酶學(xué)基礎(chǔ)---酶的分子結(jié)構(gòu)與催化功能(2)-資料下載頁
2025-01-17 12:46本頁面
【正文】 別構(gòu)效應(yīng)劑一般為小分子代謝物，可以是別構(gòu)酶的底物，也可以是代謝通路上的產(chǎn)物。根據(jù)別構(gòu)效應(yīng)劑與酶結(jié)合后的效果，可將其分為兩類，使酶活性升高者稱為別構(gòu)激活劑，使酶活性降低者稱為別構(gòu)抑制劑。 異檸檬酸脫氫酶是別構(gòu)酶， NAD+、 ADP和檸檬酸是該酶的別構(gòu)激活劑，而 NADH和 ATP是別構(gòu)抑制劑。 （二）修飾酶 (modification enzyme) 修飾酶的類型 某些酶能在其他酶的催化下，通過共價鍵可逆結(jié)合某種化學(xué)基團(tuán)，從而改變其活性，這種作用稱為共價修飾調(diào)節(jié)，這類酶稱為共價修飾酶或化學(xué)修飾酶。 修飾酶活性的改變是通過共價鍵結(jié)合，別構(gòu)酶活性的改變是通過非共價鍵結(jié)合。 修飾酶的共價修飾有磷酸化 /脫磷酸化、乙?；?去乙?；?、腺苷化 /去腺苷化、甲基化 /去甲基化、 SH/ SS等，其中磷酸化 /脫磷酸化最為常見。 修飾酶的特點 （ 1）絕大多數(shù)修飾酶具有無活性 /有活性 (或低活性 /高活性 )兩種形式，催化其正逆兩方向反應(yīng)的酶不同，且受激素或第二信使的調(diào)節(jié)。 （ 2）耗能少 磷酸化 /脫磷酸化是最常見的共價修飾。每個亞基磷酸化僅僅需 1分子 ATP，比生物合成多肽鏈消耗的 ATP少得多，速度也快得多。 （ 3）效率高 由于化學(xué)修飾反應(yīng)一般是酶促反應(yīng)，且受體內(nèi)調(diào)節(jié)因子控制，故對調(diào)節(jié)信號有快速、放大的效應(yīng)。體內(nèi)酶促化學(xué)修飾反應(yīng)往往是連鎖反應(yīng)，即一種酶經(jīng)化學(xué)修飾后，被修飾的酶又可催化另一種酶分子進(jìn)行化學(xué)修飾，每修飾一次就產(chǎn)生一次放大效應(yīng)。因此，極少量的調(diào)節(jié)因子經(jīng)化學(xué)修飾酶的逐級放大，可產(chǎn)生顯著的生理效應(yīng)。 環(huán)磷腺苷 四、結(jié)構(gòu)酶 (組成酶 )與誘導(dǎo)酶 根據(jù)合成與代謝的關(guān)系，將酶相對地分為結(jié)構(gòu)酶和誘導(dǎo)酶。 結(jié)構(gòu)酶 (structural enzym)是細(xì)胞以恒定速率和恒定數(shù)量生成的那些酶類，亦稱 組成酶 。 細(xì)胞中天然存在 , 含量較穩(wěn)定， 一般不受外界條件的影響 。 誘導(dǎo)酶 (induced enzyme)是指細(xì)胞中進(jìn)入特定的誘導(dǎo)物后 , 被誘導(dǎo)生成的。其有無及含量的多少受外界條件的影響。 在某些種類的細(xì)菌細(xì)胞中，正常時只存在痕跡量的誘導(dǎo)酶，但當(dāng)培養(yǎng)基中有特定的誘導(dǎo)物 (往往是該酶的底物或底物類似物 )時，酶的數(shù)量能迅速增加 1000多倍，尤其當(dāng)這種底物是細(xì)胞唯一的碳源時。 五、胞內(nèi)酶與胞外酶 按酶合成后分布和存在的位臵 , 可將酶分為胞內(nèi)酶與胞外酶。 胞內(nèi)酶 (intracellular enzyme）是指那些在合成后仍留在細(xì)胞內(nèi)的酶 。 胞外酶 (extracellular enzyme)是指那些在合成后分泌到細(xì)胞外而游離在發(fā)酵液中的酶。 在中文文獻(xiàn)中常將 “ ectoenzyme” 譯為胞外酶 , 但它和通常所說的胞外酶 (extracellular enzyme)不同 , 它是一種和細(xì)胞膜結(jié)合的酶 , 其活性中心位于細(xì)胞的外表面 , 指向細(xì)胞外空間 , 作用還未完全清楚。 第五節(jié) 酶活力測定 1. 酶活的定義 酶活定義： 在一定條件下 ， 催化單位底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物所需的酶量 。 酶活單位 U： 國際生物化學(xué)協(xié)會酶委員會定義：每分鐘催化1μmol 底物發(fā)生轉(zhuǎn)變的酶量 ， 即： 1μmol/min 。 kat：酶活力的 SI單位 ， 即 Katal。 Katal的定義是每秒鐘催化 1 mol底物發(fā)生轉(zhuǎn)變的酶量 ， 即： 1mol/s 。 1 kat=6 107 U 1 U= 108 kat 商業(yè)上 ， 根據(jù)需要 2． 酶活力測定方法 (Assay of enzyme activity) ： （ 1）通過定量測定酶反應(yīng)的產(chǎn)物或底物的變化。 （ 2）通過定量測定酶反應(yīng)底物中某一性質(zhì)的變化，如粘度等。 通常在酶的最適 pH和離子強(qiáng)度以及指定的溫度下測定酶活。 ? 直接測定酶活 (direct assay) 測定酶作用于底物或產(chǎn)物的形成速度 產(chǎn)物量 時間 當(dāng) [E。 ]遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于 [S。 ]時 v=Vmax=k3[E。 ], v與 [E。 ]成正比 。 初速度 酶濃度 不同酶濃度下產(chǎn)物量隨時間的變化 初速度隨酶濃度的變化 ? 酶活測定必須滿足的條件 ： （ 1） 產(chǎn)物的量與時間呈線性關(guān)系 即要測初速度 。 （ 2） 反應(yīng)速度與酶量呈線性關(guān)系 即要滿足 [S。 ]遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于 Km(至少大于 20倍 )。 ?報道酶活應(yīng)該寫明： ?酶活測定的條件 ， 定義 。 ?比酶活 ， 一般是酶活 U/mg蛋白質(zhì) 。 單點測定 （ Singlepoint assay） 必須保證產(chǎn)物的濃度與反應(yīng)時間在 0t1段呈線性關(guān)系 。 淀粉酶 、 果膠酶 、 纖維素酶 、 半纖維素酶幾乎無一例外 。 1][.tPV ?思考 全酶、輔酶、輔基、活性中心、必需基團(tuán)、酶原、同工酶等的概念 酶作用的專一性機(jī)制
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