確認(rèn) ? 滅菌設(shè)備的運(yùn)行確認(rèn) ? 滅菌工藝的驗(yàn)證 ? 先對(duì)設(shè)備溫度儀表和驗(yàn)證用儀表進(jìn)行校準(zhǔn) ? 空載熱分布－找到滅菌過(guò)程中滅菌設(shè)備的最冷點(diǎn) ? 不同裝載形式、不同裝量規(guī)格產(chǎn)品的熱穿透試驗(yàn)－產(chǎn)品獲得的 F0 ? 生物指示劑（ BI）驗(yàn)證 微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn) 76 滅菌設(shè)備的 PQ ? 空載熱分布和滿載熱分布試驗(yàn) ? 溫度探頭 1020支，探頭精確度 177。 ℃ ? 必須有探頭與腔室原探頭并列放置 ? 檢測(cè)報(bào)警和安全系統(tǒng)的可靠性 ? 真空系統(tǒng)的可靠性 (產(chǎn)生的效率、維持時(shí)間等 ) ? 滅菌程序一般選擇 121℃ 20分鐘 滅菌設(shè)備的 PQ ? 空載熱分布和滿載熱分布試驗(yàn) ? 多孔 /堅(jiān)硬裝載：在滅菌恒溫段內(nèi)，所有探頭溫度都在平均溫度的 177。 ℃ 以?xún)?nèi)；在任何時(shí)間各點(diǎn)最大溫差不超過(guò) 2 ℃ ； 實(shí)際滅菌時(shí)間控制在期望值的 177。 1%以?xún)?nèi)；實(shí)際滅菌壓力控制在期望值的 177。 %以?xún)?nèi)；冷點(diǎn)位置固定 ? 液體裝載：在滅菌恒溫段內(nèi)，所有探頭溫度都在平均溫度的 177。 1℃ 以?xún)?nèi)；在任何時(shí)間各點(diǎn)最大溫差不超過(guò) ℃ ； 實(shí)際滅菌時(shí)間控制在期望值的 177。 1%以?xún)?nèi)；其它各項(xiàng)性能指標(biāo)均一 ? 重復(fù)試驗(yàn)至少 3次以證明重現(xiàn)性 . 滅菌工藝的 PV ? 每種裝載方式下的熱穿透試驗(yàn) ? 證明特定滅菌程序殺滅微生物的均一性和有效性 。 ? 重復(fù)性試驗(yàn)證明滅菌程序的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性 。 ? 證明滅菌程序?qū)Ρ粶缇锲返倪m用性； ? 非過(guò)度殺滅法： 8≤F0平均值 177。 3STD≤產(chǎn)品滅菌 F0值上限； ? 過(guò)度殺滅法： 12≤各點(diǎn) F0值 ≤產(chǎn)品滅菌 F0上限 ? 容器內(nèi)部產(chǎn)品的熱穿透試驗(yàn) ? 證明在每種裝載方式下： 各點(diǎn)溫度分布的均一性 滅菌結(jié)果的重現(xiàn)性 。 ? 證明最冷點(diǎn)達(dá)到了設(shè)定要求。 高 中 低 不同滅菌溫度下的滅菌率 滅菌溫度 ℃ 滅菌率 L 100 105 112 115 116 118 120 121 122 123 ?滅菌率：為達(dá)到與某一溫度下滅菌 1分鐘相同的滅菌效果，在 121℃ 下滅菌所需要的滅菌時(shí)間 ?100℃ 滅菌時(shí) 1分鐘，相當(dāng)于 121 ℃ 滅菌 ，即 Fo值為 。 ?105℃ 滅菌 40分鐘時(shí)， Fo約為 1分鐘，能使 D值為 1分鐘的芽孢數(shù)量下降 1個(gè)對(duì)數(shù)單位 80 滅菌過(guò)程的 Fo 示意 滅菌過(guò)程的溫度時(shí)間曲線產(chǎn)品溫度腔室溫度保溫升溫 冷卻T℃ L（ 滅菌率）t（ 分）81 PV常用 BI形式 ? 生物指示劑試驗(yàn) ? 結(jié)果與熱穿透試驗(yàn)保持一致 ? 所有測(cè)試點(diǎn)均應(yīng)確保 SAL不低于 106 ? 試驗(yàn)次數(shù)足以符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求（至少重復(fù) 3次試驗(yàn)，試樣數(shù)為 10 – 20支 /次）。 濕熱滅菌驗(yàn)證常用 BI 菌種名稱(chēng) D121 值范圍 (min) 嗜熱脂肪芽孢桿菌 Bacillus stearothermophilus 枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis 凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans 梭狀芽孢桿菌 Clostridium sporogenes 嗜熱脂肪芽孢桿菌 (ATCC 7953)孢子 滅菌完成后取出夾破安瓿確認(rèn)底部孢子條被培養(yǎng)基覆蓋后 55~60℃ 培養(yǎng)，連續(xù)觀察 24小時(shí)，期間培養(yǎng)基顏色變黃且有混濁出現(xiàn)證明滅菌不徹底。 數(shù)量級(jí)為 106級(jí)，用于高壓濕熱滅菌，滅菌時(shí)只需放置在驗(yàn)證點(diǎn)即可。 84 自含式生物指示劑，包括指示劑和培養(yǎng)基。 3，容器密封性驗(yàn)證 ? 物理法 ? 微生物侵入試驗(yàn) ? 成品儲(chǔ)存期內(nèi)的密封性考察 85 密封系統(tǒng)完好性 物理法 待確認(rèn)的密封口 WFI 支架 氯化鈉溶液 容器 經(jīng)滅菌后，氯化鈉有否進(jìn)入瓶?jī)?nèi)？ 86 密封系統(tǒng)完好性 挑戰(zhàn)試驗(yàn) 待確認(rèn)的密封口 培養(yǎng)基 （ SCDM/2） 支架 菌液 應(yīng) ≥ 106個(gè) CFU/ml 容器 常用菌： 銅綠假單胞菌（ ATCC9027) 大腸埃希氏菌 87 試驗(yàn)方法簡(jiǎn)介 微生物侵入試驗(yàn) ? 往產(chǎn)品容器內(nèi)灌入培養(yǎng)基并按常規(guī)方式壓塞軋蓋，滅菌后冷卻備用。 ? 將冷卻后的容器倒置，并將瓶口完全浸沒(méi)于高濃度的運(yùn)動(dòng)性細(xì)菌溶液 (如 108個(gè)菌 /ml)內(nèi)，如有大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌，浸泡時(shí)間 4小時(shí)以上。 ? 取出后，將容器外表面消毒并培養(yǎng)（ 3035℃ ） 7天 ，檢查容器內(nèi)是否有挑戰(zhàn)性細(xì)菌生長(zhǎng)。 ? 同時(shí)：作陽(yáng)性對(duì)照，不用浸泡，培養(yǎng)基中直接接種入 10－100CFU 88 成品儲(chǔ)存期內(nèi)密封性檢查 ? 此試驗(yàn)條件比實(shí)際儲(chǔ)存和運(yùn)輸時(shí)產(chǎn)品遭微生物污染的條件要苛刻得多。 ? 另應(yīng)多留一些裝有培養(yǎng)基產(chǎn)品的容器，并置于與穩(wěn)定性樣品相同的貯存條件下存放。 ? 每隔一定的時(shí)間間隔（如 12， 24， 36和 48個(gè)月等），取出部分容器，按上述方法進(jìn)行檢測(cè)，以確定密封系統(tǒng)的穩(wěn)定性。 89 六、小 結(jié) 90 人員 廠房 /設(shè)施 /設(shè)備 環(huán)境控制 物料 工藝 無(wú)菌 熱原內(nèi)毒素 LVP 不溶性微粒 生產(chǎn)管理 新技術(shù)采用 主要參考資料 ? EUGMP附錄 1， 無(wú)菌藥品生產(chǎn) 2022年 ? WHO 無(wú)菌藥品生產(chǎn) 2022（修訂稿） ? FDA無(wú)菌藥品無(wú)菌工藝生產(chǎn)指南 2022年 ? 藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南（ 2022） ? 新版 GMP（修訂稿） 2022 ? 1998版 GMP附錄 1《 無(wú)菌藥品 》 91 92 Thanks!