【正文】 準(zhǔn)確度（比對試驗）偏差均采用相對偏差進行表述，當(dāng)對線性范圍中某一極低值樣本進行線性范圍以及準(zhǔn)確度（比對試驗）試驗時，其試驗結(jié)果采用絕對偏差符合申請人的規(guī)定更為合理。因此，本指導(dǎo)原則建議 企業(yè)可對產(chǎn)品線性偏差以及準(zhǔn)確度（比對試驗）偏差進行分段要求，分別采用絕對偏差和相對偏差進行表述。 （五）關(guān)于產(chǎn)品技術(shù)要求中分析靈敏度描述的說明：行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T1199— 2021 中分析靈敏度指的是產(chǎn)品功能靈敏度，而國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T26124— 2021中分析靈敏度，指的是產(chǎn)品校準(zhǔn)曲線斜率。鑒于甘油三酯測定試劑盒功能靈敏度指標(biāo)目前并沒有實際臨床意義，本指導(dǎo)原則中分析靈敏度要求采用國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T26124— 2021 中校準(zhǔn)曲線斜率的描述。 （六）關(guān)于參考區(qū)間的驗證資料中對健康個體至少 120 例的說明 ：此例數(shù)的規(guī)定，結(jié)合已發(fā)布產(chǎn)品技術(shù)審查指導(dǎo)原則，并參考《 WS/T402— 2021臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定》以及《 C28A2 如何確定臨床檢驗的參考區(qū)間：批準(zhǔn)指南（ 2021）》。 （七）關(guān)于臨床試驗“總體樣本數(shù)不少于 200 例，異常值樣本數(shù)不少于 80 例”的說明：參照國家局已發(fā)布實施的缺血修飾白蛋白、肌酸激酶、堿性磷酸酶產(chǎn)品注冊技術(shù)指導(dǎo)原則。 （八）關(guān)于綜述資料、產(chǎn)品說明書中有關(guān)與甘油三酯檢測相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景的說明：臨床意義的描述參考自《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第 4 版）》。 三、 指導(dǎo)原則編寫單位和人員 本指導(dǎo)原則編寫人員由浙江省醫(yī)療器械技術(shù)審評人員、行政審批人員、檢驗和臨床專家、產(chǎn)品專業(yè)廠家代表等共同組成。 第三篇：總膽固醇測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 2 總膽固醇測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對總膽固醇（ Totalcholesterol， TC）測定試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。 本指導(dǎo)原則是對總膽固醇測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用 ，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。 本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。 一、適用范圍本指導(dǎo)原則所指的總膽固醇測 定試劑是指利用CHODPAP 法對人血清、血漿等樣本中總膽固醇含量進行體外定量測定的試劑。 目前，總膽固醇測定已有完整的參考系統(tǒng)：其決定性方法為同位素稀釋質(zhì)譜法，參考方法為正己烷抽提 LB 反應(yīng)顯色法（ ALBK 法）或色譜法，常規(guī)測定方法為酶法。酶法主要包括膽固醇氧化酶法和膽固醇脫氫酶法，其中膽固醇氧化酶 PAP 法是目前應(yīng)用最為廣泛的常規(guī)測定方法。依據(jù) YY/T12272021《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）命名》的要求，將膽固醇氧化酶 PAP法規(guī)范表述為 CHODPAP法。本指導(dǎo)原則適用于采用 CHODPAP 法測定的試劑，不適用于脫氫酶法和干化學(xué)法測定的試劑，但適用處可參照執(zhí)行。 依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）、《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔 2021〕 242 號），總膽固醇測定試劑屬于酯類檢測試劑，管理類別為Ⅱ類，分類編碼為 6840。本指導(dǎo)原則適用于進行產(chǎn)品注冊和相關(guān)許可事項變更的產(chǎn)品。 二、注冊申報資料要求（一）綜述資料綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性說明、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價以及同類產(chǎn)品上市情況等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021 年第 44 號）的相關(guān)要求。 ，分為酯化型膽固醇（又稱膽固醇酯， CE）和游離型膽固醇（ FC），其中CE 占 60%~70%， FC 占 30%~40%，健康個體之間 兩種類型的比例保持穩(wěn)定。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸以及維生素 D 等生理活性物質(zhì)的重要原料，也是構(gòu)成細胞膜的主要成分，其濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。 定量測定人體樣本中總膽固醇含量，臨床主要用于心血管疾病的危險分析，高 TC 血癥是冠心病的主要危險因素之一。病理狀態(tài)下，高TC 有原發(fā)與繼發(fā)兩類，原發(fā)的如家族性高膽固醇血癥（低密度脂蛋白受體缺陷）、家族性 apoB 缺陷癥、多源性高 TC、混合性高脂蛋白血癥。繼發(fā)的多見于腎病綜合征、甲狀腺功能減退、糖尿病、妊娠等。低 TC血癥也有原發(fā)性的與繼發(fā)的，前者如家族 性的無或低β脂蛋白血癥，后者如甲亢、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病等。 、主要原材料的來源及制備方法、主要生產(chǎn)工藝過程，注冊申請包含質(zhì)控品、校準(zhǔn)品時，應(yīng)明確制備方法及定值（溯源）情況。 、病原體、人源組織和體液等生物材料經(jīng)處理或添加某些物質(zhì)制備而成，為保證產(chǎn)品在運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境的安全，研究者應(yīng)提供上述原材料有關(guān)生物安全性的說明或證明文件。 。 ，相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況，申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的異同等。 （二）主要原材料的研究資料（如需提供）包括主要反應(yīng)成分、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品等的選擇、制備及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究資料； 質(zhì)控品應(yīng)提供詳細的定值試驗資料，校準(zhǔn)品應(yīng)提供詳細的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細資料。 （三）主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系的研究資料（如需提供） 生產(chǎn)工藝介紹，可以圖表方式表示； （樣本、試劑等 ）最適條件的研究資料等。 （四）分析性能評估資料申請人應(yīng)當(dāng)提交三批產(chǎn)品研制階段對試劑進行的所有性能驗證研究資料，對于每項分析性能的評價應(yīng)包括具體研究目的、實驗設(shè)計、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細資料。有關(guān)分析性能驗證的背景信息也應(yīng)在申報資料中體現(xiàn)，包括實驗地點、適用儀器、試劑規(guī)格、批號、臨床樣本來源等。 對于總膽固醇測定試劑，分析性能應(yīng)包括試劑空白吸光度、線性范圍、準(zhǔn)確度、分析靈敏度、精密度、分析特異性、其他影響檢測的因素等。 （如純化 水、生理鹽水等）加入工作試劑作為樣品，在試劑規(guī)定主波長下測試吸光度值，重復(fù)兩次，均值即為空白吸光度。雙試劑型試劑應(yīng)不大于 ，單試劑型試劑應(yīng)不大于 。 線性范圍的建立申請人建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度達到預(yù)期測定上限的混合人源樣本，制備低濃度樣本時應(yīng)充分考慮稀釋對樣本基質(zhì)的影響。建立線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇 7～ 11 個濃度水平。例如，將預(yù)期測定范圍加寬至 130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實 驗結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點（最終不得少于 7 個水平）直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。 線性范圍的驗證 用接近線性范圍上限的高濃度樣本和接近線性范圍下限的低濃度樣本，混合成至少 5 個稀釋濃度（ xi）。分別測試樣本，每個稀釋濃度測試 3 次，求出每個稀釋濃度測定結(jié)果的均值（ yi）。以稀釋濃度（ xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（ yi）為因變量求出線性回歸方程。計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（ r）， r≥ 。 用 方法中稀釋濃度（ xi）代入求出線性回歸方程，計算 yi 的估計值 及 yi 與估計值的絕對偏差或相對偏差，應(yīng)符合申請人給定值。 /國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 3 次，測試結(jié)果記為（ xi），按公式（ 1）分別計算相對偏差（ B%），如果 3次結(jié)果都在177。 10%范圍內(nèi)，即判為合格。如果大于等于 2 次的結(jié)果不符合，即判為不合格。如果有 1次結(jié)果不符合，則應(yīng)重新連續(xù)測試 20 次，并分別按照公式（ 1）計算相對偏差（ B%），如果大于等于 19 次測試的結(jié)果都在177。 10%范圍內(nèi)，即判為合格。 B%＝ |xi－ T|／ T 100%????????????（ 1）式中： xi 為測試結(jié)果； T 為國家 /國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)示值。 ，在規(guī)定參數(shù)下所得的吸光度差值（Δ A）應(yīng)符合申請人給定的范圍。 批內(nèi)精密度重復(fù)測試不同濃度（如高、中、低）的質(zhì)控品或樣本 10次，所得結(jié)果的變異系數(shù)（ CV）應(yīng)不大于 %。 批間差選取 3 個不同批次的試劑，測試不同濃度（如高、中、低）的質(zhì)控品或樣本，每個批號測定 3次，批間相對極差（ R）應(yīng)不大于 %。 ：對膽紅素、甘油 三酯、血紅蛋白、抗壞血酸等干擾物質(zhì)分別進行驗證。說明樣本的制備方法及實驗的評價標(biāo)準(zhǔn)，確定干擾物質(zhì)的接受標(biāo)準(zhǔn)。 （如適用）校準(zhǔn)品應(yīng)提供詳細的量值溯源資料，包括賦值試驗資料和溯源性文件等； 質(zhì)控品應(yīng)提供詳細的定值資料。應(yīng)參照 GB/T21415— 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品賦值及不確定度計算記錄，提供質(zhì)控品在所有適用機型上的定值及其靶值范圍確定的記錄。 ，注冊申請時應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用機型】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。 注冊申請中包含不同的包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格之間的差異進行分析或驗證，如不同包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品的分析性能評估。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。 （五）參考區(qū)間確定資料應(yīng)明確研究采用的樣本來源、健康個體定義、詳細的試驗資料、統(tǒng)計方 法等，參考區(qū)間可參考文獻資料，但應(yīng)當(dāng)對至少 120例的健康個體進行驗證。 產(chǎn)品說明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述應(yīng)與研究結(jié)論保持一致。 （六）穩(wěn)定性研究資料 ，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。 、運輸穩(wěn)定性、開瓶 /復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等，申請人應(yīng)至少提供 3 個生產(chǎn)批次的實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開瓶 /復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）等研究資料，包括研究目的、評價標(biāo)準(zhǔn)、研究方法和研究結(jié)論等。 、 冷藏和 /或冷凍條件下的有效期驗證，在合理溫度范圍內(nèi)選擇溫度點，間隔一定時間段對儲存樣本進行性能的分析驗證，從而確認(rèn)樣本的效期穩(wěn)定性，也可以通過相關(guān)文獻資料來證明適用樣本的穩(wěn)定性。適用冷凍保存的樣本應(yīng)對凍融次數(shù)進行評價。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)分別在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進行詳細說明。 （七）臨床評價資料此項目已經(jīng)列入《關(guān)于新修訂免于進行臨床試驗醫(yī)療器械目錄的通告》（國家藥品監(jiān)督管理局通告 2021年第 94號）中免于進行臨床試驗的體外診斷試劑目錄。根 據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，申請人可按照《免于進行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 179 號）要求進行臨床評價。如無法按要求進行臨床評價，應(yīng)進行臨床試驗，臨床試驗的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。 因素的臨床樣本的評估、綜合文獻資料等非臨床試驗的方式對產(chǎn)品臨床性能進行評價的過程。 申請人可自行或者委托境內(nèi)機構(gòu) 或?qū)嶒炇彝瓿稍摦a(chǎn)品的臨床評價，試驗地點的設(shè)施、設(shè)備、環(huán)境等應(yīng)能夠滿足該產(chǎn)品的檢測要求。申請人對整個試驗過程進行管理和試驗數(shù)據(jù)的真實性進行負責(zé)。臨床評價報告作為臨床評價資料在注冊時提交，其他臨床評價相關(guān)資料如試驗方案、原始記錄等由申請人進行保管，保管期限至少為 10 年。境外申請人可通過其在中國境內(nèi)的代理人，開展相關(guān)臨床評價工作。以下簡要說明臨床評價的相關(guān)內(nèi)容。 （ ALBK法、色譜法等）和境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品，申請人可以選擇其中一種方法開展比較研究試驗。 與參考方法進行比較研究試驗，考察待評價試劑與參考方法的一致性。一致性評價應(yīng)選擇在參考實驗室開展研究，參考實驗室應(yīng)具有中國合格評定國家認(rèn)可委員會認(rèn)可關(guān)于該項目的檢測資質(zhì)。 與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進行比較研究試驗，證明兩者具有等效性。應(yīng)選擇目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品作為對比試劑，同時應(yīng)充分了解對比試劑的信息，包括方法學(xué)、預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況以及參考區(qū)間等，并提供已上市產(chǎn)品的境內(nèi)注冊信息及說明書。 試驗設(shè)計申請人應(yīng)根據(jù)申請注冊產(chǎn)品的特性建立具體的試驗方案，并詳 細說明對比試劑 /方法的選擇、入排標(biāo)準(zhǔn)、樣本量要求以及具體試驗操作過程、試驗周期、設(shè)盲要求、統(tǒng)計分析方法等內(nèi)容。 樣本要求評價用樣本應(yīng)來源于人體樣本，樣本的來源可追溯。評價用樣本應(yīng)涵蓋申請注冊產(chǎn)品預(yù)期用途和含有膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯、抗壞血