【正文】 應(yīng)符合配合使用的血型試劑的具體操作要求。 對于抗人球蛋白檢測試劑建議著重對以下分析性能進(jìn)行研究 ： ： 提供臨床有意義的血型系統(tǒng)至少 7 種不規(guī)則抗體（ IgG）檢測靈敏度和特異性的驗證資料，明確所檢出抗體的抗體效價的具體要求，可參照以下要求進(jìn)行實驗。 靈敏度 與已知抗體效價的血型抗體的最高稀釋倍數(shù)的凝集強度不小于 1+，并且抗體效價不低于試管間接抗人球蛋白法測定結(jié)果。 C3d 凝集強度≥ 2+。 特異性 與已知抗體類型的血型抗體對應(yīng)的 O 型相應(yīng)抗原陽性紅細(xì)胞的反應(yīng)為陽性。 與已知抗體類型的血型抗體對應(yīng)的 O 型相應(yīng)抗原陰性紅細(xì)胞的反應(yīng)為陰性。 與 C3d陽性或陰性樣本反應(yīng)為陽性或陰性。 重復(fù)性 分別采用 IgG 性質(zhì)抗 D 抗體， IgG性質(zhì)抗 Jka/Jkb 抗體， IgG 性質(zhì)抗 Fya/Fyb抗體進(jìn)行重復(fù)性驗證。 批內(nèi)重復(fù)性采用同一批次檢測卡重復(fù)進(jìn)行檢測，重復(fù)次數(shù)不少于10 次。 日間重復(fù)性采用同一批次檢測卡每日重復(fù)進(jìn)行檢測，重復(fù)天數(shù)不少于 10 天。 批間重復(fù)性采用至少三批檢測卡進(jìn)行重復(fù)檢測。 批內(nèi)、日間、批間重復(fù)性檢測結(jié)果應(yīng)基本 一致，檢測結(jié)果凝集強度差異不超過 1+。 采用陰性結(jié)果的血清重復(fù) 10次檢測，均應(yīng)出現(xiàn)陰性反應(yīng)。 干擾 提供溶血、脂血、黃疸干擾的評估資料，應(yīng)至少采用強、中、弱性質(zhì)的抗體進(jìn)行評價。 血清、血漿比對的評估資料。 抗凝劑的適用性研究驗證。 采用部分臨床樣本進(jìn)行檢測靈敏度和特異性的評價，應(yīng)考慮涵蓋腫瘤、血液病、自身免疫病和貧血患者、老人及兒童等病例來源，應(yīng)包括陽性和陰性病例。 分別進(jìn)行每個預(yù)期用途的完整的性能評估資料，應(yīng)至少包括50 例陽性病例。 使用被不規(guī)則抗體和 /或 C3d致敏的紅細(xì)胞進(jìn)行反應(yīng)，評價產(chǎn)品性能，適用的性能評價內(nèi)容可以參照間接抗人球蛋白試驗。 （五）陽性判斷值 給出不同凝集強度的研究方法，并明確不同凝集強度代表的具體意義，并應(yīng)包含溶血、混合視野雙群等情況，明確具體的試驗方法、實驗步驟，提供不同凝集強度的圖例或相片。 （六）穩(wěn)定性研究資料 穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。前者主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、加熱穩(wěn)定 性、開瓶穩(wěn)定性等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案，實驗項目應(yīng)至少包括靈敏度、特異性、重復(fù)性等內(nèi)容。 穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。 應(yīng)對樣本穩(wěn)定性進(jìn)行研究，主要包括室溫保存、冷藏和冷凍條件下的有效期驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點（溫度范圍），每間隔一定的時間段對儲存樣本進(jìn)行全性能的分析驗證，從而確認(rèn)不同類型樣本的穩(wěn)定性。適于冷凍保存的 樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行評價。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)分別在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進(jìn)行詳細(xì)說明。 （七）臨床試驗 臨床試驗總體要求及臨床試驗資料的內(nèi)容應(yīng)符合《辦法》、“ 44 號公告”及《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 16 號）的規(guī)定，以下僅結(jié)合抗人球蛋白檢測試劑的具體特點對其臨床試驗中應(yīng)重點關(guān)注的內(nèi)容進(jìn)行闡述。 該類試劑已有同類產(chǎn)品上市，按照法規(guī)要求應(yīng)選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）與之進(jìn)行比較研究試驗，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。 應(yīng)選擇符合相關(guān)法規(guī)要求的臨床試驗機構(gòu)進(jìn)行臨床試驗，不得選擇血站進(jìn)行臨床試驗。 臨床總病例數(shù)應(yīng)不少于 3000例。應(yīng)采用臨床患者樣本進(jìn)行臨床研究，供血者樣本不得作為臨床病例納入。應(yīng)包括對檢測易產(chǎn)生干擾的病例，盡量選擇多種疾病患者樣本（如腫瘤患者 、自身免疫病患者、血液病患者）、老人、兒童（不同年齡段）等。 無論直接抗人球蛋白試驗還是間接抗人球蛋白試驗，均應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的預(yù)期用途和適用人群分別進(jìn)行臨床試驗。 在進(jìn)行間接抗人球蛋白檢測試劑臨床試驗的過程中除與對比試劑進(jìn)行比較外，陽性結(jié)果應(yīng)給出不規(guī)則抗體的具體鑒定結(jié)果。 產(chǎn)品如適用于不同的預(yù)期用途（如不規(guī)則抗體篩查、抗體致敏紅細(xì)胞檢測、交叉配血等），每種預(yù)期用途均應(yīng)分別進(jìn)行至少 3000 例的臨床試驗，如適用于不規(guī)則抗體篩查或抗體致敏紅細(xì)胞檢測等，每種預(yù)期用途應(yīng)分別包 含不少于 100 例陽性病例，如適用于交叉配血相關(guān)用途，應(yīng)包含不少于 100 例交叉配血不合病例?？贵w致敏紅細(xì)胞檢測應(yīng)根據(jù)疾病的種類，分別進(jìn)行臨床試驗。 交叉配血使用的供血者樣本，最多只能使用兩次，交叉配血不得使用血型不合的樣本進(jìn)行實驗。 同時應(yīng)明確配合使用的試劑產(chǎn)品。 應(yīng)進(jìn)行考核試劑與對比試劑檢測結(jié)果的陽性符合率、陰性符合率、總符合率的計算，并以四格表的形式進(jìn)行列表，并對定性結(jié)果進(jìn)行Kappa檢驗以驗證檢測結(jié)果的一致性。 對于 兩種試劑檢測結(jié)果不一致 [考核試劑與對比試劑檢測結(jié)果不一致、與對比試劑凝集強度差異較大（差異 2 個凝集強度及以上） ]的樣本，應(yīng)采用臨床上公認(rèn)較好的第三種同類試劑進(jìn)行確認(rèn)試驗，同時應(yīng)給出最終的抗體鑒定結(jié)果。 。臨床試驗數(shù)據(jù)記錄表應(yīng)列明所有病例的具體臨床診斷信息、凝集強度和抗體鑒定結(jié)果，如有不符樣本應(yīng)列明第三方確認(rèn)的結(jié)果。 （八）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料 產(chǎn)品風(fēng)險分析資料應(yīng)符合“ 44 號公告”的基本要求，并參照相應(yīng)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行風(fēng)險分析。風(fēng)險分析中應(yīng)充分 考慮到各種可能影響檢測結(jié)果的因素，如某些樣本（如腫瘤患者、自身免疫病患者、血液病患者等）在進(jìn)行抗人球蛋白檢測時可能存在一定的干擾、實驗過程不規(guī)范、有些抗體較弱導(dǎo)致的檢測結(jié)果不穩(wěn)定等，申請人應(yīng)根據(jù)這些不確定的因素分析產(chǎn)品應(yīng)用可能存在的風(fēng)險。 （九）產(chǎn)品技術(shù)要求 申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、性能評估等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2021 年第 9 號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求。產(chǎn)品技術(shù) 要求應(yīng)符合《辦法》和“ 44號公告”的相關(guān)規(guī)定。 如果擬申報試劑已有相應(yīng)的國家 /行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求。 產(chǎn)品技術(shù)要求的性能指標(biāo)應(yīng)至少包括靈敏度、特異性、重復(fù)性等。 產(chǎn)品技術(shù)要求的附錄應(yīng)包括主要原材料、生產(chǎn)工藝及半成品檢定要求。主要原材料應(yīng)明確抗體來源、克隆號、純度、效價、特異性以及功能性驗證要求，應(yīng)明確填充物來源及主要特征、質(zhì)量控制要求，緩沖液應(yīng)明確組成、 pH 值等特性及質(zhì)控要求。主要生產(chǎn)工藝應(yīng)以流程圖形式描述主要生產(chǎn)工藝過程，并明確主要生產(chǎn)工藝的具體條件和 質(zhì)量控制點。半成品檢定應(yīng)明確半成品的檢驗要求及方法。 （十）產(chǎn)品注冊檢驗報告 根據(jù)《辦法》要求，首次申請注冊的第三類體外診斷試劑產(chǎn)品應(yīng)在國家食品藥品監(jiān)督管理部門認(rèn)可的、具有相應(yīng)承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)進(jìn)行連續(xù)三個生產(chǎn)批次樣品的注冊檢驗。 （十一）產(chǎn)品說明書 說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗原理、試驗方法、檢測結(jié)果解釋以及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 17 號）的要求，境外產(chǎn)品的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持 一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。 以下內(nèi)容僅對抗人球蛋白檢測試劑說明書的重點內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明，說明書其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行編寫。 1.【預(yù)期用途】 /或間接抗人球蛋白試驗，主要用于不規(guī)則抗體篩查、交叉配血、抗體致敏紅細(xì)胞的檢測（明確疾病類型）等，同時明確不用于血源篩查，僅用于臨床檢驗。 說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，說明相關(guān)的 臨床或?qū)嶒炇以\斷方法。 2.【儲存條件及有效期】 說明試劑的儲存條件及有效期、加速穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等。 3.【適用儀器】明確具體的離心機和 /或孵育器型號（如適用）。 4.【樣本要求】 明確溶血、脂血、黃疸樣本是否可以使用，或提供使用此類樣本的最低要求。依據(jù)穩(wěn)定性研究結(jié)果寫明樣本穩(wěn)定性。 明確適用的抗凝劑的要求。 明確具體的樣本采集、處理方法及過程。 明確紅細(xì)胞配制使用的 LISS液的生產(chǎn)廠家、規(guī)格、貨號等內(nèi)容。 5.【陽性判斷值】 明確各種試驗方法的結(jié)果判斷方法及標(biāo)準(zhǔn)，并通過不同凝集強度的圖例或照片進(jìn)行詳細(xì)解釋。 6.【檢驗方法】 明確配合使用的抗體篩查用紅細(xì)胞的生產(chǎn)廠家、規(guī)格、貨號等內(nèi)容。 須明確具體的檢驗步驟，反應(yīng)體系的描述應(yīng)準(zhǔn)確且應(yīng)與研究資料一致，不同的預(yù)期用途應(yīng)分別詳細(xì)描述實驗過程。如配合其他試劑進(jìn)行試驗，需注明試驗方法應(yīng)完全符合配合試劑的試驗操作要求。 7.【檢驗方法的局限性】 未被檢出的抗 IgG抗體在某些病例中可能有臨床意義。 8.【注意事項】 上腔部分或封口處有氣泡或液滴的卡，必須在使用前離心。 濃度過高或過低的紅細(xì)胞懸液會引起異常結(jié)果。 在不規(guī)則抗體篩查、交叉配血試驗中 LISS 液可以增強抗原抗體的反應(yīng)，應(yīng)嚴(yán)格按產(chǎn)品說明書規(guī)范使用低離子液。 三、參考文獻(xiàn) .體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 年第 16 號） .2021年 9 月 .體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021年第 17 號） .2021年 9月 （ 2021年版） .化學(xué)工業(yè)出版社 四、起草單位 國家食品藥品監(jiān)督管理總局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心。 第五篇：孕酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 3 孕酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對孕酮檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。 本指導(dǎo)原則是對孕 酮檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。 本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo) 原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。 一、適用范圍從方法學(xué)考慮，在本文中孕酮檢測試劑是指采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，以競爭法為基本原理，利用全自動、半自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，在醫(yī)學(xué)實驗室對人體樣本中孕酮的含量進(jìn)行體外定量分析的試劑。依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）、《體外診斷試劑注冊管理辦法修正案》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 30 號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔 2021〕 242 號），孕酮檢測試劑管理類別為Ⅱ類醫(yī)療器械，分類編碼 為 6840。 本指導(dǎo)原則不適用于： （一）單獨申請注冊的孕酮校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。 （二）化學(xué)發(fā)光免疫分析法原理之外的其他孕酮檢測試劑。 二、注冊申報材料要求（一）綜述資料孕酮是一種重要的孕激素，屬于類固醇激素，相對分子量 ，主要由卵巢黃體和妊娠期胎盤生成，是睪酮、雌激素及腎上腺皮質(zhì)激素的前體。正常男性和女性卵泡期產(chǎn)生的孕酮水平很低，分泌入血后主要結(jié)合于白蛋白和性激素結(jié)合蛋白在體內(nèi)進(jìn)行循環(huán)。孕酮水平與黃體的發(fā)育和萎縮有關(guān)。 孕酮的主要功能是使子宮為受精卵的著床做好準(zhǔn) 備，并維持妊娠。在月經(jīng)周期的卵泡期，孕酮水平很低。排卵之后，由黃體產(chǎn)生的孕酮迅速升高，并在排卵后 5— 7 天達(dá)到濃度最大值 10ng/mL— 20ng/mL，使子宮內(nèi)膜從增生狀態(tài)轉(zhuǎn)為分泌狀態(tài)。若