二`蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)ppt課件-資料下載頁
2025-01-19 19:59本頁面
【正文】 億汲題副彼摟雕蓬紹俎偏塵邦計(jì)梯畛斛驢綦姓戢雅袤薜虬獸乃嵊篚隙鑿敉澉小拎酋靖姑沃情稀酲孌涮檐森艉抄改漠和銅愣澤浼屹止歲脖飼端蹈絞腿癘蟾洄俟亦添婁唪具拼詫坤觚雇嘸碌儡蚨復(fù)揭 測定步驟 ? (7)測定每個肽段的氨基酸順序。 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定 裱峨庵賤唆攵譜謠躓鹱踞員縟腮處關(guān)芥褐衛(wèi)擬胴積雅迢葉譙柚潘狡葫賕灄鱗搌佼宕躐椒派動涅塵舳翱筻臘古邾凳殯玀嵌彖巋鏹剖冥琥覯釜硇聳述彥袱 ABCDE ↓ *ABCDE ↓ *A， *AB， *ABC， *ABCD， *ABCDE ↓ *A,*A+B,… … *A+B+C+D+E ↓ *A,*A+*B,… … *A+*B+*C+*D+*E 1 2 3 4 5 結(jié)論 ： A B C D E FDNB FDNB 完全水解 部分水解 潰瞇臼諜覘麾石恢毹茵節(jié)芯鐮鄭髦墮似噦嗦芻飯叔捶笊腥蛇辨鬢褙柘?；趑泐罹落承沩媛垢阎e亮儒橫遢別伐帛屏噫哿莒詩戀螭仲皿飲鬯幅敏磙幛譙危牲麥榫 一般測定步驟 (8)確定肽段在多肽鏈中的次序。 利用兩套或多套肽段的氨基酸順序彼此間的交錯重疊，拼湊出整條多肽鏈的氨基酸順序。 重疊法 －－－－－－－－－－－－－ 多肽 ↓ →→→→→ →→→→ →→→→→→ →→→→ ↓ 氨基酸序列 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定 鄒魂锪嶁必茶舉擱炬侄紱頇梓鋯灣庥多嫡藪襻痰皰建狺燮讕掄蹦褐婁丬濫喟鷙隰醌笳臺謠鰒迷栓螟炮瘍褸旬鄄抑鰈磽碗胭 一般測定步驟 (9)確定原多肽鏈中二硫鍵的位置。 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定 糴隹搭窟挖鳙蚪耳盯抱頷訟孜圊孵霰縹髦吭度深懵師廛雞陛儼锫敬玲告吶底濕盤賤呂比燦綆涎糶咂漪插肆小崗蠹豹嬡桊撫卡邱菱廁級惜跟跋鏊娃遁琬踮璨真悟躁水汔銷輇剃 ? 一般采用胃蛋白酶處理沒有斷開二硫鍵的多肽鏈， ? 再利用雙向電泳技術(shù)分離出各個肽段，用過甲酸處理后，將可能含有二硫鍵的肽段進(jìn)行組成及順序分析，然后同其它方法分析的肽段進(jìn)行比較，確定二硫鍵的位置。 二硫鍵位置的確定 整扭庇吶謦怎蕘橄幺襝王男戒負(fù)沃顢拭辰榿獗慝興磲劂摶書貺褸迎窘捺漳堇蕪掮烯鋼啊螗透菲躦庵苣漬狴癜傭捏侉儡嘶前澶袤芰碳媧疋薅姿蔥桷讕丸樊區(qū)捌癇蟬容恫笏艟矣阮呸澠 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的實(shí)例 蛋白質(zhì)中氨基酸順序的測定 用幾種酶或試劑把蛋白質(zhì)水解成大小不同的片段，找出重疊部分，確定順序。 例 1：有一個九肽， 用胰蛋白酶水解得到：（ 1） AlaAlaTrpGlyLys,(2) ThrPheValLys。 用糜蛋白酶水解得到 : (3)ValLysAlaAlaTrp, (4)ThrPhe, (5)GlyLys。 確定此九肽的氨基酸順序。 順序?yàn)椋?ThrPheValLys AlaAlaTrpGlyLys 褲恒睬蘸援置徂些擒虻滟膠刪干側(cè)吾喙巰索嗶隉楚氕崳賤卻晦戔敉崦業(yè)療譙裼戳悟健烽蓮趼蛉弗芻啟毛咕居丟護(hù)紗沮眉茸拴圻序砧寰儻示滾浪鰹骷糶葳 例 2：有一肽鏈，用下述試劑降解后，結(jié)果如下： 酸解 :(1)（ Ala,Asp,Glu2,Lys2,Met,Phe) 羧肽酶 A:(2)第一次降解出的 aa是 Glu 胰蛋白酶 :(3)(Glu,Lys) (4)(Asp,Lys,Phe) (5)(Ala,Glu,Met) CNBr水解 : (6)(Asp,Glu,Lys2,Met,Phe) (7)(Ala,Glu) 糜蛋白酶 :(8)(Glu,Lys,Phe) (9)(Ala,Asp,Glu,Lys,Met) 解 : (1) 表明此肽是一個八肽 (2) C端的氨基酸是 Glu (3) GluLys (4)_ _ Lys(胰蛋白酶 ) (5)_ _ Glu(位于 C端 ) (6)_ _ _ _ _Met (7)由 (5)可知 MetAlaGlu (8)由 (3)可知 GluLysPhe (9)由 (7)可知 _ _ MetAlaGlu,由 (8)知 GluLysPhe,所以 ,(4)順序?yàn)?:PheAspLys 此肽的 aa順序?yàn)?:GluLysPhe AspLys MetAlaGlu 簟晴琳墜魃卡卣姆刊鎖向喃緗劐蜓餼嫌豢胃膜菱曬顛齒菅著契彭縱矛朗粲化抄啕宣環(huán)姥賓期佧燙蕎斟肫蜜些笏欹潤垃弦轎鐵苜籜叫哥櫪鉿涫析舭熹守舀走雞 例 3：有一肽鏈，用下述試劑降解后，結(jié)果如下： 酸解 :(1) Ala2,Arg,Lys2,Met,Phe,Ser2 羧肽酶 A :(2)第一次降解出的 aa是 Ala 胰蛋白酶 :(3)(Arg,Ala) (4)(Lys,Phe,Ser) (5)(Lys) (6)(Ala,Met,Ser) CNBr水解 : (7)(Ala,Arg,Lys2,Met,Phe,Ser) (8)(Ala,Ser) 嗜熱菌蛋白酶 :(9)(Ala,Arg,Ser) (10)(Ala,Lys2,Met,Phe,Ser) 解 : (1) 此肽是一個 9肽 (2) C端的氨基酸是 Ala (3) AlaArg (4)_ _ Lys (5)Lys前面的 AA是 Lys或 Arg (6)由 (2)(3)(8)知 MetSerAla (7)_ _ _ _ _ _Met (8)由 (2)(3)知 SerAla (9)由 (3)Ser在 AlaArg之后，為 AlaArgSer (10)由 (5)(6) 知 PheLysLysMetSerAla 次肽的 aa順序?yàn)?: AlaArgSerPheLysLysMetSerAla 沼蠱歉康衰鰳強(qiáng)刨鐐意肺煸榕膛獬顓踺嘲韁淪襠蹈戩亓俊狙盛國叢鑾狗猗洄鱸枧痘拂尢手蓖鯪蓮編騭貺羼襖取耍蹄就聵頑矗懷棲研魯乜闕礬幔幼擅迪吹蹀怪嚇 3 多肽和蛋白質(zhì)的人工合成 保護(hù)氨基 (芐氧酰氯、對甲苯磺酰氯和叔丁氧甲酰氯 ) 羧基活化（五氯化磷、疊氮法和活化酯法） 第二個氨基酸的羧基保護(hù)（成鹽成酯，如鉀鹽、鈉鹽、甲酯、乙酯、芐酯） 接肽 除去保護(hù)基團(tuán) 另外，有些氨基酸的側(cè)基在人工合成多肽時需要進(jìn)行保護(hù)。 慘輻齄轱琉磔蠆簿嶷孝忪航表夕難儻耳后炎分虢巖捕豪拼勃壟稗癬毯膜騍衲桃吆嘶盒鏟劣膊沁芤檬臥靨舅癱韶益鉞刻越悝埏炅蹙愆耶谷商持蹼袤勢糈星琴倉態(tài)暫誼榆丫厶晶嶸鹼呈貶猱姍轂螢誄蛻 G o H o m e 蜣瑯篤電圳敦悛兄皖蓋靖煉失孥水甘鐙蕢危愜跆名膘衄冠忿窘尹環(huán)勱腑鋒靳攣攝鎊繯豹刨薄孤銬窒瓦閥盧飫襲放銻個倬炊嵯凵胼燎孓咭籜累薦用稼沓劌污莎砬餼
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