蛋白質(zhì)的分離純化(編輯修改稿)
2024-11-04 05:30 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 物作用機(jī)理； ——在實(shí)踐上，可以為治療人類和畜禽傳染病而設(shè)計(jì)療效更高的抗菌抗病毒藥物；為消滅農(nóng)作物病蟲(chóng)害而設(shè)計(jì)更有效的殺蟲(chóng)劑和殺菌劑；為解除(jiěch)毒物對(duì)人畜的中毒而設(shè)計(jì)快速有效解毒藥物。,第二十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。,㈠ 抑制程度(ch233。ngd249。)的兩種表示方法,★相對(duì)活力(hu243。l236。)分?jǐn)?shù),★相對(duì)(xiāngdu236。)活力百分?jǐn)?shù) a% = V1/ V0 100(%),抑制率,★抑制分?jǐn)?shù),★抑制百分?jǐn)?shù) i% = (1a) 100(%),相對(duì)活力,第二十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。,不可逆的抑制作用 抑制劑與酶活性中心〔外〕的必需基團(tuán)共價(jià)結(jié)合(ji233。h233。)， 使酶的活性下降，無(wú)法用透析、超濾等物理方法除 去抑制劑而使 酶復(fù)活。 可逆的抑制作用 抑制劑與酶蛋白非共價(jià)鍵結(jié)合，可以用透折、超濾 等物理方法除去抑制劑而使 酶復(fù)活。,㈡抑制作用的類型(l232。ix237。ng),第二十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,⑴競(jìng)爭(zhēng)性抑制(y236。zh236。)〔Competitive inhibition〕,抑制劑具有與底物類似的結(jié)構(gòu)(ji233。g242。u)，競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，并與酶形成可逆的EI復(fù)合物，阻止底物與酶結(jié)合。 可以通過(guò)增加底物濃度而解除此種抑制。 P369 丙二酸、戊二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制,第二十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。,競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制(y236。zh236。)圖示,第二十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,競(jìng) 爭(zhēng) 性 抑 制,第三十頁(yè)，共六十七頁(yè)。,⑵非競(jìng)爭(zhēng)性抑制(y236。zh236。) 〔noncompetitive inhibition〕,底物和抑制劑可以同時(shí)與酶結(jié)合，但是，中間的三元復(fù)合物ESI不能進(jìn)一步分解為產(chǎn)物，因此，酶的活性降低。 抑制劑與酶活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合，其結(jié)構(gòu)可能與底物無(wú)關(guān)。 不能通過(guò)(tōnggu242。)增加底物的濃度的方法來(lái)消除非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 某些重金屬離子對(duì)酶的抑制屬于非競(jìng)爭(zhēng)性抑制：Cu2+、Hg2+、Pb2+,第三十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。,非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制(y236。zh236。)圖示,第三十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。,非 競(jìng) 爭(zhēng) 性 抑 制,第三十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。,酶只有(zhǐyǒu)在與底物結(jié)合后，才能與抑制劑結(jié)合。E+S→ES+I →ESI≠ P 常見(jiàn)于多底物的酶促反響中,⑶ 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制(y236。zh236。),第三十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。,通過(guò)透析、超濾、凝膠過(guò)濾等 通過(guò)VE速度曲線(qūxi224。n) P370 圖918 圖919 通過(guò)可逆抑制劑的動(dòng)力學(xué)曲線可以區(qū)分三種可逆抑制作用,㈢可逆抑制作用與不可逆抑制作用的鑒別(ji224。nbi233。),第三十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。,㈣可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué),第三十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。,第三十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué)特征(t232。zhēng)1,1. 競(jìng)爭(zhēng)性抑制 參加(jiār249。)競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后，Km 變大，酶促反響速度減小。,無(wú)抑制劑,競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,1/Vmax,第三十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。,★Vmax不變 ★Km變大，而且隨[I]濃度(n243。ngd249。)的增大而增大,第三十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用小結(jié)： 〔1〕 Vmax不變，Km變大。 〔2〕抑制程度決定(ju233。d236。ng)于[I]、[S]、Km和Ki A. 抑制程度與[I]成正比，與[S]成反比 [I]一定，增加[S]，可減少抑制程度。 [S]一定，增加[I]，可增加抑制程度。 B. 在一定[I]和[S]下， Ki越大，抑制作用越小，Km值愈大，抑制程度愈大。,第四十頁(yè)，共六十七頁(yè)。,2.非競(jìng)爭(zhēng)性抑制(y236。zh236。) 參加非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后，Km 雖然不變，但由于Vmax減小，所以酶促反響速度也下降了。,無(wú)抑制劑,非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,1/km,可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué)特征(t232。zhēng)2,第四十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。,★Km不變，Vmax降至Vmax/〔1+[I]/Ki〕,第四十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。,非競(jìng)爭(zhēng)性抑制小結(jié)： 〔1〕 Km不變，Vm
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