酵母rna的提取及組份鑒定與核酸的定量測(cè)定-資料下載頁(yè)
2024-10-16 04:00本頁(yè)面
【正文】 三、紫外吸收法測(cè)定核酸的含量 ? 1．準(zhǔn)確稱(chēng)取待測(cè)核酸樣品 ，加少量 1mol/L NaOH調(diào)成糊狀，再加適量水，用 56%氨水調(diào)至 ，定容至 50mL。 ? 2．取兩支離心管，甲管加入 2mL樣品溶液和 2mL蒸餾水，乙管加入 2mL樣品溶液和 2mL沉淀劑。混勻，在冰浴上放置 30min。 ? 3．在 3000r/min下離心 10min。從甲、乙兩管中分別吸取 ，用蒸餾水定容至 50mL。選擇厚度為 1cm的石英比色杯，在 260nm波長(zhǎng)處測(cè)定 A值。 四、計(jì)算： ? 式中， 為甲管稀釋液在260nm波長(zhǎng)處 A值減去乙管稀釋液在 260nm波長(zhǎng)處 A值； ? L──比色杯的厚度， 1cm； N為稀釋倍數(shù)； ? ──每毫升溶液內(nèi)含 1μgRNA的 A值； ? ──每毫升溶液內(nèi)含 1μgDNA鈉鹽的 A值。 核酸％＝ 核酸 = 思考題 ?1．為什么用稀堿溶液可以使酵母細(xì)胞裂解？ ?2．如何從酵母中提取到較純的 RNA? ?3．干擾本實(shí)驗(yàn)的物質(zhì)有哪些并設(shè)計(jì)排除這些干擾的實(shí)驗(yàn)。
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