20xx年醫(yī)學專題—流式細胞儀原理及應用(hiv)(編輯修改稿)
2024-11-15 05:37 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 八頁，共五十三頁。,光路 濾片特性(t232。x236。ng),當以 45o 角放置長通濾片時,該濾片可以通過一定波長的光,同時也可以阻斷并折射該波長以下的光 這種方式(fāngsh236。)的濾片稱為二向色性長通濾片( dichroic filter),第二十九頁，共五十三頁。,第三十頁，共五十三頁。,光學系統(tǒng),第三十一頁，共五十三頁。,電子系統(tǒng),當細胞攜帶熒光素標記物, 通過激光照射區(qū)時, 受激激發(fā), 產(chǎn)生代表細胞內(nèi)不同物質(zhì)、不同波長的熒光信號, 這些(zh232。xiē)信號經(jīng)A/D轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號, 送計算機進行儲存、 作圖、 統(tǒng)計分析,第三十二頁，共五十三頁。,發(fā)射(fāsh232。)波長,Wavelength (nm),400,450,500,550,600,650,700,1000,800,600,400,200,0,PE,FITC,PerCP,,750,第三十三頁，共五十三頁。,流式細胞儀原理(yu225。nlǐ),熒光(y237。ngguāng)信號,650nm,700nm,500nm,600nm,Relative Intensity,Wavelength (nm),550nm,第三十四頁，共五十三頁。,檢測器,Photomultiplier tube (PMT) 將光學信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娒}沖(數(shù)字(sh249。z236。)數(shù)據(jù))信號,,第三十五頁，共五十三頁。,單平臺(p237。ngt225。i)絕對計數(shù),管中預先(y249。xiān)加有準確定量的Beads 流式細胞儀獲取數(shù)據(jù)后，由各目標群的含量，可以計算出相對含量% 由各目標群與Beads的相對量計算，得到該細胞群的絕對含量 計算公式： 細胞獲取數(shù) Beads總量 細胞/?L= ?????? ? ?????? Beads獲取數(shù) 樣本量 注： Beads總量見TruCOUNT管外包裝 MultiSET系統(tǒng)中，樣本量為50 ?L,第三十六頁，共五十三頁。,單平臺絕對(ju233。du236。)計數(shù),使用(shǐy242。ng)TriTEST或MultiTEST試劑，在TruCOUNT管中完成全血的淋巴細胞絕對計數(shù) TruCOUNT管中預先加有準確定量的Beads，每批TruCOUNT管的Beads含量一致 由各目標群與Beads的相對量計算，得到該細胞群的絕對含量 使用直接熒光標記抗體組合，一步處理外周血 使用免洗技術(shù)，溶血后直接上機檢測標本 操作簡便，省時省力，計數(shù)結(jié)果重復性好,第三十七頁，共五十三頁。,淋巴細胞分析(fēnxī),使用(shǐy242。ng)特異的單克隆抗體，進行多色分析，同時分析淋巴細胞上多種抗原的表達，可以將淋巴細胞亞群區(qū)分開，進行定量分析 淋巴細胞分析 TriTEST：三色試劑CD4/CD8/CD3，CD3/CD4/CD45 MultiTEST ：四色試劑CD3/CD8/CD45/CD4 TruCOUNT：單平臺絕對計數(shù)管 報告Th,Ts,Th/Ts 百分含量%與絕對含量cells/uL,第三十八頁，共五十三頁。,TriTEST CD4/CD8/CD3,T Lymph Events CD3+CD4+ %T Lymph CD3+CD8+ %T Lymp
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