乳酸菌畢業(yè)設(shè)計論-資料下載頁
2025-06-03 07:25本頁面
【正文】 的發(fā)酵液利用管碟法以金黃色葡萄球菌為指示菌進行抑菌實驗，仍有一定的抑菌作用 ,見表 2。 表 2 GL5原始發(fā)酵上清液及調(diào)節(jié) pH后的抑菌圈大小 樣品 抑菌圈直徑 (mm) 發(fā)酵上清原液 24． 0 調(diào)節(jié) pH后的發(fā)酵液 18． 5 活率下降百分率（ %） 22． 9 中南大學 畢業(yè)設(shè)計（論文） 共 14 頁，第 9 頁 3. 過氧化氫對乳酸菌抑菌活性的影響 乳酸菌在代謝過程中產(chǎn)生的強氧化劑過氧化氫也可以抑制細菌的生長 ,尤其是抑制 G菌的 生長 ,因此必須排除過氧化氫的干擾 [5]。發(fā)酵上清液用過氧化氫酶處理 ,以未經(jīng)過氧化氫酶處理的發(fā)酵上清液為對照 ,以金黃色葡萄球菌為指示菌進行抑菌實驗 ,結(jié)果見表 3。 表 3 GL5原始發(fā)酵上清液及過氧化氫酶處理后的抑菌圈大小 樣品 抑菌圈直徑 (mm) 發(fā)酵上清原液 24． 0 過氧化氫酶處理后 的發(fā)酵液 22． 0 活率下降百分率（ %） 8． 3 3. 酶對發(fā)酵上清液抑菌效果的影響 在排除有機酸和過氧化氫對指示菌的抑制作用后 ,為了確定抑菌物質(zhì)是否具有蛋白質(zhì)性質(zhì) ,實驗用胰蛋白酶、蛋白酶 K對發(fā)酵液進行處理 ， 用處理后的發(fā)酵液作抑菌實驗 ， 檢測抑菌能力是否降低 ， 實驗結(jié)果見表 4。 表 4 GL5原始發(fā)酵上清液及蛋白酶處理后的抑菌圈大小 樣品 抑菌圈直徑 (mm) 發(fā)酵上清原液 24． 0 胰蛋白酶、 蛋白酶 K處理后 的發(fā)酵液 13． 0 活率下降百分率（ %） 45． 8 3. 3 乳酸菌的鑒定 3. 形態(tài)學觀察 表 5 三種乳酸菌的形態(tài)特征 菌株編號 分離源 菌落形態(tài) 菌體形態(tài) GL1 奶酪 菌落直徑約 ,凸起，邊緣整齊，乳白色油狀 G+，桿狀，個別彎曲，排列緊密 GL5 奶酪 菌落直徑約 2mm，光滑，圓形，濕潤，乳白色 G+，桿狀，兩端較平，多成鏈出現(xiàn) 中南大學 畢業(yè)設(shè)計（論文） 共 14 頁，第 10 頁 圖 1 GL5菌的革蘭氏染色圖片 3. 生理生化特征鑒定 生理生化特征鑒定主要實驗項目包括在不同溫度（ 15℃、 35℃和 45℃）試驗菌種的生長情況，在不同 pH值（ 、 、 ）培養(yǎng)基中生長情況，過氧化氫酶實驗，運動性檢查，明膠液化實驗，吲哚實驗，硫化氫產(chǎn)生實驗，精氨酸產(chǎn)氨實驗與糖發(fā)酵實驗。 表 6 GL5菌株生理生化試驗結(jié)果 檢測項目 結(jié)果 檢測項目 結(jié)果 15℃生長 + 過氧化氫酶實驗 35℃生長 + 運動 45℃生長 明膠液化 在 SL培養(yǎng)基上生長（ ） + 吲哚實驗 在 a + H2S 產(chǎn)生 在 a 精氨酸產(chǎn) NH3 a. 在含有 2%蔗糖的的張良 MRS 培養(yǎng)液中。 b. “ +”表示陽性反應；“ ”表示陰性反應。 根據(jù)菌種的形態(tài)特征與生理生化特性，根據(jù)參考資料 [6， 7]，將 GL5 初步鑒定為乳桿菌屬。接著對 GL5 菌株進行糖發(fā)酵實驗，實驗結(jié)果如表 7 所示。 中南大學 畢業(yè)設(shè)計（論文） 共 14 頁，第 11 頁 表 7 GL5菌株糖發(fā)酵試驗結(jié)果 檢測項目 結(jié)果 檢測項目 結(jié)果 葡萄糖（產(chǎn)酸） + 甘露醇 + 葡萄糖（產(chǎn)氣） 麥芽糖 ○ 葡萄糖酸鹽 + 蔗糖 + 半乳糖 核糖 + 纖維二糖 + 木糖 甘露糖 + 阿拉伯糖 果糖 + 棉籽糖 乳糖 ○ 山梨醇 + 松三糖 + 海藻糖 + 注：“ +， ”同上； ○表示弱陽性。 根據(jù)生理生化實驗結(jié)果，參考資料 [6， 7]，經(jīng)過刪選比對，菌株 GL5 的生理生化特性與干酪乳桿菌最相似。 中南大學 畢業(yè)設(shè)計（論文） 共 14 頁，第 12 頁 第 4 章 結(jié)論 分離純化結(jié)果 利用 BCG 培養(yǎng)基分離出 市售干酪中 單菌落，經(jīng)觀察菌落形態(tài)與革蘭氏染色初步判定為乳酸菌。 抑菌試驗的結(jié)果 從市售奶酪 中分離出的 5 種乳酸菌分別編號為 GL1GL5 。染色后顯微鏡觀察，均為革蘭氏陽性菌，均為桿狀菌。 通過對 5 種指示菌進行抑菌試驗，通過管碟法抑菌實驗篩選出一種來源于進口奶酪的抑致病菌活性較高的乳酸菌 GL5。 鑒定結(jié)果 通過形態(tài)學觀察與生理生化實驗，菌株 GL5 初步鑒定為干酪乳桿菌。 中南大學 畢業(yè)設(shè)計（論文） 共 14 頁，第 13 頁 參考文獻 [1] 楊潔彬，葛興華．乳酸菌生物學基礎(chǔ)與應用 [M]．北京：中國輕工業(yè)出版社，1996． [2] 朱小喬，劉通訊 ．極具 潛力的天然防腐劑 —— Nisin[J]． 食品與發(fā)酵工業(yè) ， 2021，27（ 4）： 6669． [3] 喬發(fā)東，吳秀芳，南慶賢，等。濃縮乳酸菌發(fā)酵劑的現(xiàn)狀 [J]。中國乳品工業(yè)， 1998，（ 1）： 3032. 中南大學 畢業(yè)設(shè)計（論文） 共 14 頁，第 14 頁 [4] 吳玲，潘道東，劉海燕 .瑞士乳桿菌凍干保護劑的選擇 .食品與機械， 2021，26（ 1）： 157159. [5] 姚麗婭 ,徐為民 ,諸永志 .產(chǎn)細菌素乳酸菌的篩選及鑒定 .食品工業(yè) 科技，2021， 29（ 1）： 160164. [6] 凌代文 .乳酸細菌分類鑒定及實驗方法 [M].北京：中國輕工業(yè)出版社， 1999：616． [7] 布坎南 RE， 吉布斯 NE. 伯杰細菌鑒定手冊 （第八版） [M]. 第 8 版 , 北京 : 科學出版社 , 1984: 797808.常州工程職業(yè)技術(shù)學院畢業(yè)設(shè)計（論文）
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