【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 一性的檢測(cè)。對(duì)于需要混合使用的干細(xì)胞制劑，需對(duì)各獨(dú)立細(xì)胞來(lái)源之間細(xì)胞表面標(biāo)志物、細(xì)胞活性、純度和生物學(xué)活性均一性進(jìn)行檢驗(yàn)和控制。（4）無(wú)菌試驗(yàn)和支原體檢測(cè)應(yīng)依據(jù)現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》中的生物制品無(wú)菌試驗(yàn)和支原體檢測(cè)規(guī)程，對(duì)細(xì)菌、真菌及支原體污染進(jìn)行檢測(cè)。（5）細(xì)胞內(nèi)外源致病因子的檢測(cè)應(yīng)結(jié)合體內(nèi)和體外方法，根據(jù)每一細(xì)胞制劑的特性進(jìn)行人源及動(dòng)物源性特定致病因子的檢測(cè)。如使用過(guò)牛血清，須進(jìn)行牛源特定病毒的檢測(cè)；如使用胰酶等豬源材料，應(yīng)至少檢測(cè)豬源細(xì)小病毒；如胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞在制備過(guò)程中使用動(dòng)物源性滋養(yǎng)細(xì)胞，需進(jìn)行細(xì)胞來(lái)源相關(guān)特定動(dòng)物源性病毒的全面檢測(cè)。另外還應(yīng)檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄病毒。（6）內(nèi)毒素檢測(cè)應(yīng)依據(jù)現(xiàn)行版《中華人民共和國(guó)藥典》中的內(nèi)毒素檢測(cè)規(guī)程，對(duì)內(nèi)毒素進(jìn)行檢測(cè)。（7）異常免疫學(xué)反應(yīng)檢測(cè)異體來(lái)源干細(xì)胞制劑對(duì)人總淋巴細(xì)胞增殖和對(duì)不同淋巴細(xì)胞亞群增殖能力的影響，或?qū)ο嚓P(guān)細(xì)胞因子分泌的影響，以檢測(cè)干細(xì)胞制劑可能引起的異常免疫反應(yīng)。（8）致瘤性對(duì)于異體來(lái)源的干細(xì)胞制劑或經(jīng)體外復(fù)雜操作的自體干細(xì)胞制劑，須通過(guò)免疫缺陷動(dòng)物體內(nèi)致瘤試驗(yàn)，檢驗(yàn)細(xì)胞的致瘤性。（9）生物學(xué)效力試驗(yàn)可通過(guò)檢測(cè)干細(xì)胞分化潛能、誘導(dǎo)分化細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生理功能、對(duì)免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)能力、分泌特定細(xì)胞因子、表達(dá)特定基因和蛋白等功能，判斷干細(xì)胞制劑與治療相關(guān)的生物學(xué)有效性。對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞，無(wú)論何種來(lái)源，應(yīng)進(jìn)行體外多種類型細(xì)胞（如成脂肪細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞等）分化能力的檢測(cè)，以判斷其細(xì)胞分化的多能性（Multipotency）。對(duì)未分化的胚胎干細(xì)胞和iPS細(xì)胞，須通過(guò)體外擬胚胎體形成能力，或在SCID鼠體內(nèi)形成畸胎瘤的能力，檢測(cè)其細(xì)胞分化的多能性（Pluripotency）。除此以外，作為特定生物學(xué)效應(yīng)試驗(yàn)，應(yīng)進(jìn)行與其治療適應(yīng)證相關(guān)的生物學(xué)效應(yīng)檢驗(yàn)。（10）培養(yǎng)基及其他添加成分殘余量的檢測(cè)應(yīng)對(duì)制劑制備過(guò)程中殘余的、影響干細(xì)胞制劑質(zhì)量和安全性的成分，如牛血清蛋白、抗生素、細(xì)胞因子等進(jìn)行檢測(cè)。 放行檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)者應(yīng)根據(jù)上述質(zhì)量檢驗(yàn)各項(xiàng)目中所明確的檢驗(yàn)內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)，針對(duì)每一類型干細(xì)胞制劑的特性，制定放行檢驗(yàn)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)。放行檢驗(yàn)項(xiàng)目應(yīng)能在相對(duì)短的時(shí)間內(nèi)，反映細(xì)胞制劑的質(zhì)量及安全信息。由專業(yè)細(xì)胞檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)/實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行干細(xì)胞制劑的質(zhì)量復(fù)核檢驗(yàn)，并出具檢驗(yàn)報(bào)告。（四）干細(xì)胞制劑的質(zhì)量研究在滿足上述干細(xì)胞制劑質(zhì)量檢驗(yàn)要求的基礎(chǔ)上，建議在臨床前和臨床研究各階段，利用不同的體外實(shí)驗(yàn)方法對(duì)干細(xì)胞制劑進(jìn)行全面的安全性、有效性及穩(wěn)定性研究。 生長(zhǎng)活性和狀態(tài)生長(zhǎng)因子依賴性的檢測(cè)：在培養(yǎng)生長(zhǎng)因子依賴性的干細(xì)胞時(shí)，需對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)行為進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)，以判斷不同代次的細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)因子的依賴性。若細(xì)胞在傳代過(guò)程中，特別是在接近高代次時(shí)，失去對(duì)生長(zhǎng)因子的依賴，則不能再繼續(xù)將其視為合格的干細(xì)胞而繼續(xù)培養(yǎng)和使用。 致瘤性和促瘤性由于大多數(shù)間充質(zhì)干細(xì)胞制劑具有相對(duì)的弱致瘤性，建議在動(dòng)物致瘤性試驗(yàn)中，針對(duì)不同類型的干細(xì)胞，選擇必要數(shù)量的細(xì)胞和必要長(zhǎng)的觀察期。在動(dòng)物致瘤性試驗(yàn)不能有效判斷致瘤性時(shí)，建議檢測(cè)與致瘤性相關(guān)的生物學(xué)性狀的改變，如細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)因子依賴性的改變、基因組穩(wěn)定性的改變、與致瘤性密切相關(guān)的蛋白（如癌變信號(hào)通路中的關(guān)鍵調(diào)控蛋白）表達(dá)水平或活性的改變、對(duì)凋亡誘導(dǎo)敏感性的改變等，以此來(lái)間接判斷干細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的可能性。目前，普遍認(rèn)為間充質(zhì)干細(xì)胞“不致瘤”或具有“弱致瘤性”，但不排除其對(duì)已存在腫瘤的“促瘤性”作用。因此，建議根據(jù)各自間充質(zhì)干細(xì)胞制劑的組織來(lái)源和臨床適應(yīng)證的不同，設(shè)計(jì)相應(yīng)的試驗(yàn)方法，以判斷其制劑的“促瘤性”。 生物學(xué)效應(yīng)隨著研究的進(jìn)展，建議針對(duì)臨床治療的適應(yīng)證，不斷研究更新生物學(xué)效應(yīng)檢測(cè)方法。如研究介導(dǎo)臨床治療效應(yīng)的關(guān)鍵基因或蛋白的表達(dá)，并以此為基礎(chǔ)提出與預(yù)期的生物學(xué)效應(yīng)相關(guān)的替代性生物標(biāo)志物（Surrogate Biomarker）。應(yīng)進(jìn)行干細(xì)胞制劑在儲(chǔ)存（液氮凍存和細(xì)胞植入前的臨時(shí)存放）和運(yùn)輸過(guò)程中的穩(wěn)定性研究。檢測(cè)項(xiàng)目應(yīng)包括細(xì)胞活性、密度、純度、無(wú)菌性等。根據(jù)干細(xì)胞制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果，確定其制劑的保存液成份與配方、保存及運(yùn)輸條件、有效期，同時(shí)確定與有效期相適應(yīng)的運(yùn)輸容器和工具，以及合格的細(xì)胞凍存設(shè)施和條件。應(yīng)根據(jù)新的干細(xì)胞基礎(chǔ)及實(shí)驗(yàn)技術(shù)研究成果，針對(duì)各自干細(xì)胞制劑的特性、特定的臨床適應(yīng)證，研發(fā)新的快速檢驗(yàn)方法，用于干細(xì)胞制備過(guò)程各階段的質(zhì)量控制和制劑的放行檢驗(yàn)。應(yīng)進(jìn)行