葡聚糖凝膠測蛋白質(zhì)分子量-資料下載頁
2024-10-31 05:37本頁面
【正文】 用自動局部收集器收集流出液。 將各標準蛋白質(zhì)測得的洗脫體積Ve對它們的分子量對數(shù)作圖，那么應(yīng)獲得一線性的標準曲線。 實驗結(jié)果 洗脫體積與分子量關(guān)系的示意圖 思考題： 凝膠層析的定義是什么？ 凝膠層析又稱凝膠過濾，是一種按分子量大小別離物質(zhì)的層析方法。該方法是把樣品加到充滿著凝膠顆粒的層析柱中，然后用緩沖液洗脫。大分子不能進入凝膠顆粒中的靜止相中，只留在凝膠顆粒之間的流動相中，因此以較快的速度首先(shǒuxiān)流出層析柱，而小分子那么能自由出入凝膠顆粒中，并很快在流動相和靜止相之間形成動態(tài)平衡，因此就要花費較長的時間流經(jīng)柱床，從而使不同大小的分子得以別離。,第九頁，共十頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),凝膠過濾法測定蛋白質(zhì)的相對分子量。外水體積V0指凝膠顆粒間的自由空間所占的體積，即存在于柱床內(nèi)凝膠顆粒外面空隙之間的水相體積。假設(shè)用分子量的標準蛋白質(zhì)在一定型號葡聚糖凝膠柱上層析，精確測其洗脫(xǐ tuō)體積，并以洗脫(xǐ tuō)體積Ve對分子量的對數(shù)logMW作圖，可獲得一條標準曲線。未知分子量的蛋白質(zhì)在相同條件下層析，根據(jù)其洗脫(xǐ tuō)體積即可在標準曲線上求得分子量。凝膠層析又稱凝膠過濾，是一種按分子量大小別離物質(zhì)的層析方法,第十頁，共十
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