實驗一凝膠過濾層析分離蛋白質(zhì)-資料下載頁
2025-08-05 05:52本頁面
【正文】 ③凝膠逐層上升，至頂部 23cm時，關閉出口 注意點： ? 垂直放置 ? 防止氣泡產(chǎn)生 ? 防止柱的分層 4. 平衡 放置一段時間，約 40分鐘（使凝膠更好的壓實） 注意： 防止床面干涸，可適當補充蒸餾水 5. 加樣 ① 加樣前打開出口，使床面的蒸餾水流出，正好露 出床面時，立即關閉出口 （將干未干） ② 用滴管將混合樣品 (，即血紅蛋白和溶菌酶 各 )緩緩沿柱內(nèi)壁小心加于床表面 ③ 打開出口，使樣品進入床內(nèi)，直到床面重新露出 , 立即加入 1~2倍于樣品體積的蒸餾水 6. 洗脫 ① 當此少量蒸餾水接近流干時，反復多次加入蒸 餾水，進行洗脫，直到兩帶分開 ② 檢查 Hb在層析床中色帶位置，待 Hb洗脫完后， 用試管分步收集洗脫液 ③ 10d/管，每管加 NaOH 2d， CuSO4 2d ④ 檢查溶菌酶洗脫情況，若為紫色，則為（ +） CuSO 4H 2 N C NH C NH 2OO紫 紅色堿性縮二脲反應 （雙縮脲反應） 肽鍵 四、實驗結(jié)果 繪制洗脫結(jié)果示意圖，并分析所得結(jié)果 下次實驗： 《 堿性磷酸酶的提取及其比活性的測定 》 時間： 4月 18日上午 9： 00開始 五、討論
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