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葡聚糖凝膠層析脫鹽-在線瀏覽

2025-07-16 02:35本頁面
  

【正文】 ( 6) 具有可選擇的多種孔徑 。 葡聚糖凝膠 ( 商品名稱 Sephadex) 是最常用的層析介質(zhì) 。 調(diào)節(jié)葡聚糖和交聯(lián)劑配比 , 可以獲得網(wǎng)眼大小不同 , 型號各異的凝膠 。 G值表示每克干膠吸水量 ( mL) 的十倍 。 常用的葡聚糖凝膠有多種規(guī)格 , 如 G G1 G2G50、 G7 G100等 。 顆粒接近或大于網(wǎng)眼的分子 , 不能進(jìn)入凝膠的網(wǎng)眼中 ,在重力作用下它們隨著溶劑在凝膠顆粒之間沿較短流程向下流動 , 受到的阻滯作用小 , 移動速度快 , 先出層析柱 ( 此現(xiàn)象叫作被 排阻 。 原 理 ( 2) 安裝與檢查 :檢查出口裝置中尼龍綢或燒結(jié)濾板是否完好干凈 。 對準(zhǔn)出口處 , 放一只 250mL燒杯 。 ( 3) 排氣泡 :保持柱內(nèi)一定的水位 , 用手指彈擊柱壁 , 部分氣泡會從溶液中上浮排出 。 ( 4) 標(biāo)記高度 :在距頂端 8~ 10cm處做一標(biāo)記 , 作為衡量灌裝層析介質(zhì)床體高度 ( 15~ 17cm) 的依據(jù) 。 輕輕攪勻杯中凝膠 , 用玻璃棒引流入柱 , 打開出水口 ,并不斷地向柱內(nèi)補(bǔ)充凝膠 , 直到凝膠沉淀高度位于標(biāo)記上方約 2cm為止 , 凝膠柱內(nèi)若有氣泡和斷層或柱床表面干水和歪斜 , 都將影響分離效果 。 操作步驟 平衡 取 15mL洗脫劑 , 用滴管沿柱內(nèi)壁旋轉(zhuǎn)著緩緩流下 ,不可沖動膠平面 , 打開出水口 , 經(jīng)洗脫液的流動 , 一方面清洗內(nèi)壁 , 另一方面使膠床收緊 。 此時 , 膠床高度 ≥15cm為宜
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