葡聚糖凝膠測蛋白質分子量-文庫吧資料
2024-10-31 05:37本頁面
【正文】 止裝柱，關閉出水口，再以洗脫液平衡柱層，直至層析的膠床高不變。把已經溶脹好的凝膠調成薄漿，傾入柱內，膠粒逐漸擴散下沉。n)使柱子底部充滿液體，將柱的出口關閉。在柱中加約1/3柱容積的洗脫液，并趕凈尼龍膜下方氣泡，完全(w225。,第七頁，共十頁。 二、裝柱 層析柱必須粗細均勻，通常柱愈長，別離效果愈好，但柱過長，反而(fǎn 233。待溶脹平衡后，傾去上層清液，包括細顆粒，然后再放些蒸餾水攪亂，靜置使凝膠下沉，再傾去上層清液，至無細顆粒為止。 藍色葡聚糖2000(10mg/ml)；Sephsdex G100；牛血清白蛋白〔2mg/ml)〔Mr 67 000)。,第六頁，共十頁。假設用分子量的標準蛋白質在一定型號葡聚糖凝膠柱上層析，精確測其洗脫體積，并以洗脫體積Ve對分子量的對數(shù)logMW作圖，可獲得一條標準曲線。 實際工作時，有時Kd＞1，表示凝膠對組分有吸附作用，此時Ve＞Vo+Vi，例如一些芳香族化合物的洗脫體積遠超出理論計算的最大值。同樣兩種分子如都能進入內部空隙，即Kd都等于1，它們雖然分子大小有不同，但也沒有別離效果。,對某一凝膠介質，如果兩種分子全排出(p225。中等分子〔分子大小在上述兩種極限之間〕所需洗脫液體積介于兩者之間，Ve＝V0＋KdVi〔0Kd
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