【文章內(nèi)容簡介】 長出乳白色黏液性菌落，表面(biǎomi224。n)有蠟樣光澤，顏色由乳白、奶油轉(zhuǎn)桔黃,隱球菌的菌落特點,沙氏培養(yǎng)基：室溫或37℃培養(yǎng),34天可見菌落長出生成酵母型菌落，初呈白色，1周后轉(zhuǎn)淡黃或棕黃、濕潤粘稠，狀似膠汁,經(jīng)過2472小時培養(yǎng)； 用于鑒定新生隱球菌；,徐紅 等.中國真菌學(xué)雜志.2006 Oct。1(5):304307.,第三十二頁，共六十九頁。,鏡檢及培養(yǎng)(p233。iyǎng)的重大意義,直接鏡檢法和培養(yǎng)法是真菌學(xué)檢查(jiǎnch225。)的基本方法,直接鏡檢法簡便、快速、實用 陽性結(jié)果可提示真菌感染(gǎnrǎn) 但陽性率較低,陰性結(jié)果不能排除診斷,培養(yǎng)法： 進(jìn)一步提高檢出的陽性率 驗證直接鏡檢的結(jié)果 同時確定致病菌的種類,但所需時間較長,應(yīng)強調(diào)直接鏡檢與培養(yǎng)檢查相結(jié)合的重要性,第三十三頁，共六十九頁。,真菌(zhēnjūn)體外藥敏試驗主要方法,微量肉湯稀釋(xīsh236。)法,前10管：0.2mL氟康唑+1.8mL菌液,2mL菌液,1.8mL RPMI 1640 培養(yǎng)液,念珠菌屬35℃孵育48h 隱球菌(qijūn)孵育72h 讀取MIC結(jié)果,常量肉湯稀釋法,氟康唑：110孔分別為100μL 菌懸液： 110孔分別為100μL,200μL菌懸液,200μLRPMI湯,隱球菌35℃孵育72h 其他菌屬孵育48h 讀取MIC結(jié)果,E test法,菌懸液均勻布于藥敏板上，35℃培養(yǎng)24h讀取結(jié)果，從抑菌環(huán)與試劑條交界處可定量讀出MIC值,紙片擴(kuò)散法,菌懸液均勻涂布于藥敏板上，3537℃培養(yǎng)1824h讀取結(jié)果,讀取抑菌圈直徑,CLSI M44P(僅限于氟康唑),CLSI M44A(僅限于氟康唑和伏立康唑),第三十四頁，共六十九頁。,抗真菌藥物MIC值與臨床(l237。n chu225。nɡ)療效:9060原則,藥敏試驗敏感菌株：90%對治療有效 藥敏試驗?zāi)退幘辏?0%對治療有效 需要考慮的影響因素 藥敏可能(kěn233。ng)有誤 藥物PD/PK 宿主反應(yīng) 毒素反應(yīng),Mahmoud A.G, JCM 1996, 34:489495 Rex JH,CID 2002, 35: 982989,不能僅靠藥敏結(jié)果選擇藥物(y224。ow249。)，還應(yīng)綜合考慮其他因素,第三十五頁，共六十九頁。,小 結(jié),藥敏試驗現(xiàn)狀： 按照CLSI推薦的采用稀釋法，操作繁瑣 紙片擴(kuò)散法僅限氟康唑和伏立康唑 Etest法有較好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，價錢太貴 藥敏孵育時間因菌種而不同 選擇抗真菌藥物不能僅依靠藥敏試驗結(jié)果： 90%敏感(mǐngǎn)菌株對治療有效 60%耐藥菌株對治療有效 還需要充分考慮藥物的PK/PD等因素選擇藥物,第三十六頁，共六十九頁。,組織病理學(xué)檢查是侵襲性真菌感染的確診(qu232。zhěn)依據(jù),組織病理學(xué)檢查對于確定致病菌在組織內(nèi)寄生的情況、了解宿主的反應(yīng)十分重要 但也存在一定的局限性： 組織穿刺往往不易被患者接受 穿刺部位及所取組織量也會影響診斷結(jié)果 臨床開展受到一定的限制(xi224。nzh236。) 有待進(jìn)一步提高其敏感性,文興東.亞太傳統(tǒng)(chu225。ntǒng)醫(yī)藥.2012。8(5):219220,第三十七頁，共六十九頁。,組織(zǔzhī)病理切片特征,肺組織(zǔzhī)中的曲霉菌絲,肺組織(zǔzhī)中的曲霉菌分生孢子頭,食道念珠菌病患者的組織切片，可見假菌絲和芽生孢子,第三十八頁，共六十九頁。,G試驗(sh236。y224。n)的原理和臨床價值,G試驗檢測底物：(13)?D葡聚糖(真菌細(xì)胞壁成分50%) G試驗的原理：鱟試驗：級聯(lián)凝固反應(yīng) G試驗可檢測念珠菌、毛孢子菌、曲霉、鐮刀霉、支頂孢霉、卡氏肺孢子菌，不能檢測隱球菌、接合菌 G試驗的臨床價值： G試驗?zāi)壳?m249。qi225。n)主要用于侵襲性念珠菌和曲霉感染的診斷、高危人群的監(jiān)測以及對療效、預(yù)后的評價 G試驗對于區(qū)分確診或擬診侵襲性真菌感染與非侵襲性真菌感染患者，有良好的準(zhǔn)確性 連續(xù)檢測可動態(tài)反應(yīng)真菌感染程度和抗真菌治療療效,K?dzierska A, et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2007,26:755.,第三十九頁，共六十九頁。,GM試驗(sh236。y224。n)的臨床價值,GM試驗檢測底物：曲霉細(xì)胞壁成分半乳甘露聚糖(菌絲在組織生長過程中釋放) GM試驗可檢測曲霉菌屬、隱球菌屬和青霉/擬青霉 GM試驗的臨床價值： GM試驗?zāi)壳爸饕糜谇忠u性曲霉感染的診斷、早期、快速、特異性高 半乳甘露聚糖水平的動態(tài)變化反應(yīng)(fǎny236。ng)抗真菌藥物療效，指導(dǎo)抗真菌藥物使用 推薦用于惡性血液腫瘤患者和造血干細(xì)胞移植患者，不推薦用于實體器官移植(SOT)患者,美國(měi ɡu243。)FDA于2003年批準(zhǔn)將檢測血清曲霉GM抗原作為侵襲性曲霉感染的診斷指標(biāo),呂沛華, 等.中國感染與化療雜志.2006。6(4):284287,第四十頁，共六十九頁。,乳膠凝集試驗檢測底物：新型隱球菌莢膜多糖抗原 乳膠凝集試驗的原理：以乳膠顆粒作為載體的一種間接凝集試驗。即吸附新型隱球菌莢膜多糖抗原于其表面，特異性抗體與之結(jié)合后，產(chǎn)生凝集反應(yīng) 乳膠凝集試驗可檢測新型隱球菌 乳膠凝集試驗的臨床價值： 作為隱球菌病的確診標(biāo)準(zhǔn)，其敏感性和特異性高 國外研究其靈敏度和特異度為93％～100% ，國內(nèi)報道其靈敏度和特異度均為100％ 抗原滴度與疾病轉(zhuǎn)歸呈正相關(guān)，可指導(dǎo)治療(zh236。li225。o)與判斷預(yù)后,乳膠(rǔjiāo)凝集試驗的原理和臨床價值,陰性(yīnx236。ng),陽性,第四十一頁，共六十九頁。,結(jié)果陽性的判定在無菌部位(b249。w232。i)和帶菌部位(b249。w232。i)意義不同,直接(zh237。jiē)鏡檢法,在無菌體液的直接鏡檢中發(fā)現(xiàn)真菌?？纱_立(qu232。l236。)深部真菌病的診斷,但在有菌部位只有發(fā)現(xiàn)大量真菌菌絲才具有診斷意義,培養(yǎng)檢查法,培養(yǎng)出肯定的致病菌如新生隱球菌或組織胞漿菌時,可確立感染的存在,如果分離出條件致病菌如白念珠菌或煙曲霉菌時,應(yīng)結(jié)合臨床情況進(jìn)行判斷,從無菌部位如血液或腦脊液中分離出條件致病菌常提示肯定的感染,但對來自于膿、痰或尿的標(biāo)本則應(yīng)謹(jǐn)慎解釋結(jié)果,單靠一次培養(yǎng)陽性往往不能確定診斷,第四十二頁，共六十九頁。,內(nèi)容提要(n232。i r243。nɡ t237。 y224。o),1.三種(sān zhǒnɡ)重要的病原真菌的生物學(xué)特性,2.三種重要的病原真菌(zhēnjūn)的致病特點,3. 三種重要的病原真菌的實驗室檢查,4.三種重要的病原真菌的流行病學(xué)特征,第四十三頁，共六十九頁。,了解真菌流行病學(xué)非常(fēich225。ng)重要—經(jīng)驗性治療的依據(jù),由于早期無法獲得真菌培養(yǎng)結(jié)果，通常需要在缺乏確切證據(jù)的情況下進(jìn)行經(jīng)驗性治療 了解真菌流