實(shí)驗(yàn)三蛋白質(zhì)的鹽析分離和凝膠層析-在線瀏覽
2025-07-18 01:47本頁面
【正文】 及鑒定技術(shù) ? 材料（取材一定要新鮮，在低溫下操作） ? 破細(xì)胞（勻漿器，研缽，超聲波，反復(fù)凍融，化學(xué)方法，酶解等） ? 蛋白質(zhì)提取（根據(jù)物質(zhì)的性質(zhì)，水、鹽溶液、稀酸、稀堿、有機(jī)溶劑） ? 蛋白質(zhì)分級(jí)分離（鹽析分級(jí)分離、有機(jī)溶劑分級(jí)分離、等電點(diǎn)分離） ? 進(jìn)一步純化（透析、柱層析：分子篩、離子交換、親和層析、HPLC） ? 鑒定（電泳：薄層電泳（紙， NC膜）、凝膠電泳（ PAG，瓊脂，淀粉）；結(jié)構(gòu)分析；活性分析；呈色反應(yīng)） ? 含量測(cè)定（ fonlin酚法、考馬斯亮藍(lán) G250法） 蛋白質(zhì)的分級(jí)分離（粗分級(jí)） 一、鹽析沉淀分離 鹽溶和鹽析現(xiàn)象：低鹽濃度下蛋白質(zhì)的溶解度隨鹽濃度的增加而增加；鹽濃度升高到一定程度后，蛋白質(zhì)的溶解度隨鹽濃度的增加而減小析出。 鹽的選擇：通常采用中性鹽，硫酸銨、硫酸鎂、氯化鈉、磷酸鈉等。 t為每升加入的克數(shù)。 三、選擇性沉淀法（等電點(diǎn)、熱變性、酸堿變性等） 四、吸附法 五、重金屬鹽沉淀法 蛋白質(zhì)的進(jìn)一步純化（細(xì)分級(jí)） ? 一、透析和超過濾 ? 二、層析（色譜）分離 ? 氣相色譜（色譜儀） ? 液相色譜：紙層析和薄層層析（分配層析）、柱層析（分子排阻、離子交換、親和層析、吸附層析等） ? 高效液相色譜（色譜儀） ? 兩位英國(guó)科學(xué)家 Martin和 Synge發(fā)明了分配色譜（層析），他們獲得了 1952年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。 ? 高效液相色譜儀 氣相色譜儀 蛋白質(zhì)的鹽析分離原理
畢業(yè)設(shè)計(jì)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1