【正文】 1. 直接分光光度法 ? 供試品不需提取分離 ， 溶于適當(dāng)溶劑中即可進(jìn)行含量測(cè)定 。 ? 在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度 ， 利用百分吸收系數(shù)或與對(duì)照品同法測(cè)定計(jì)算含量 ? 本法適用于純度高 ， 沒有雜質(zhì)或輔料干擾的原料及制劑的含量測(cè)定 。 ? 《 中國(guó)藥典 》 （ 2021） 中僅奧沙西泮采用本法測(cè)定 。 2. 萃取后分光光度法 ? 當(dāng)有干擾存在時(shí) ， 可采用萃取分離后進(jìn)行分光光度法測(cè)定 。 鹽酸異丙嗪注射液的含量測(cè)定 在堿性介質(zhì)中使 鹽酸異丙嗪轉(zhuǎn)化為游離堿 ， 用乙醚定量提取后 ， 在將乙醚提取液用鹽酸溶液定量提取 ， 將其轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽后 ， 進(jìn)行分光光度法測(cè)定 。 例 兩次萃取可有效地消除制劑處方中的其他成分的干擾，使測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確。 計(jì)算。為以，測(cè)定鹽酸氯丙嗪乙醚層氯丙嗪鹽酸氯丙嗪鹽酸萃取乙醚提取氨水堿化 915 E 1254 1%1 c mm a xAnm???? ????? ????? ???3. 萃取 雙波長(zhǎng)分光光度法 當(dāng)經(jīng)萃取也不能分離干擾物時(shí) （ 如：吩噻嗪類藥物中的氧化物 ） ， 可采用雙波長(zhǎng)分光光度法消除干擾物對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響 。 原理： 在待測(cè)組分 （ a） 的最大吸收波長(zhǎng) （ ?1） 處測(cè)定待測(cè)組分和干擾組分 （ b） 吸收度的總和；另選一適當(dāng)波長(zhǎng) （ ?2） 測(cè)定吸收度 ，并使干擾組分在測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)處的吸收度相等 ， 即 ， 而待測(cè)組分在這兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度的差值足夠大 。 bλbλ21 AA ?abbaaababababaCAAAlCAAAAAAAAA????????????????? )()()()(212121221121??????????????吸收度差值 （ ?A） 僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān) ， 與干擾組分無關(guān) ， 干擾組分的干擾被消除 。 必要條件： ① 干擾組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度相等。 ② 待測(cè)組分在兩個(gè)波長(zhǎng)處吸收度相差足夠大。 4. 二階導(dǎo)數(shù)分光光度法 當(dāng)干擾物質(zhì)在待測(cè)藥物特征吸收峰附近的吸光收光譜的二階導(dǎo)數(shù)為接近基線的一條直線 ，則可采用二階導(dǎo)數(shù)法消除干擾物對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響 。 鹽酸氯丙嗪注射液 的含量測(cè)定 抗氧劑維生素 C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線 ， 不干擾鹽酸氯丙嗪的測(cè)定 。 因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰 266nm～谷 254nm距離 ， 標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量 。 例 5. 鈀離子比色法 ? 吩噻嗪類藥物在 pH2177。 ，可與 鈀離子 （ Pd2+） 形成紅色配合物 ， 在500nm波長(zhǎng)處具有最大吸收 ， 可用比色法測(cè)定含量 。 ? 鈀離子只與未被氧化的硫配合 ， 當(dāng)硫原子被氧化為亞砜或砜時(shí) ， 不與 Pd2+配合顯色 。 ? 利用空白試驗(yàn) ， 鈀離子比色法可選擇性地消除吩噻嗪類藥物中氧化物的干擾 。 五． 氣相色譜法 ? 對(duì)熱穩(wěn)定可氣化的游離有機(jī)堿可直接進(jìn)行色譜分析 。 ? 有機(jī)堿鹽的熔點(diǎn)較高 ， 熔融分解成游離堿后才能產(chǎn)生氣相色譜峰 。 ? 有機(jī)堿鹽一般先在水相中經(jīng)堿化 ， 有機(jī)溶劑提取分離 ， 制成游離有機(jī)堿溶液后 ， 進(jìn)行分析 。 ? 通常采用內(nèi)標(biāo)法消除進(jìn)樣及氣化的可變性對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響 。 六． 高效液相色譜法 ① 反相高效液相色譜法 ? 流動(dòng)相的極性大于固定相極性的色譜方法 。 ? 常用烷基硅烷鍵合硅膠作為固定相 ， 極性較弱 。 ? 流動(dòng)相多由甲醇或乙腈等于水或緩沖溶液混合組成的容劑系統(tǒng) ， 極性較強(qiáng) 。 ? 流動(dòng)相得 pH不能太高 （ 2～ 8） ， 否則造成化學(xué)鍵合相的水解 。 ? 在反相液相色譜分析時(shí) ， 極性強(qiáng)的組分先被洗脫 ， 極性弱的后被洗脫 。 ? 烷基硅烷鍵合硅膠表面未硅烷化的硅醇基可與有機(jī)含氮堿性藥物發(fā)生吸附或離子交換作用 ， 使堿性藥物色譜峰拖尾 。 ? 通常加入含氮堿性競(jìng)爭(zhēng)試劑 （ 醋酸銨 、 三乙胺 、 二乙胺 、 乙腈 ） 抑制堿性藥物與硅醇作用造成的色譜峰拖尾 。 ② 離子對(duì)高效液相色譜法 ? 在反相液相色譜條件下呈離子狀態(tài)的藥物（ 如：有機(jī)酸 、 有機(jī)堿 ） ， 色譜保留較弱 。 ? 在流動(dòng)相中加入電荷相反的離子對(duì)試劑 ，形成離子對(duì)化合物 ， 增大待測(cè)組分在固定相中的溶解度 ， 可改善其色譜保留行為 。 ? 分析堿性藥物常用 烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑 ， 如：戊烷磺酸鈉 、 庚烷磺酸鈉 、 十二烷磺酸鈉 。 ? 分析酸性藥物常用 季銨鹽陽離子對(duì)試劑 ，如：四丁基溴化銨 、 四丁基氫氧化胺 。 自測(cè)題 ， 哪一個(gè)藥物加氨制硝酸銀能產(chǎn)生銀鏡反應(yīng) （ ） A. 地西泮 B. 阿司匹林 C. 異煙肼 D. 苯佐卡因 E. 苯巴比妥 （ ） A. 茚三酮反應(yīng) B． 戊烯二醛反應(yīng) C. 硫色素反應(yīng) D．二硝基氯苯反應(yīng) 3.《 中國(guó)藥典 》 （ 2021） 中異煙肼含量的測(cè)定方法為 （ ） A. 溴酸鉀滴定法 B. 溴量法 C. TCL D. NaNO2 E. 比色法 2,4二硝基氯苯發(fā)生呈色反應(yīng)的藥物是 （ ） A. 異煙腙 B. 硫酸奎寧 C. 阿莫西林 D. 四環(huán)素 E. 炔孕酮 ， 生成草綠色沉淀的藥物為 （ ） A. 對(duì)乙酰氨基酚 B. 異煙肼 C. 尼可剎米 D. 地西泮 E. 維生素 E ， 可發(fā)生開環(huán)形成戊烯二醛反應(yīng)的藥物為 （ ） A. 葡萄糖 B. 皮質(zhì)酮 C. 維生素 C D. 土酶素 E. 異煙肼 解反應(yīng)而引入哪種雜質(zhì) （ ） A. 間氨基酚 B. 水楊酸 C. 對(duì)氨基苯甲酸 D. 游離肼 E. 其他甾體 （） A. 與氨制硝酸銀的反應(yīng) B. 戊烯二醛反應(yīng) C. 坂口反應(yīng) D. 硫色素反應(yīng) E. 二硝基氯苯反應(yīng) （ ） A. 中和法 B. 非水滴定法 C. 紫外法 D. 旋光法 E. 鈰量法 ， 吩噻嗪類藥物的鑒別或含量測(cè)定方法為 （ ） A. 非水溶液滴定法 B. 紫外分光光度法 C. 熒光分光光度法 D. 鈀離子比色法 E. pH指示劑吸收度比值法 “ 有關(guān)物質(zhì) ” 時(shí) ， 采用的對(duì)照溶液為 （ ） A. 雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液 B. 標(biāo)準(zhǔn) “ 有關(guān)物質(zhì) ” 溶液 C. 供試品溶液 D. 供試液的稀釋溶液 E. 對(duì)照溶液 ， 加硫酸鈰試液則產(chǎn)生紅色 ， 繼續(xù)滴加硫酸鈰試液 ， 紅色由淺變深 ， 繼由深又變淺直至紅色消失 ， 該藥物應(yīng)為 （ ） A. 雌二醇 B. 氯丙嗪 C. 諾氟沙星 D. 硫酸鎂 E. 苯巴比妥鈉 ，需在以下哪種酸性條件下進(jìn)行（） A. pH4 B. pH3～ C. pH2177。 D. pH1 E. pH5 熒光反應(yīng)為地西泮的特征鑒別反應(yīng)之一 。 地西泮加硫酸溶解后 ， 在紫外光下顯 （ ） 偶合反應(yīng)鑒別，此藥物是（） A. 鹽酸氯丙嗪 B. 氯氮卓 C. 地西泮 D. 醋酸氫化可的松 E. 維生素 C