高效液相色譜法相關(guān)參數(shù)測定-資料下載頁
2025-05-02 07:19本頁面
【正文】 uenced separation 1. 影響分離的因素與提高柱效的途徑 ? 在高效液相色譜中 , 液體的擴(kuò)散系數(shù)僅為氣體的萬分之一 ，則速率方程中的分子擴(kuò)散項 B/U較小 ， 可以忽略不計 ， 即： H = A + C u 故液相色譜 Hu曲線與氣相色譜的形狀不同，如圖所示。 ? 液體的黏度比氣體大一百倍 ， 密度為氣體的一千倍 ，故降低傳質(zhì)阻力是提高柱效主要途徑 。 ? 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 ? 液相色譜中，不可能通過增加柱溫來改善傳質(zhì)。恒溫 ? 改變淋洗液組成、極性是改善分離的最直接的因素。 流速大于 cm/s時 , H～u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速，柱效提高不是很大。但在實際操作中，流量仍是一個調(diào)整分離度和出峰時間的重要可選擇參數(shù)。 氣相色譜中的固定液原則上都可以用于液相色譜，其選用原則與氣相色譜一樣。但在高效液相色譜中，分離柱的制備是一項技術(shù)要求非常高的工作，一般很少自行制備。 二、分離類型選擇 choice of separation types 三、 HPLC的 應(yīng)用 application of HPLC 1. 環(huán)境中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量分析 固定相 ： 薄殼型硅膠 (37 ～ 50?m) 流動相：正己烷 流 速： mL/min 色譜柱： 50cm?(內(nèi)徑 ) 檢測器：差示折光檢測器 可對水果、蔬菜中的農(nóng)藥殘留量進(jìn)行分析。 2. 稠環(huán)芳烴的分析 固定相 ： 十八烷基硅烷化鍵合相 流動相： 20%甲醇 水 ～ 100%甲醇 線性梯度淋洗 ， 2%/min 流 速： 1mL/min 柱 溫： 50 186。C 柱 壓： 70 ?104 Pa 檢測器：紫外檢測器 四、制備型液相色譜 preparative liquid chromatography 獲得高純物質(zhì)（色譜純）的有效方法。 半制備柱（內(nèi)徑 8mm， 長度 15 ～ 30cm）， 一次制備量０ .1～１ mg； （柱負(fù)荷） 對分析柱： 不影響柱效時的最大進(jìn)樣量； 對制備柱： 不影響收集物純度時的最大進(jìn)樣量； 超載： 進(jìn)樣量超過柱容量。柱效迅速下降，峰變寬。 超載可提高制備效率，以柱效下降一半或容量因子 k降低 10%為宜。 2. 液相制備色譜的方法 收集組分時，通常有以下情況： （ 1）可獲得良好分離，主峰 使用制備柱，超載提高效率； （ 2）兩主成分之間的小組分； 超載，分離切分使待分離組分成為主成分（富集）后，再次分離制備。 3. 制備型液相色譜 制備型液相色譜 ： 結(jié)構(gòu)與分析型一樣，但泵流量大、進(jìn)樣量大、采用制備柱；柱后餾分收集器。 制備柱 ： 內(nèi)徑 20～ 50mm， 柱長 50cm。
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