凝膠層析法測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量-資料下載頁(yè)
2025-05-13 16:54本頁(yè)面
【正文】 后保存，如果有顏色或比較臟，可用 滌。短期可保存在水相中，加入防腐劑或加熱滅菌后于低溫保存。建議長(zhǎng)期用干燥狀態(tài)保存。 計(jì)算 分子量的測(cè)定和計(jì)算，一般都采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。只要測(cè)得幾種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的 Ve，并以它們的相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)(logMr)對(duì) Ve作圖得一直線，再測(cè)出待測(cè)樣品的 Ve，即可從圖中確定它的相對(duì)分子質(zhì)量。 注意事項(xiàng) ? 各接頭不能漏氣，連續(xù)用的小乳膠管不要有破損，否則造成漏氣、漏液。注意恒壓瓶?jī)?nèi)的排氣管應(yīng)無(wú)液體，并隨著柱下口溶液的流出不斷有氣泡產(chǎn)生，則表示恒壓瓶不漏氣。操作過(guò)程中，層析柱內(nèi)液面不斷下降，則表示整個(gè)系統(tǒng)有漏氣之處，應(yīng)仔細(xì)檢查并加以糾正。 ? 始終保持柱內(nèi)液面高于凝膠表面，否則水分揮發(fā)，凝膠變干。也要防止液體流干，使凝膠混入大量氣泡，影響液體在柱內(nèi)的流動(dòng)，導(dǎo)致分離效果變壞，不得不重新裝柱。 思考題 ? 生化實(shí)驗(yàn)中常用的凝膠有哪些種類？各有何特點(diǎn)？ ? 凝膠層析除用于測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量外，還有何用途？ ? 比較電泳和層析測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的差異。 ? 你認(rèn)為本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在哪里？上樣前為什么要將柱中多余液體放出？
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