乳酸菌畢業(yè)設(shè)計(jì)論文-資料下載頁(yè)
2025-01-16 09:33本頁(yè)面
【正文】 菌（G）阪崎腸桿菌（G）鼠傷寒沙門氏菌（G）大腸桿菌（G）GL1GL5各種乳酸菌對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的抑菌效果優(yōu)于革蘭氏陰性菌，這種抑制特性可能與細(xì)菌之間的同源性有關(guān)。3. 2 抑菌物質(zhì)的確定3. 酸對(duì)乳酸菌抑菌活性的影響在排除酸的作用后, 將GL5發(fā)酵液及用酸處理后的發(fā)酵液利用管碟法以金黃色葡萄球菌為指示菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，仍有一定的抑菌作用,見(jiàn)表2。表2 GL5原始發(fā)酵上清液及調(diào)節(jié)pH后的抑菌圈大小樣品抑菌圈直徑(mm)發(fā)酵上清原液24．0調(diào)節(jié)pH后的發(fā)酵液18．5活率下降百分率（%）22．93. 過(guò)氧化氫對(duì)乳酸菌抑菌活性的影響乳酸菌在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的強(qiáng)氧化劑過(guò)氧化氫也可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),尤其是抑制G菌的生長(zhǎng),因此必須排除過(guò)氧化氫的干擾[5]。發(fā)酵上清液用過(guò)氧化氫酶處理,以未經(jīng)過(guò)氧化氫酶處理的發(fā)酵上清液為對(duì)照,以金黃色葡萄球菌為指示菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表3。表3 GL5原始發(fā)酵上清液及過(guò)氧化氫酶處理后的抑菌圈大小樣品抑菌圈直徑(mm)發(fā)酵上清原液24．0過(guò)氧化氫酶處理后的發(fā)酵液22．0活率下降百分率（%）8．33. 酶對(duì)發(fā)酵上清液抑菌效果的影響在排除有機(jī)酸和過(guò)氧化氫對(duì)指示菌的抑制作用后,為了確定抑菌物質(zhì)是否具有蛋白質(zhì)性質(zhì),實(shí)驗(yàn)用胰蛋白酶、蛋白酶K對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行處理，用處理后的發(fā)酵液作抑菌實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)抑菌能力是否降低，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。表4 GL5原始發(fā)酵上清液及蛋白酶處理后的抑菌圈大小樣品抑菌圈直徑(mm)發(fā)酵上清原液24．0胰蛋白酶、蛋白酶K處理后的發(fā)酵液13．0活率下降百分率（%）45．83. 3 乳酸菌的鑒定3. 形態(tài)學(xué)觀察表5 三種乳酸菌的形態(tài)特征菌株編號(hào)分離源菌落形態(tài)菌體形態(tài)GL1奶酪,凸起，邊緣整齊，乳白色油狀G+，桿狀，個(gè)別彎曲，排列緊密GL5奶酪菌落直徑約2mm，光滑，圓形，濕潤(rùn)，乳白色G+，桿狀，兩端較平，多成鏈出現(xiàn)圖1 GL5菌的革蘭氏染色圖片3. 生理生化特征鑒定生理生化特征鑒定主要實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目包括在不同溫度（15℃、35℃和45℃）試驗(yàn)菌種的生長(zhǎng)情況，在不同pH值（、）培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況，過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)，運(yùn)動(dòng)性檢查，明膠液化實(shí)驗(yàn)，吲哚實(shí)驗(yàn)，硫化氫產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)，精氨酸產(chǎn)氨實(shí)驗(yàn)與糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。表6 GL5菌株生理生化試驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果15℃生長(zhǎng)+過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)35℃生長(zhǎng)+運(yùn)動(dòng)45℃生長(zhǎng)明膠液化在SL培養(yǎng)基上生長(zhǎng)（）+吲哚實(shí)驗(yàn)+H2S產(chǎn)生精氨酸產(chǎn)NH3a. 在含有2%蔗糖的的張良MRS培養(yǎng)液中。b. “+”表示陽(yáng)性反應(yīng)；“”表示陰性反應(yīng)。根據(jù)菌種的形態(tài)特征與生理生化特性，根據(jù)參考資料[6，7]，將GL5初步鑒定為乳桿菌屬。接著對(duì)GL5菌株進(jìn)行糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表7所示。表7 GL5菌株糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果葡萄糖（產(chǎn)酸）+甘露醇+葡萄糖（產(chǎn)氣）麥芽糖○葡萄糖酸鹽+蔗糖+半乳糖核糖+纖維二糖+木糖甘露糖+阿拉伯糖果糖+棉籽糖乳糖○山梨醇+松三糖+海藻糖+注：“+，”同上；○表示弱陽(yáng)性。根據(jù)生理生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，參考資料[6，7]，經(jīng)過(guò)刪選比對(duì)，菌株GL5的生理生化特性與干酪乳桿菌最相似。第4章 結(jié)論利用BCG培養(yǎng)基分離出市售干酪中單菌落，經(jīng)觀察菌落形態(tài)與革蘭氏染色初步判定為乳酸菌。從市售奶酪中分離出的5種乳酸菌分別編號(hào)為GL1GL5 。染色后顯微鏡觀察，均為革蘭氏陽(yáng)性菌，均為桿狀菌。通過(guò)對(duì)5種指示菌進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，通過(guò)管碟法抑菌實(shí)驗(yàn)篩選出一種來(lái)源于進(jìn)口奶酪的抑致病菌活性較高的乳酸菌GL5。通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察與生理生化實(shí)驗(yàn)，菌株GL5初步鑒定為干酪乳桿菌。參考文獻(xiàn)[1] 楊潔彬，葛興華．乳酸菌生物學(xué)基礎(chǔ)與應(yīng)用[M]．北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，1996．[2] 朱小喬，劉通訊．極具潛力的天然防腐劑——Nisin[J]．食品與發(fā)酵工業(yè)，2001，27（4）：6669．[3] 喬發(fā)東，吳秀芳，南慶賢，等。濃縮乳酸菌發(fā)酵劑的現(xiàn)狀[J]。中國(guó)乳品工業(yè)，1998，（1）：3032.[4] 吳玲，潘道東，2010，26（1）：157159.[5] 姚麗婭,徐為民,，2008，29（1）：160164.[6] [M].北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，1999：616．[7] 布坎南RE，吉布斯NE. 伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)（第八版）[M]. 第8版, 北京: 科學(xué)出版社, 1984: 797808.常州工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）
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