20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞術(shù)在科研中的應(yīng)用描述(編輯修改稿)
2024-11-15 05:39 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 亞G1峰的檢測：利用PI染色，檢測具有亞G1期DNA含量的細(xì)胞比例，代表凋亡細(xì)胞數(shù)。 凋亡過程中，細(xì)胞內(nèi)核酸酶的釋放，將DNA降解，分解成小的片段，在標(biāo)本制備(zh236。b232。i)中的固定處理時，細(xì)胞膜的完整性被破壞，使細(xì)胞內(nèi)降解的DNA片段從細(xì)胞內(nèi)流出，造成總體DNA含量減少，成為亞2倍體。,第二十九頁，共五十五頁。,第三十頁，共五十五頁。,第三十一頁，共五十五頁。,Date acquired: 14Jan03 File: 7Gy 4hr.001 Source: dongbo DIPLOID: 100.00 % Dip G0G1: 73.12 % at 48.16 Dip G2M: 9.59 % at 96.33 Dip S: 17.29 % G2/G1: 2.00 Dip %CV: 6.04 Apoptosis: 13.66 % Mean: 27.48,圖 FCM測試細(xì)胞(x236。bāo)周 期分布和凋亡,第三十二頁，共五十五頁。,流式細(xì)胞(x236。bāo)儀的細(xì)胞(x236。bāo)分選功能,第三十三頁，共五十五頁。,分選：,用熒光探針標(biāo)記的細(xì)胞，可被有效地分離出來， 用于分選的效率較高的儀器國內(nèi)較少，臺式機(jī)一般(yībān)分選速度為每秒鐘300個細(xì)胞， 大型機(jī)分選速度可達(dá)到每秒上萬個細(xì)胞,第三十四頁，共五十五頁。,,488 nm laser,,,,Fluorescence Activated Cell Sorting,Charged Plates,Single cells sorted into test tubes,FALS Sensor,Fluorescence detector,第三十五頁，共五十五頁。,流式分選與分子生物學(xué)研究(y225。njiū),除了將分選得到的細(xì)胞(x236。bāo)進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)研究外，F(xiàn)CM分選系統(tǒng)可為PCR、FISH等分子技術(shù)提供純度較高的特異性細(xì)胞(x236。bāo)群，減少研究中的干擾因素，獲得更準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。,第三十六頁，共五十五頁。,Cytometric Beads Array (CBA) 流式液相多重蛋白 定量(d236。ngli224。ng)技術(shù),第三十七頁，共五十五頁。,導(dǎo)言(dǎoy225。n),常規(guī)的蛋白分析方法： ELISA：一次反應(yīng)只能檢測一個指標(biāo) Western blot：不能對蛋白精確定量 不足之處： 檢測多個指標(biāo)需耗費大量樣本 分批操作導(dǎo)致組間差異大 操作繁瑣(f225。n suǒ)，耗時耗力 如何能夠從單個微量樣本中一次檢測多個目標(biāo)蛋白，并加以定量，獲得高精確度的數(shù)據(jù)呢？ 針對于此，BDPharmingen成功研發(fā)了基于流式細(xì)胞儀檢測平臺的液相多重蛋白定
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