[藥學(xué)]第三章高效液相色譜法09--儀器分析-資料下載頁(yè)
2024-10-16 22:57本頁(yè)面
【正文】 組成 ，其中高壓輸液泵是核心部件。 常用的輸液泵分為 恒流泵 和 恒壓泵 兩種。恒流泵 特點(diǎn) 是在一定操作條件下， 輸出流量保持恒定 而與色譜柱引起阻力變化無(wú)關(guān)； 恒壓泵是指能保持輸出壓力恒定 ，但其流量則隨色譜系統(tǒng)阻力而變化，故保留時(shí)間的重視性差，它們各有優(yōu)缺點(diǎn)。目前恒流泵正逐漸取代恒壓泵。 恒流泵又稱機(jī)械泵 ，它又分 機(jī)械注射泵 和 機(jī)械往復(fù)泵 兩種，應(yīng)用最多的是機(jī)械往復(fù)泵。 2．進(jìn)樣系統(tǒng) 高效液相色譜柱比氣相色譜柱短得多（約 5～ 30cm），進(jìn)樣系統(tǒng)是引起柱前展寬的主要因素，因此高效液相色譜法中對(duì)進(jìn)樣技術(shù)要求較嚴(yán)。 進(jìn)樣裝置 ： 注射器進(jìn)樣； 高壓定量進(jìn)樣閥 ； 進(jìn)樣系統(tǒng) 通常采用六通伐進(jìn)樣： 色譜柱 色譜柱 泵 泵 1 2 進(jìn)樣 分離系統(tǒng) —— 色譜柱 色譜柱包括柱管與固定相兩部分。柱管材料有玻璃、不銹鋼、鋁、銅，內(nèi)襯光滑的聚合材料。玻璃管耐壓有限，故金屬管用得較多。一般色譜柱長(zhǎng) 5～ 30cm，內(nèi)徑為 4～ 5mm，凝膠色譜柱內(nèi)徑3～ 12mm，制備柱內(nèi)徑較大，可達(dá) 25mm 以上。 一般在分離前備有一個(gè)前置柱，前置柱內(nèi)填充物和分離柱完全一樣，這樣可使淋洗溶劑由于經(jīng)過(guò)前置柱為其中的固定相飽和，使它在流過(guò)分離柱時(shí)不再洗脫其中固定相，保證分離柱的性能不受影響。 4．檢測(cè)系統(tǒng) 在液相色譜中，有兩種基本類型的檢測(cè)器。一類是 溶質(zhì)型檢測(cè)器 ，它僅對(duì) 被分離組分 的物理或化學(xué)特性有響應(yīng)，屬于這類檢測(cè)器的有紫外、熒光、電化學(xué)檢測(cè)器等。另一類是 總體檢測(cè)器 ，它對(duì) 試樣和洗脫液 總的物理或化學(xué)性質(zhì)有響應(yīng)，屬于這類檢測(cè)器的有示差折光，電導(dǎo)檢測(cè)器等。 （ l）紫外檢測(cè)器 （ 2）熒光檢測(cè)器 （ 3）示差折光率檢測(cè)器 （ 4）電導(dǎo)檢測(cè)器 （ 1）紫外 可見(jiàn)檢測(cè)器 光源 檢測(cè)室 光柵 二極管陣列檢測(cè)器 附屬系統(tǒng) 它包括 脫氣、梯度淋洗、恒溫、自動(dòng)進(jìn)樣、餾分收集以及數(shù)據(jù)處理等 裝置。其中 梯度淋洗裝置 是高壓液相色譜儀中尤為重要的附屬裝置。 梯度淋洗（梯度洗脫）：是在分離過(guò)程中逐漸改變流動(dòng)相的組成，增加洗脫能力的一種方法。 主要是通過(guò)梯度裝置將兩種（或更多）極性不同的溶劑在分離過(guò)程中按一定程序連續(xù)改變流動(dòng)相中溶劑的的配比和極性。類似于氣相色譜程序升溫的作用。 優(yōu)點(diǎn)： 通過(guò)改變極性來(lái)改變分離組分的分離因素，以提高分離效果，增加分辨能力，改善峰形，同時(shí)可縮短分離時(shí)間。 梯度洗脫裝置 通過(guò)兩個(gè)輸液泵流速的變化，改變流動(dòng)相的洗脫能力，其作用與氣相色譜的程序升溫類似。 A B A B C C 右圖表示用二元梯度來(lái)分離幾種氨基甲酸酯類殺蟲劑，采用 15cm的 C18柱，溶劑組成： CH3CNH2O， 15分鐘內(nèi)從 10%（ V/V）隨時(shí)間改變至 50%
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