hbvdna定量檢測-資料下載頁
2025-10-09 02:23本頁面
【導讀】1971年，Kleppe等人首次在文章中準確、客。觀地闡述了PCR方法。1985年，美國PE-Cetus公司的KaryMullis等。PCR技術(shù)的本質(zhì)是體外核酸擴增，加熱使。物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶，測樣本中的核酸拷貝數(shù)。技術(shù)在PCR反應體系中加入特異性的熒光。過標準曲線對未知模板進行定量分析。FQ-PCR通過熒光信號對PCR過程中產(chǎn)物量進行實時監(jiān)。熒光定量PCR是融合了PCR高靈敏性、DNA雜交高特。DNA熒光信號的變化以獲得定量的結(jié)果。系統(tǒng)內(nèi)裝置有半導體PCR、鹵鎢燈光源激發(fā)熒光信號、熒光定量PCR檢測的是。能最準確反映出對數(shù)期。自動保存在計算機中。量原理是在忽略分子間相互作用的情況下建立的。高濃度的，因此重復性變差也很容易理解。②由于擴增末期，擴增效率可能因為大量的靶序列而。產(chǎn)生不可控的影響。Ct值分析實際上就是低濃度的熒光值分析。由于是低濃度，影響因素小，所以具有良好的重現(xiàn)性。的對數(shù)存在線性關系，起始拷貝數(shù)越多，Ct值越小。引物二聚體結(jié)合發(fā)出熒光。針B的5`端作為熒光染料受體。2個探針首尾相連，僅差一個
【正文】 時監(jiān)控 2） 敏感性和特異性高 3）簡單快速， 30個循環(huán) 20幾分鐘就能夠完成。 4）污染可能性小 5）不需要常規(guī)的產(chǎn)物后期復雜處理，直接觀測結(jié)果 6）可以進行點突變分析，根據(jù)熔點曲線的不同直接分析點突變的情況。 Figure 3. Mutation detection by melting curve analysis. Top panel: melting curves of amplified gene fragments from wildtype and mutant individuals. Bottom panel: negative first derivatives of the melting curves showing the unique melting peak of each genotype. The gene fragment amplified from the heterozygous individual exhibits a melting curve with both the wildtype and mutant peaks (red plot). HBV的定量檢測 標本：病人血清 200μl 檢測： HBV病毒核酸載量 檢測樣本：陽性對照、陰性對照、空白對照 標準品、病人 HBV DNA 檢測步驟： HBV DNA提??； 熒光定量 PCR； 結(jié)果分析 定量 PCR方法： TaqMan水解探針技術(shù) 標準品擴增曲線 標準曲線 報告結(jié)果： HBV DNA拷貝數(shù) /ml， 如 106拷貝數(shù) /ml或 E +06 參考范圍：最小檢測值， 5 102拷貝數(shù) /ml（ 5E+02）
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