微生物的遺傳變異與育種-資料下載頁
2025-01-14 00:08本頁面
【正文】 發(fā)酵半乳 糖基因 噬菌體基因 過程 高頻轉(zhuǎn)導(dǎo) 高頻轉(zhuǎn)導(dǎo) ：在局限轉(zhuǎn)導(dǎo)中，若對(duì)雙重溶源菌進(jìn)行誘導(dǎo)，會(huì)產(chǎn)生50%左右局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)裂解物，用此裂解物去轉(zhuǎn)導(dǎo)受體菌，可獲得 50%左右的轉(zhuǎn)導(dǎo)子，故名。 雙重溶源菌 ：指同時(shí)感染正常噬菌體和缺陷噬菌體的受體菌。 過程： LFT裂解物 gal 高 感染 λ dgal λ 雙重溶源菌 Uv λ dgal +λ 等量 低 感染 gal gal+ gal 等量 (四 )、溶源轉(zhuǎn)變 溶源轉(zhuǎn)變 ：當(dāng)正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時(shí)，因噬菌體基因整合到宿主的核基因上，而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象。 三、接合 (一 )、定義 接合 ： 供體菌（ “ 雄性 ” ）通過性菌毛與受體菌（ “ 雌性 ” ）直接接觸，把 F質(zhì)粒 或其攜帶的不同長度的 核基因組片段 傳遞給后者，使后者獲得若干新遺傳的現(xiàn)象 。 接合子 ：接合后獲得的具有新遺傳性狀的受體細(xì)胞。 (二 )、可接合的 m種類 細(xì)菌 ： 、克雷伯氏菌屬、沙雷氏菌屬、固氮菌屬等。 放線菌 ：鏈霉菌屬、諾卡氏菌屬 (三 )、 F+菌株 ● 定義 ：指細(xì)胞內(nèi)存在一至幾個(gè) F質(zhì)粒，并在細(xì)胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。 ● 與 F菌株 的接合過程 ： 轉(zhuǎn)性別頻率： 近 100% F 菌株 ● 定義 ：指細(xì)胞內(nèi)無 F質(zhì)粒，細(xì)胞表面無性菌毛的菌株。 ● 可與之接合菌株 ： F+菌株 F 雄性菌株 Hfr菌株 ● 定義 ： F質(zhì)粒從游離態(tài)轉(zhuǎn)變成核染色體組特定位點(diǎn)上的整合態(tài)的菌株。 F質(zhì)粒 F/ F/質(zhì)粒 Hfr菌株 一整套核 DNA 少見 (頻率低 ) ● Hfr菌株與 F菌株接合過程 F/ 菌株 ● 定義： 當(dāng) Hfr菌株細(xì)胞內(nèi)的 F質(zhì)粒因不正常切離而脫離核染色體組時(shí)，可重新形成游離的但攜帶整合位點(diǎn)臨近一小段核染色體基因的特殊 F質(zhì)粒。 ● 初生與次生 F/ 菌株 ● 細(xì)菌染色體繪圖原理 四種接合型菌株的關(guān)系 四、原生質(zhì)體融合 定義： 通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩個(gè)細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程。 過程： 第五節(jié) 真核微生物的基因重組和雜交育種 一、有性雜交 (一 )、定義 ● 雜交：在細(xì)胞水平上進(jìn)行的一種遺傳重組方式。 ● 有性雜交：指不同遺傳型的兩性細(xì)胞間發(fā)生的接合和隨之進(jìn)行的染色體重組，繼而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。 ● 產(chǎn)有性孢子的菌均可進(jìn)行有性雜交。 (二 )、有性雜交方法 甲乙親本菌株 產(chǎn)子囊孢子 離心 (雙倍體 ) (單倍體 ) 涂平板 接產(chǎn)孢子培養(yǎng)基 洗下并破壁 雜交得雙倍體雜種 鑒別并選良種 二、準(zhǔn)性雜交 (一 )、定義 ● 準(zhǔn)性生殖 ： 在同種不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合，它可借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。 ● 發(fā)生在無有性生殖的半知菌類中 （如構(gòu)巢曲霉） (二)、準(zhǔn)性生殖過程 三、準(zhǔn)性雜交育種 選擇親本 強(qiáng)制異合 移單菌落 驗(yàn)穩(wěn)定性 促進(jìn)變異 穩(wěn)定的雜合 二倍體菌株 第六節(jié) 菌種的衰退、復(fù)壯和保藏 一、菌種的衰退 (一 )、定義 ：由于自發(fā)突變的結(jié)果，使某物種原有一系列生物性狀發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。 (二 )、衰退的表現(xiàn) 菌落和細(xì)胞形態(tài)改變 生產(chǎn)性能的下降 對(duì)生長環(huán)境的適應(yīng)能力減弱 (三 )、菌種退化的原因 1．有關(guān)基因的自發(fā)突變 2．育種后未經(jīng)很好的分離純化及染雜菌 3．培養(yǎng)基成分的變化及培養(yǎng)條件的改變 保藏條件的變化 (四 )、退化的防治 控制傳代次數(shù) 創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 選擇優(yōu)良的菌株或孢子保藏及傳代 采用有效的保藏方法 (包括保藏方式及保藏培養(yǎng)基 ) 經(jīng)常進(jìn)行分離純化 二、菌種的復(fù)壯 菌落純：酵母、細(xì)菌 純種分離法 細(xì)胞純：所有菌，如霉菌可進(jìn)行菌絲尖端分離 通過宿主體復(fù)壯 ：用于病毒 淘汰已衰退的個(gè)體 利用生產(chǎn)菌株的遺傳標(biāo)記 三、菌種的保藏 (一 )、目的及原理 ● 目的：不死、不衰、純粹及便于交換使用。 ● 原理： 根據(jù)微生物的生理、生化特點(diǎn)，選用優(yōu)良菌株，最好是它們的休眠體，人工地創(chuàng)造適合于休眠的環(huán)境條件，即干燥、低溫、缺乏氧氣和養(yǎng)料等，使微生物的代謝活動(dòng)處于最低的狀態(tài)但又不至于死亡，從而達(dá)到保藏的目的 。 (二 )、保藏方法 斜面培養(yǎng) 定期移植保藏法 液體培養(yǎng) 穿刺培養(yǎng) 特點(diǎn) ：此法一般可保藏 3~6個(gè)月左右。各類菌種均可用此法進(jìn)行保藏。 液體石蠟法 ● 方法 ： 將無菌石蠟油加入到上述保藏的菌種中，使菌種與空氣隔絕。 ● 特點(diǎn) ：此法一般可保藏 1~2年 左右。適用于所有菌種。 砂土管或土壤保藏法 ● 方法 ：取過篩（ 60目）河砂，用 10％鹽酸浸泡、用水洗凈后，烘干。裝入小試管、加塞滅菌后，滴入幾滴菌種 (或孢子 )懸液，用接種針攪勻。然后放入干燥器中，抽氣干燥，放入低溫處保藏。土壤法不洗，風(fēng)干后粉碎過 24目篩滅菌。 ● 特點(diǎn) ： 此法一般可保藏 1至數(shù)年， 它適用于產(chǎn)生孢子的微生物的保藏。 冷凍干燥保藏法 ● 方法 ：將用滅菌牛奶做成的高濃度的菌液裝入滅菌的安瓿瓶中，放在低溫條件下抽氣干燥，使其中的水分因升華作用逸出，而形成完全干燥的菌塊，然后將安瓿瓶在真空條件下融封。 ● 特點(diǎn) ： 一般可在 5年以上，它適用于各大類微生物的保藏。 (三 )、保藏機(jī)構(gòu) 國內(nèi)：中國微生物菌種保藏委員會(huì)（ CCCCM） 中國培養(yǎng)物保藏中心（ CCTCC） 國外：美國典型培養(yǎng)物保藏中心（ ATCC） 荷蘭霉菌中心保藏所（ CBS） 英國國家典型菌種保藏所（ NCTC） 日本大板發(fā)酵研究所（ IFO）
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