葡聚糖凝膠層析脫鹽-資料下載頁(yè)
2025-05-13 02:35本頁(yè)面
【正文】 小 。 顆粒小 ，分辨率高 ， 但流速慢 ， 實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng) ， 有時(shí)會(huì)造成擴(kuò)散嚴(yán)重；顆粒大 ， 分辨率低 。 但條件得當(dāng) ， 也可以得到滿(mǎn)意的結(jié)果 。 影響凝膠分離效果的因素： 思考題 柱子的影響： 柱的長(zhǎng)短粗細(xì)對(duì)層析效果都會(huì)產(chǎn)生影響 。一般柱內(nèi)徑為 1cm， 如果樣品較多 ， 最好用 23cm。 直徑太小時(shí)會(huì)發(fā)生 “ 管壁效應(yīng) ” 。 即柱管中心組分移動(dòng)較慢 ，管壁周?chē)苿?dòng)較快 。 進(jìn)行脫鹽時(shí) ， 柱高 50cm比較合適；分級(jí)分離時(shí) ， 100cm就足夠了 。 凝膠的裝填 ：要均勻 ， 不能有斷路或氣泡 。 加樣 ：樣品濃度和黏度合適 。 一般樣品所用體積為柱體積的 14%。 影響凝膠分離效果的因素： 思考題 洗脫 ：洗脫液只要能溶解被洗脫物質(zhì)并不使其變性就可以了 。 洗脫速度要恒定且合適 。 一般來(lái)講 ， 洗脫速度慢 ， 一些樣品可以與凝膠基質(zhì)充分平衡 ， 分離效果好 。但洗脫速度過(guò)慢會(huì)造成樣品擴(kuò)散加劇 ， 區(qū)帶變寬 ， 切實(shí)驗(yàn)時(shí)間大大延長(zhǎng) 。 分配系數(shù) Kav ： Kd = （ VeVo） /（ VtVo） 影響凝膠分離效果的因素： 相關(guān)知識(shí) Vt：床的總體積 =外水體積 +內(nèi)水體積 +顆粒自身體積 Ve：洗脫體積 Vo：外水體積 大分子 （ 大于孔徑上限 ） 全部在外水體積中 ， 它在膠床中的洗脫體積等于外水體積 。 （ Kd=0） 小分子 （ 小于孔徑下限 ） 自由出入網(wǎng)孔 ， 它在膠床中的洗脫體積等于床體積 。 （ Kd= 1） Kd = （ VeVo） /（ VtVo）
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