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補充2酶催化活性的測定方法-資料下載頁

2025-01-06 08:56本頁面
  

【正文】 5, 5二硫代 雙( 2硝基苯甲酸)( DTNB)反應,生成黃色陰離子 5巰基 2硝基苯甲酸( 5TNBA) ② 酸性磷酸酶 測定,利用 α 萘酚磷酸鹽做底物,經酸性磷酸酶水解后釋放萘酚,與試劑中的固紅 TR發(fā)生偶氮反應,生成黃色化合物 在酶活性測定時,常采用另一個(指示酶)或幾個酶(輔助酶和指示酶)將測定酶的某一產物轉化為新的產物,當其他酶的反應速度與待測酶反應速度達到平衡時,可以用指示酶的反應速度來代表待測酶的活性。可以表示為: ?指示酶 是指能監(jiān)測反應速度的酶 ?輔助酶 在酶偶聯(lián)反應中可以一個或多個,也可以不需要輔助酶 由于 NAD( P) +或 NAD( P) H在 340nm的光吸收特性,很容易進行連續(xù)監(jiān)測,因此它是最常用的指示酶,過氧化物酶( POD)也可做指示酶。下表列舉了需要指示酶的酶偶聯(lián)方法來測定酶活性 待測酶 測定方法 輔助酶 指示酶 丙氨酸氨基轉移酶 IFCC推薦法 LD 脂肪酶 GKGPOPOD法 GK、 GPO、 POD 5’核苷酸酶 5’IMP作底物的NPXOPPOD法 核苷磷酸化酶 NP 黃嘌呤氧化酶 XOD POD 舉 例
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