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2025-01-12 07:49本頁(yè)面
【正文】 Per 25mer Stability Per 5mer 心肌特異性表達(dá)雙順?lè)醋虞d體的構(gòu)建 PMYL2 EcoRI pIRESneo－ 2 質(zhì)?？寺U(kuò)增 MYL2序列查詢(xún)及 啟動(dòng)子功能分析 不加酶切位點(diǎn)引物設(shè)計(jì) 基因組 DNA制備 高保真 PCR Cloning 大量純化的 MYL2 promoter片段 酶切獲得無(wú) promoter 線(xiàn)性質(zhì)粒載體片段 DNA Ligation Reaction 轉(zhuǎn)入 DH5a Colony Screening PCR Identification MYL2promoter pIRESneo pEGFPc3 質(zhì)?？寺U(kuò)增 酶切獲取 MYL2promoter Plasmid vector開(kāi)環(huán)分子 酶切獲得 EGFP片段 酶切及凝膠電泳鑒定及回收 環(huán)狀 DNA分子 DNA Ligation Reaction 環(huán)狀 DNA分子 轉(zhuǎn)入 DH5a Colony Screening PCR Identification rat原代胚胎心肌細(xì)胞培養(yǎng)及凍存 MYL2promoter pIRES/neo/EGFP 心肌細(xì)胞 脂質(zhì)體 熒光鑒定 rat心肌細(xì)胞特異表達(dá) EGFP 無(wú)綠色熒光蛋白表達(dá) 達(dá)到目的 兩端不含酶切位點(diǎn)的 MYL2/prmoter片段 5端含酶切位點(diǎn)的引物 PCR 兩端含酶切位點(diǎn) MYL2/prmoter片段 TA克隆 Strategy of Construct MYL2序列查詢(xún)及分析 ?網(wǎng)上下載軟件 ?利用密碼生成機(jī)破解軟件并激活軟件 心肌特異性表達(dá)載體構(gòu)建 線(xiàn)性載體準(zhǔn)備 酶切
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