酵母rna的提取及組份鑒定與核酸的定量測定(已修改)
2025-10-23 04:00 本頁面
【正文】 酵母 RNA的提取及組份鑒定與核酸的定量測定 目的要求 ?（１）了解并掌握稀堿法提取 RNA的原理和方法。 ?（２）了解核酸的組分并掌握其鑒定方法。 ?（３）學習紫外線（ UV）吸收法測定核酸濃度的原理。 實驗原理 ? 由于 RNA的來源和種類很多，因而提取制備方法也很各異。一般有苯酚法、去污劑法和鹽酸胍法。其中苯酚法又是實驗是最常用的。組織勻漿用苯酚處理并離心后， RNA即溶于上層被酚飽和的水相中， DNA和蛋白質(zhì)則留在酚層中。向水層加入乙醇后， RNA即以白色絮狀沉淀析出，此法能較好的除去 DNA和蛋白質(zhì)。上述方法提取的 RNA具有生物活性。工業(yè)上常用稀堿法和濃鹽法提取 RNA，用這兩種方法所提取的核酸均為變性的 RNA，主要用作制備核苷酸的原料，其工藝比較簡單。濃鹽法使用 10%左右氯化鈉溶液， 90℃ 提取 34h，迅速冷卻，提取液經(jīng)離心后 , 上清液用乙醇沉淀 RNA。稀堿法使用稀堿使酵母細胞裂解，然后用酸中和，除去蛋白質(zhì)和菌體后的上清液用乙醇沉淀 RNA或調(diào) 。 ? 酵母含 RNA達 %，而 DNA含量僅為 %，為此，提取 RNA多以酵母為原料。 ? RNA含有核糖、嘌呤堿、嘧啶堿和磷酸各組分
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