乳酸菌的分離、純化與鑒定-資料下載頁
2025-06-25 20:29本頁面
【正文】 酵試驗(yàn) 1）.試管標(biāo)記：取分別裝有葡萄糖，蔗糖發(fā)酵培養(yǎng)液試管各2支，每種糖發(fā)酵試管中分別標(biāo)記乳酸菌和空白對(duì)照。 2）.接種培養(yǎng)：以無菌操作分別接種少量菌苔至以上各相應(yīng)試管中，每種糖發(fā)酵培養(yǎng)液的空白對(duì)照均不接菌。將裝有培養(yǎng)液的杜氏小管倒置試管中，置37攝氏度恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)，觀察結(jié)果。 3）.觀察記錄：與對(duì)照管比較，若接種培養(yǎng)液保持原由顏色，其反映結(jié)果為陰性；如果培養(yǎng)液呈黃色，反映結(jié)果為陽性。培養(yǎng)液中的杜氏小管內(nèi)有氣泡為陽性反應(yīng)，杜氏小管內(nèi)沒有氣泡為陰性反應(yīng)。 (5).乳酸的檢測(cè) 選用已經(jīng)分離的菌種做小型發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，取發(fā)酵液的上清液約10 ml于試管中，加入10%硫酸1 ml ,再加2%高錳酸鉀 1 ml ,此時(shí)乳酸轉(zhuǎn)化為乙醛，把事先在含氨的硝酸銀溶液中侵泡的濾紙條搭在試管口中，微火加熱試管至沸，觀察濾紙變化。（6）乙酰甲基甲醇試驗(yàn)（VP試驗(yàn)） 接種新鮮的實(shí)驗(yàn)菌種于培養(yǎng)基中, 37℃培養(yǎng)2天后,取葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液1mL在其中加入1ml 10％的NaOH，混勻，再加入3－4滴2%氯化鐵溶液。數(shù)小時(shí)后，培養(yǎng)基表面的下層出現(xiàn)紅色者，為陽性.（7）明膠液化實(shí)驗(yàn) 將實(shí)驗(yàn)菌接種于明膠基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,置37℃培養(yǎng),以一支未接種的試管作為對(duì)照。將接種的和未接種的對(duì)照管置于冰箱或冷水中,等待對(duì)照管凝固后記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,反復(fù)觀察對(duì)比多次。如對(duì)照管凝固時(shí),接種管液化為陽性反應(yīng),凝固為陰性反應(yīng)明膠培養(yǎng)基成分：NaCl 5g，蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，明膠 120g，蒸餾水 1000mL。制法：在水浴鍋中將上述成分溶化，不斷攪拌。溶化后調(diào)pH ~，121176。C 滅菌30min。(8)石蕊牛奶的反應(yīng) 牛奶中主要含有乳糖和酪蛋白，在牛奶中加入石蕊是作為酸堿指示劑和氧化還原指示劑。石蕊在中性時(shí)呈淡紫色，酸性時(shí)呈粉紅色，堿性呈藍(lán)色，還原時(shí)則自上而下地褪色變白。觀察其產(chǎn)酸、產(chǎn)堿、胨化、酸凝固、凝乳酶凝固、還原情況。
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