【正文】 。職責 責任人：HIV初篩實驗室所有工作人員。工作流程、血清、血漿、樣品可用于HIV抗體檢測。根據(jù)檢測項目的具體要求，確定采集樣品的種類、處理、保存及運輸?shù)臅r限和方法，按照臨床采血技術(shù)規(guī)范的要求操作，遵守生物安全要求。要檢查所需物品是否已備齊，是否在有效期內(nèi)，有無破損，是否足量，特別應(yīng)檢查受檢者信息與樣品容器表面的標記是否一致，并注明樣品采集時間。選擇合適的室內(nèi)（外）采血空間，受檢者坐（臥）于合適的位置，準備采血用具、皮膚消毒用品、采血管及試管架、硬質(zhì)廢棄物容器等。 樣品的編碼和記錄 編號：在送檢化驗單上將每份樣品編號，進行樣本的唯一性標識。樣本的唯一性標識：檢測日期年份碼（二位）：00－99；檢測日期月份碼（二位）：01－12；檢測日期日期碼（二位）：01－31；當日實驗室收到所有報告的申請單序號（四位）：0001－9999；以上依次排列組成一個十位長度的代碼既是該樣本的唯一編號識別碼，例如1008010030。唯一性標識須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改。 樣本登記對于每份標本均需在《HIV初篩實驗室標本接受登記表》上登記，按照表上項目逐項填寫完整，登記內(nèi)容包括送檢日期，患者姓名，年齡，性別，科室，住院號或門鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件樣本管理程序文件編號：HIVCXWJ009版 序：A/1頁 碼：第2頁共4頁受控狀況：在控生效日期：診號，床號，送檢者，接收者等內(nèi)容。建立HIV陽性標本的保存記錄，記錄中填寫陽性標本血清／血漿的儲存量、標本儲存溫度、標本儲存起始時間以及標本保管人姓名。所有經(jīng)確認的陽性標本，包括實驗室留存的標本，應(yīng)送省級體確認中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。 采血前，先對裝有樣品的離心管或濾紙進行標記，核對后編碼。要將標簽貼在試管的側(cè)面，最好使用預(yù)先印制好的、專門用于冷凍儲存的耐低溫標簽。 應(yīng)使用專門的樣品記錄本或登記表記錄樣品，同時錄入電腦保存。 采集和處理樣品 抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑（EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素鈉）的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管中，輕輕顛倒混勻6～8次，備用。 血漿：將采集的抗凝全血1500～3000r/min離心15min，上層即為血漿，吸出置于合適的容器中，備用。 血清：根據(jù)需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取5～10ml靜脈血，室溫下自然放置1～2h，待血液凝固、血塊收縮后再用1500～3000r/min離心15min，吸出血清，置于合適的容器中，備用。 樣品采集后處理、保存、運輸?shù)臅r限和條件，因不同的檢測項目而異，應(yīng)參見不同檢測項目要求。 采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于尖銳危險品容器里，妥善處理，防止發(fā)生職業(yè)暴露。 樣品的保存，短期（1周）內(nèi)進行檢測的可存放于2～8℃， 一周以上應(yīng)存放于20℃以下?！?，3個月以內(nèi)應(yīng)存放于20℃以下。3個月以上應(yīng)置于70℃以下。，篩查陰鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件樣本管理程序文件編號：HIVCXWJ009版 序：A/1頁 碼：第3頁共4頁受控狀況：在控生效日期：性樣品，可根據(jù)具體需要決定保存時間，建議至少保存1～2個月。特殊用途或?qū)ｍ楉椖康臉悠犯鶕?jù)具體要求確定保存時間。 艾滋病檢測確證實驗室收到的篩查陽性樣品，無論確證結(jié)果如何，均應(yīng)將剩余的樣品保存至少10年，特殊用途或?qū)ｍ楉椖康臉悠犯鶕?jù)具體要求確定保存時間。 樣品的運送 應(yīng)符合生物安全要求；要獲得相應(yīng)部門批準并由具有資質(zhì)的人員專程護送。 應(yīng)采用三層容器對樣品進行包裝，隨樣品應(yīng)附有與樣品唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標明受檢者姓名、樣品種類等信息，并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。 第一層容器：直接裝樣品，應(yīng)防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標記，標明樣品的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。 第二層容器：容納并保護第一層容器，可以裝若干個第一層容器。要求不易破碎、帶蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒處理。 第三層容器：容納并保護第二層容器的運輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標簽，注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式，同時要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓”等字樣，還應(yīng)易于消毒。 用于抗體檢測的血清和血漿樣品應(yīng)在凍存條件下運送。 運送樣品必須有記錄。 收樣流程：先檢查每份樣品是否足量，樣品標識是否合乎要求，再核對樣品數(shù)量及標識與送檢化驗單是否一致，化驗單內(nèi)容是否齊全。不符合要求的應(yīng)通知送樣單位更正、補齊資料或拒收，并填寫樣本拒收記錄。，須嚴格遵守醫(yī)院有關(guān)院內(nèi)感染及醫(yī)用垃圾的管理和處理規(guī)定，工作人員須注意保持并隨時檢查容器的完整和無樣本外泄發(fā)生。鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件樣本管理程序文件編號：HIVCXWJ009版 序：A/1頁 碼：第4頁共4頁受控狀況：在控生效日期：，工作人員須仔細核對標本與樣本資料記錄的一致性，準確無誤時，方可進行處理；后續(xù)處理過程中發(fā)現(xiàn)樣本不合格，應(yīng)記錄其狀態(tài)并通知送檢者重新送檢。，脫離工作人員視線的樣本必須是存放于鎖上門的實驗室內(nèi)，保證其安全。，保持容器完整，按廢棄物處理程序處理。記錄中填寫陽性標本血清／血漿的儲存量、標本儲存溫度、標本儲存起始時間以及標本保管人姓名。所有經(jīng)確認的陽性標本，包括實驗室留存的標本，填寫HIV抗體篩查陽性標本送檢單，立即雙人送省級確認中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的單位進一步實驗和保存，不得擅自處理。不能立即送檢的，放在指定的冰箱保存。余下的標本經(jīng)高溫高壓消毒，按廢棄物處理程序處理。引用表格和文件《樣本拒收記錄》HIVJL009《HIV初篩實驗室標本接受登記表》 HIVJL001《廢棄物處理程序》《HIV抗體篩查陽性標本送檢單》HIVJL10目的 確保HIV初篩實驗室報告及時、準確、清晰、客觀。1 范圍 所有HIV初篩實驗室發(fā)出的報告單。2 職責 HIV初篩實驗室當班工作人員應(yīng)嚴格遵守此程序。3 工作流程 所有HIV初篩實驗室發(fā)出的報告單均采用微機打印。 報告單包括以下內(nèi)容： 標題：鄖縣婦幼保健院檢驗科報告單 報告單的唯一性標識碼：即樣本的標識碼。 被檢測樣本的類別：血液。 被檢測樣本的特性和狀態(tài)：溶血、脂血、黃疸等。 被檢測樣本的接收日期和進行檢測的日期。 檢測項目的中文名稱及檢測方法、報告結(jié)果、報告單位、參考范圍。 報告者、審核者以及簽發(fā)日期。 錄入報告單病人資料：在報告區(qū)的計算機上運行酶標儀報告程序；錄入病人資料。流水號：錄入本室該日所有申請單的排列序號；報告單的唯一性標識碼由微機將流水號、實驗室代碼HIV、報告日期自動依次排列生成報告單的唯一性標識碼。就診號：門診申請單錄入收費收據(jù)上的號碼以備患者自已核對；病房申請單錄入住院號。錄入其它相關(guān)資料。 樣本檢測完成后錄入檢測結(jié)果。如果需要復(fù)查，結(jié)果中錄入復(fù)查原因，重新檢測后方能發(fā)出檢驗報告單。 打印報告單：仔細核對病人資料和樣本測試結(jié)果無誤后打印報告單。 審核簽發(fā)報告單：檢查原始申請單與檢驗報告單病人資料（姓名、性別、年齡、科室、診斷等）無錯誤；檢驗報告單與申請單對照無項目漏檢、錯檢；報告結(jié)果無與臨床不相符(如有應(yīng)及時與臨床或相關(guān)人員取得聯(lián)系并能得到合理解釋，在登記表中作相應(yīng)記錄)；審核者手寫簽名后于下午6：00前發(fā)出報告單，并由發(fā)送報告者簽收。 對已發(fā)出報告的有效性發(fā)生疑問時，應(yīng)立即按聯(lián)系方式通知被檢方，如需重新采集樣本，則重新編號，經(jīng)過檢測后，發(fā)出新的報告。不應(yīng)在原報告書上更改。 當臨床科室或患者要求用電話、圖文傳真或其它電子電磁設(shè)備傳送結(jié)果時，應(yīng)按《保密和保護所有權(quán)程序》進行。查詢或補發(fā)報告單在《查詢補發(fā)報告單登記表》中作記錄。說明：為了保護病人的個人隱私，檢驗科所發(fā)的報告一律只發(fā)陰性的報告；陽性報告只通知管床醫(yī)生和本人，無正式的書面報告。4 引用表格和文件 《保密和保護所有權(quán)程序》 《HIV抗體篩查報告》HIVJL011 《查詢補發(fā)報告單登記表》HIVJL012鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件室內(nèi)質(zhì)量控制程序文件編號：HIVCXWJ011版 序：A/1頁 碼：第1頁共2頁受控狀況：在控生效日期：1 目的 控制實驗的重復(fù)性、精密度，并檢測其準確度的改變，提高本室常規(guī)工作中的批間、批內(nèi)標本檢測結(jié)果的一致性，保證患者檢驗結(jié)果的準確性和可靠性。2 范圍 HIV抗體檢測。3 職責 責任人 HIV初篩實驗室當班工作人員。 完成時間 檢測當天完成。 目標 責任人需評估檢測結(jié)果，判定當日結(jié)果是否可以被采用。4 質(zhì)控物來源 隨試劑盒提供的對照品及衛(wèi)生部臨檢中心質(zhì)控物5 工作流程 將陽性對照、陰性對照、質(zhì)控物與待測標本一起進行檢測。 采用即刻法(Crubbs氏法)開展室內(nèi)質(zhì)控,記錄每批次定量檢測項目質(zhì)控物濃度的對數(shù)值、Ct值。 即刻法質(zhì)控方法:每批質(zhì)控物只需連續(xù)測定3次后，即可開始對結(jié)果進行控制分析。 計算：a 計算測定均值和標準差S。b 從測定值中找出X最大值（Xmax）和X最小值（Xmix）。c 計算SI上限值和SI下限值。 SI上限= （Xmax）/S SI下限= （Xmix）/S 評價：查表，將SI上限和SI下限與SI值表比較。n2s 時,表示處于控制范圍內(nèi),可以繼續(xù)往下測定,繼續(xù)重復(fù)各項計算. n3s 之間時,說明該值在2s～3s范圍,處于“告警”狀態(tài)。 n3s 時,說明該值已在 3s范圍之外,屬“失控”。鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件室內(nèi)質(zhì)量控制程序文件編號：HIVCXWJ011版 序：A/1頁 碼：第2頁共2頁受控狀況：在控生效日期：“告警”和“失控”狀態(tài)應(yīng)舍去,重新測定該項質(zhì)控物；舍去的只是本次失控的數(shù)值,其它測定值仍繼續(xù)可用。當檢測的數(shù)字超過20次以后,即可轉(zhuǎn)入使用常規(guī)的質(zhì)控方法(LeveyJennings作圖法)進行質(zhì)控。 Leveyjennings 質(zhì)控法( s作圖法)基本規(guī)則:a. 質(zhì)控血清的測定結(jié)果95%應(yīng)落在177。2S內(nèi),如連續(xù)有5次結(jié)果落在均線一側(cè),應(yīng)有查找原因。b. 所得各次結(jié)果不能連續(xù)5次以上在均值一側(cè)逐漸升高或降低。c. 所得各次結(jié)果不能連續(xù)2次落在177。2S之外。d. 不允許有超出177。3S之外的結(jié)果。 SI值表 失控后的糾正措施:停止實驗，尋找失控原因,當日報告不能發(fā)出。 在《HIV初篩實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)登記表》中記錄質(zhì)控數(shù)據(jù)；如有失控，應(yīng)在《HIV初篩實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制失控處理記錄表》中填寫失控分析報告。 每月底將質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總、制圖。 6 引用表格和文件《HIV初篩實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)登記表》HIVJL013《HIV初篩實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制失控處理記錄表》HIVJL014鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件室間質(zhì)量控制程序文件編號：HIVCXWJ012版 序：A/1頁 碼：第1頁共1頁受控狀況：在控生效日期：1 目的 采用實驗室間比對方法，考核本實驗室檢測結(jié)果準確度，保證患者檢驗結(jié)果的準確性和可靠性。2 范圍 基因擴增所有項目。3 職責 責任人 HIV初篩實驗室當班工作人員。 完成時間 省臨床檢驗中心規(guī)定時間內(nèi)。4 工作流程： 質(zhì)控樣本的接受和驗收：收到質(zhì)控樣本后由相關(guān)人員根據(jù)質(zhì)控樣本的有關(guān)說明對樣本的數(shù)量、批號、包裝進行驗收后記錄于《HIV初篩實驗室接收記錄表》并按要求保存。 質(zhì)控樣本的檢測按常規(guī)臨床樣本對待，由負責常規(guī)工作的人員測試，檢測結(jié)果需在截止日期前上報。 室間質(zhì)評的檢測結(jié)果和反饋結(jié)果均記錄于《HIV初篩實驗室室間質(zhì)評樣本結(jié)果記錄表》，根據(jù)反饋結(jié)果分析數(shù)據(jù)回顧報告，進行總結(jié)。5 引用表格和文件 《HIV初篩實驗室室間質(zhì)評樣本結(jié)果記錄表》HIVJL015 《HIV初篩實驗室樣本接收記錄表》HIVJL001鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室程序文件設(shè)備維護保養(yǎng)、校準管理程序文件編號：HIVCXWJ013版 序：A/1頁 碼：第1頁共2頁受控狀況：在控生效日期：1目的 保證實驗室檢測儀器設(shè)備有效運轉(zhuǎn)及其準確性。2范圍 酶標儀 洗板機 生物安全柜、離心機、醫(yī)用冰箱、加樣器、溫度計、濕度計。3職責 本室操作使用儀器設(shè)備的工作人員負責日常維護保養(yǎng)儀器，定時校準儀器，并作好記錄，妥善保存校準說明資料。4工作流程 維護保養(yǎng)流程，使用人應(yīng)嚴格按不同設(shè)備作業(yè)指導(dǎo)書進行操作，并在相應(yīng)的記錄表格中做好記錄。儀器維護原則上由儀器廠家工程師每年進行一次全面的維護保養(yǎng)。并出具維護記錄；不由廠家進行維護的，按本單位的儀器維護作業(yè)指導(dǎo)書 進行維護。，必須就損壞的原因、損壞的程度書面報告給實驗室負責人，及時修理，如確定為操作人員違法按操作規(guī)程造成，應(yīng)向操作人員追究責任。，負責人應(yīng)提出書面申請，交醫(yī)院有關(guān)職能部門處理。 校準流程 制定設(shè)備的校準計劃，并按照計劃分別對不同的設(shè)備制定不同的校準方法。 根據(jù)本實驗室設(shè)備實際技術(shù)參數(shù)指標結(jié)合本單位及實驗室的技術(shù)水平確定不同的途徑，進行校準。 校準后的儀器、設(shè)備應(yīng)當貼上標識，明確其功能狀態(tài)及校準時間。綠色標簽為合格標識；黃色為準用標識；紅色為停用標識。 儀器、設(shè)備修理后，重新校準合格后，方可使用，檢定不合格，依規(guī)定修理或報廢。 設(shè)備管理鄖縣婦幼保健院檢驗科HIV初篩實驗室