葡聚糖凝膠測蛋白質(zhì)分子量-在線瀏覽
2024-10-31 05:37本頁面
【正文】 線性葡聚糖和交聯(lián)劑組成的有不同孔隙度的立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，根據(jù)物質(zhì)在凝膠顆粒的微孔中擴(kuò)散的速率進(jìn)行別離(fēnl237。,第二頁，共十頁。例如，G25為每克凝膠膨脹(p233。ng)時吸水2.5克，同樣G200為每克干膠吸水20克。,第三頁，共十頁。 d224。,第四頁，共十頁。Vt是由三局部組成，包括內(nèi)水容積Vi、外水體積V0 和凝膠本身的體積Vg 。外水體積V0指凝膠顆粒間的自由空間所占的體積，即存在于柱床內(nèi)凝膠顆粒外面空隙之間的水相體積。j236。 當(dāng)樣品流經(jīng)凝膠柱時，大于孔隙的大分子完全不滲入到凝膠內(nèi)部，只需V0體積的洗脫液便可將其由一端洗脫到另一端；相反，如果樣品體積小于孔隙，那么需要V0＋Vi體積的洗脫液，才能將它們由一端洗脫到另一端。,第五頁，共十頁。i chū)，即Kd都等于零，雖然分子大小有差異，但沒有別離效果。因此不同型號的凝膠介質(zhì)，有它一定的使用范圍。 不同大小分子量的蛋白質(zhì)，進(jìn)入凝膠篩孔的程度不同，其洗脫體積決定于分子大小，蛋白質(zhì)在葡聚糖凝膠柱上層析的洗脫體積和分子量的對數(shù)呈直線關(guān)系。未知分子量的蛋白質(zhì)在相同條件下層析，根據(jù)其洗脫體積即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得分子量。,試劑和材料 洗脫液：0.05M TrisHCl緩沖液〔pH7.5〕，0.1M KCl
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