實(shí)驗(yàn)三蛋白質(zhì)的鹽析分離和凝膠層析-資料下載頁(yè)
2025-05-15 01:47本頁(yè)面
【正文】 3— 環(huán)氧丙烷交聯(lián)而成。交聯(lián)劑添加越多，孔徑越小，吸水量也越??；反之越大。以 Gx表示型號(hào)，后面的數(shù)字可以看出交聯(lián)度，數(shù)字越小，膠聯(lián)度越大。 ? SephadexG25粗：吸水量 ，干粒子直徑 100300181。m，篩孔 4060。大部分蛋白質(zhì)分子從外水體積流出，鹽等小分子從內(nèi)水體積流出。 實(shí)驗(yàn)步驟（一）卵球蛋白的沉淀 實(shí)驗(yàn)步驟（二）卵球蛋白的脫鹽 注意事項(xiàng) ? 實(shí)驗(yàn)完畢后，將凝膠全部回收處理，以備下次實(shí)驗(yàn)使用，嚴(yán)禁將凝膠丟棄或倒入水池中。 ? 樣品溶液的濃度大一些好，但粘度不宜大，加樣體積通常為凝膠柱床體積的 1%10%。 ? 洗脫用的液體與凝膠溶漲和凝膠平衡時(shí)所用的一樣。 洗脫速度要恒定。 ? 凝膠暫時(shí)不用時(shí)，要加防腐劑（如 %疊氮化鈉溶液） 再次使用凝膠時(shí)可再生后使用 蛋白質(zhì)洗脫曲線記錄方式 蛋白質(zhì)脫鹽洗脫曲線01234560 5 10 15 20 25 30 35 40洗脫液（ml)A280鹽離子檢測(cè)方法 ? 用醋酸鋇檢測(cè)溶液中的硫酸根離子。 ? 靈敏度高，與溶液中的硫酸根離子可以形成白色的沉淀。同時(shí)不能同蛋白質(zhì)形成沉淀。 ? 實(shí)驗(yàn)中要設(shè)對(duì)照，即加入雙蒸水和醋酸鋇檢測(cè)溶液。 ? 為什么不用氯化鋇？因?yàn)槁然^易同蛋白質(zhì)形成沉淀。 ? 記錄結(jié)果： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 — — + +++ ++ + — — — 思 考 ? 蛋白質(zhì)的沉淀作用還有哪些方法？哪些是變性了？哪些沒(méi)有變性？在分離蛋白質(zhì)時(shí)常使用哪些方法？ ? 目前常用的脫鹽還有哪幾種方法？ ? 柱層析有哪些種類？其分離物質(zhì)的基本原理？
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