【文章內容簡介】 照自己的代謝方式進行新陳代謝活動。正常情況下，同化作用大于異化作用，微生物的細胞質量不斷迅速增長，稱為生長。63）微生物的發(fā)育：從生長到繁殖這個由量變到質變的過程叫發(fā)育 64）代時：細菌兩次細胞分裂之時的時間。65）生長曲線：66)微生物的生存因子：微生物除了需要營養(yǎng)外，還需要環(huán)境中合適的生存因子，例如：溫度，PH，氧化還原電位，溶解氧，太陽輻射，活度與滲透壓，表面張力等。67)根據微生物對溫度的最適生長需求，可將微生物分為4大類：嗜冷菌，嗜中溫菌，嗜熱菌及嗜超熱菌。68)大多數細菌，他們對PH的適應范圍為410。69)任何兩種濃度的溶液被半滲透膜隔開，均會產生滲透壓。70)微生物之間的關系：微生物之間的關系有種內的關系和種間的關系。相同種內的關系有競爭和互助。不同種間關系有6種，競爭關系，原始合作關系，共生關系，偏害關系，捕食關系，寄生關系。71)競爭關系：競爭關系是指不同的微生物種群在同一環(huán)境中，對食物等營養(yǎng)，溶解氧，空間和其他共同要求的物質互相競爭，互相收到不利影響。72)原始合作關系：原始合作關系是指兩種可以單獨生活的生物共存于同一環(huán)境中，相互提供營養(yǎng)及其他生活條件，雙方互為有利，相互受益。當兩者分開時各自可單獨生存。73)共生關系：共生關系是指兩種不能單獨生活的微生物共同生活于同一環(huán)境中，各自執(zhí)行優(yōu)勢的生理功能，在營養(yǎng)上互為有利而所組成的共生體，這兩者之間的關系就叫共生關系。74)偏害關系：共存于同一環(huán)境的兩種微生物，甲方對乙方有害，乙方對甲方無任何影響。一種微生物在代謝過程中產生一些代謝產物，其中有的產物對一種（或一類）微生物生長不利，或者抑制或者殺死對方。上述這種微生物與微生物之間的對抗關系叫偏害關系。分非特異性偏害和特異性偏害。75)捕食關系：有的微生物不是通過代謝產物對抗對方，而是吞食對方，這種關系稱為捕食關系。76)寄生關系：一種生物需要在另一種生物體內生活，從中社區(qū)營養(yǎng)才得以生長繁殖，這種關系成為寄生關系。77)微生物在土壤中的分布：土壤中微生物的類群、數量與分布，由于土壤質地發(fā)育母質、發(fā)育歷史、肥力、季節(jié)、作物種植狀況、土壤深度和層次等等不同而有很大差異。土壤微生物中細菌最多，作用強度和影響最大，放線菌和真菌類次之，藻類和原生動物等數 量較少，影響也小。土壤中微生物的水平分布取決于碳源。土壤中微生物的垂直分布與紫外輻射的照射，營養(yǎng)，水，溫度等因素有關。78)遺傳和變異是一切生物最本質的屬性。79)遺傳有保守性，是微生物在它的系統發(fā)育過程中形成的系統。80)遺傳可改變的一面是變異81)遺傳是相對的，變異是絕對的。82)遺傳和變異的物質基礎DNA：P203 83)基因突變：基因突變即微生物的DNA被某種因素引起堿基的缺失，置換或插入，改變了基因內部原有的堿基排列順序，從而引起其后代表現型的改變。當后代突然變現和親代顯然不同的，能遺傳的性狀時，就稱為突變。84)自發(fā)突變：自發(fā)突變是指某種微生物的自然條件下，沒有人工參與而發(fā)生的基因突變。原因有多因素低劑量的誘變效應，互變異構效應。85)誘發(fā)突變：誘發(fā)突變是利用物理或化學的因素處理微生物群體，促使少數個體細胞的DNA分子結構發(fā)生變化，在基因內部堿基配對發(fā)生錯差，引起微生物的遺傳性狀發(fā)生突變。分物理誘變，化學誘變，復合處理及其協同效應，定向培育和馴化。86)基因重組：兩個不同形狀個體細胞的DNA融合，使基因重新組合，從而發(fā)生遺傳變異，產生新品種，此過程稱為基因重組。87)雜交。雜交是通過雙親細胞的融合，使整套染色體的基因重組；或者是通過雙親細胞的溝通，使部分染色體基因重組。88)轉化：受體細胞直接吸收來自供體細胞的DNA片段，并把它整合到自己的基因組里，從而獲得了供體細胞部分遺傳性狀的現象，成為轉化。89)轉導。通過溫和噬菌體的媒介作用，把供體細胞內特定的基因攜帶至受體細胞中，使后者獲得前者部分遺傳性狀的現象，稱為轉導。90)質粒：質粒在原核微生物中除有染色體外，還含有另一種較小的，攜帶少量遺傳基因的環(huán)狀DNA分子，稱為質粒，也叫染色體外DNA。質粒在基因工程中常被用作基因轉移的運載工具載體。91)基因工程：基因工程是指在基因水平上的遺傳工程，又叫基因剪接或核酸體外重組。基因工程是用人工方法把所需要的某一供體生物的DNA提取出來，在離體的條件下用限制性內切酶將離體DNA切割成帶有目的的基因的DNA片段，每一段平均長度有幾千個核苷酸，用DNA連接酶把它和質粒的DNA分子在體外連接成重組DNA分子，然后將重組體導入某一受體細胞中，以便外來的遺傳物質在其中進行復制，擴增和表達，再進行重組體克隆的篩選和鑒定；最后對外源基因表達產物進行分離提純，從而獲得新品種。92)基因工程操作分5步：1先從供體細胞中選擇獲取帶有目的基因的DNA片段（基因分離）； 2將目的DNA的片段和質粒在體外重組；（體外重組）3將重組體轉入受體細胞（載體傳遞）；4重組體克隆的篩選與鑒定（復制表達）；5外源基因表達產物的分離與提純（篩選，繁殖）93）天然淡水水體是人類生活和工業(yè)生產用水的水源，也是水生動物和植物生長繁殖的場所。94）水體自凈過程。1有機污染物排入水體后被水體稀釋，有機和無機固體物沉降至河底。2水體中好氧細菌利用溶解氧把有機物分解為簡單有機物和無機物，并用以組成自身有機體，水中溶解氧急速下降至零，此時魚類絕跡，原生動物，輪蟲，浮游甲殼動物死亡，厭氧細菌大量繁殖，對有機物進行厭氧分解。3水體中溶解氧在異樣菌分解有機物時被消耗，大氣中的氧剛溶于水就被迅速用掉，盡管水中藻類在白天進行光合作用放出氧氣，但復氧速率小于耗氧速率，氧垂曲線下降。在最缺氧點，有機物的耗氧速率等于河流的復氧速率。再往下游的有機物減少，復氧速率大于耗氧速率，氧垂1曲線上升。如果河流不再被有機物污染，河水中溶解氧恢復到原來的水平，甚至達到飽和。4隨著水體的自凈，有機物缺乏和其他原因（例如陽光照射，溫度，PH變化，毒物及生物的抗?jié)嵶饔玫龋┦辜毦劳?。據測定，細菌死亡數大約為80%90%.95）碳循環(huán)：96）脂質的轉化：P274 97）氮循環(huán)：P278 98）顯微鏡的分辨率：指顯微鏡能分辨出物體兩點間的最小距離分辨力=采用目鏡為16X，物鏡為40/， 解：分辨率=：.=λ=分辨率=（）=不可分辨第四篇：微生物學實驗報告微 生 物 學 實 驗 報 告（格式標準）(生命科學專業(yè))教 師：黎 勇目錄索引實驗一 油鏡的使用和細菌的簡單染色法 3實驗二 細菌的革氏染色與芽孢染色 5實驗三 常用培養(yǎng)基的配制 7實驗四 酵母菌霉菌的形態(tài)結構觀察及酵母死活細胞的鑒別 8實驗五、微生物大小的測定與顯微計數 10實驗六 環(huán)境中微生物的檢測和分離純化 11實驗七 細菌鑒定中常用的生理生化反應 12實驗八（綜合實驗）化能異養(yǎng)微生物的分離與純化 13課程名稱： 微生物學實驗班級：化生系生命科學本科實驗日期：指導教師：黎勇 實驗一 油鏡的使用和細菌的簡單染色法〔目的要求〕學習并熟練掌握油鏡的使用技術；觀察細菌的基本形態(tài)；學習觀察細菌的運動性的基本方法。〔基本原理〕178。A=n178。sinα=λ/，但有效放大率取決于鏡口率。已經分辨的物體不放大看不清，未分辨物放得再大也看不清。，可以通過真運動能定向地由一處快速運動來區(qū)別于顆粒的布朗運動?！财鞑挠镁摺筹@微鏡、載玻片、凹玻片、蓋玻片、接種環(huán)、香柏油、二甲苯、凡士林、吸水紙、擦鏡紙；細菌、放線菌等固定裝片；；無菌水、生理鹽水?！卜椒ú襟E〕：（一）油鏡的使用鏡檢裝片在中倍（或高倍鏡）下找到目的物，并使位于視野正中聚光鏡上升到最高位置，虹彩光圈開到最大，鏡頭轉開成八字形在玻片的鏡檢部位（光斑處）滴一滴香柏油油鏡轉入正下方側視小心上升載物臺（縮短鏡頭與裝片距離，鏡頭浸入油中，至油圈不擴大為止鏡頭幾與裝片接觸）粗調器徐徐下降載物臺（密切注視視野，當捕捉到物像時，立即用細調器校正）仔細觀察并繪圖取出裝片，清洗油鏡：擦鏡紙拭去鏡頭上的香柏油擦鏡紙沾少許二甲苯擦去殘留（用手指輔助，迅速拭擦一、二次）用清潔擦鏡紙仔細擦干二甲苯（23次）。（二）細菌的簡單染色法：涂片干燥火焰固定染色水洗干燥油鏡觀察（三）細菌運動性的觀察 取潔凈蓋玻片，四周涂上凡士林滴加一小滴菌懸液凹玻片的凹窩向下蓋于蓋玻片上翻轉觀察〔結果分析〕畫一圓圈表示視野，選取所觀察的微生物繪圖，注意特殊結構、形狀和排列。（描繪時按視野實際大小5－10倍繪制）菌名：大腸桿菌菌名：金黃色葡萄球菌放大倍數：100179。10（179。5）放大倍數：100179。10（179。5）特殊結構：無 特殊結構：無視野觀察下微生物的形態(tài)油鏡使用時為什么必須干燥裝片？防止水油分層，光受到折射而影響油鏡性能的發(fā)揮〔實驗討論〕首次實驗中有幾個要點：一是按無菌操作取用菌；二是涂片技術的掌握；三是油鏡使用技術。凡實驗中學生的所思所想，如無菌操作技術要點、自行處理實驗材料、失敗與思考等均可進行討論（如涂片時蒸餾水不宜過多、取用菌時防止菌被灼燙變形、取菌宜少不宜多等均是可以討論的內容）。實驗二 細菌的革氏染色與芽孢染色〔目的要求〕觀察細菌菌落的特征；掌握簡單染色法、革蘭氏染色法的原理及操作步驟；在油鏡下觀察細菌個體形態(tài)；學習環(huán)境中微生物的檢查方法，并加深對微生物分布廣泛性的認識〔器材用具〕（18－24小時）以及菌落平板各一個；染液：草酸銨結晶紫、劃蘭氏染液、盧戈氏碘、95%的乙醇、蕃紅；無菌水、顯微鏡、載片、濾紙、液體石蠟是、擦鏡紙、接種環(huán)。〔方法內容〕：（一）實驗室環(huán)境中微生物的檢查（二）革蘭氏染色法 涂片固定冷卻結晶紫染色1min 水洗碘媒染1min 95%乙醇3060s 水洗番紅復染2－3min水洗干燥油鏡鏡檢（三）芽孢染色 涂片固定孔雀綠加熱染色（勿干）5min 水洗番紅復染1min水洗鏡檢〔結果分析〕實驗結果被染成紫色者即為革蘭氏陽性，被染成紅色者為革蘭氏陰性；菌體染成紅色，芽孢被染成綠色。菌名：大腸桿菌菌名：金黃色葡萄球菌放大倍數：100179。10（179。5）放大倍數：100179。10（179。5）染色反應：紅色（陰性）染色反應：紫色（陽性）菌名：枯草芽孢桿菌放大倍數：100179。10（179。5）染色反應：紫色（陽性）圖1 視野觀察下細菌的革蘭氏染色反應圖2 枯草芽孢桿菌芽孢形態(tài)圖〔實驗討論〕嚴格掌握脫色程度，是成敗的關鍵。若脫色時間過度，則陽性菌初時之紫色脫出，復染成紅色，誤成陰性，反之脫色時間不足，陰性菌在初染時的紫色未能脫出，復染時不能染成紅色，誤以為陽性菌；涂片不能厚；盧弋氏碘即用即配。作業(yè)繪出所觀察到到細菌的視野圖，并說明染色反應。哪些因素會影響到革蘭氏染色結果的正確？其中是關鍵的一步是什么？ 菌齡及培養(yǎng)條件和染色技術是最主要的，關鍵是脫色。怎樣對未知菌進行革蘭氏染色，以證明你的結果的正確？與已知菌混合涂片比較。實驗三 常用培養(yǎng)基的配制〔目的要求〕了解培養(yǎng)基的配制原理；了解培養(yǎng)基常規(guī)配制程序；了解培養(yǎng)基過程各環(huán)節(jié)的要求和注意事項。了解半合成培養(yǎng)基的配制原理，學習掌握肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基的配制方法?！财鞑挠镁摺车扰涓鞣N培養(yǎng)基的組成成分，瓊脂、1N NaoH溶液 1N HCl天平或臺秤高壓蒸汽滅菌鍋、移液管、試管、燒杯、量筒、錐形瓶、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。藥匙、稱量紙、pH試紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙報紙等?！卜椒ú襟E〕(一)玻璃器皿的洗滌和包裝 以小組為單位清洗、控水，按9個為一組，分別用報紙包好并放入烘箱中等待滅菌。(二)液體及固體培養(yǎng)基的配制過程原料稱量（按配方次序）溶解調節(jié)ｐH 過濾澄清分裝塞棉塞和包札滅菌分別按教材配方配制牛肉膏蛋白胨、馬鈴薯液體及固體培養(yǎng)基。(三)培養(yǎng)基的分裝 用玻璃漏斗，橡皮管，小玻璃管及彈簧夾制作分裝裝置選用15179。150平口試管或150mL錐形瓶貼上標簽分裝（至試管高度1/41/3，斜面制作用1/5，半固體用1/3）要求：每人制作斜面3支。其余分裝至錐形瓶中。(四)棉塞的制作及試管、錐形瓶的包扎 分別制作試管及錐形瓶棉塞并塞好好以牛皮紙包裝頭部。(五)培養(yǎng)基的滅菌 培養(yǎng)基用濕熱法滅菌；皿用干熱法分別滅菌。(六)斜面和平板的制作（下次試驗完成）(七)培養(yǎng)基的無菌檢查（下次實驗完成）(八)無菌水的制備 同時制作無菌生理鹽水，置錐形瓶中備用?！步Y果分析〕以斜面接種培養(yǎng)驗證培養(yǎng)基配制效果；以平板制作及接種24小時培養(yǎng)驗證滅菌效果；簡述移液管包裝的注意事項?！矊嶒炗懻摗硿缇鞯臏缇Ч仨氶g隔一段時間，加以驗證，主要方法除無菌檢查外，還通過壓力試紙同時滅菌來驗證其壓力與溫度；培養(yǎng)基通常成批制作備用。但制作后，其貯藏時間有一定限制，一般室溫條件下不超過三周；冰箱4℃條件下可貯藏半年，過期不能用。作業(yè)：記錄培養(yǎng)基的成分和名稱分析所配制培養(yǎng)基的碳源、氮源、能源及無機鹽、維生素的來源。所配制均為天然培養(yǎng)基，各成分主要來自有機質，微量元素可以由自來水提供。什么是天然培養(yǎng)基？什么是半合成、合成培養(yǎng)基？實驗四 酵母菌霉菌的形態(tài)結構觀察及酵母死活細胞的鑒別〔目的要求〕觀察并掌握酵母菌霉菌的菌落特征、個體形態(tài)、生長及繁殖方式。學習酵母死活細胞的鑒別方法?！膊牧嫌镁摺翅劸平湍?、紅酵母、假絲酵母；(釀酒酵母和紅酵母菌落平板各一個。釀酒酵母豆芽汁斜面及釀酒酵母醋酸鈉斜面各一支，假絲酵母加蓋片培養(yǎng)的平板)；%孔雀綠染液，%蕃紅染液，蘇丹黑染液，二甲苯，中性紅染液，碘液；目鏡測微尺、鏡臺測微尺；載片及蓋片。〔方法步驟〕(一)菌落特征的觀察(二)個體形態(tài)與出芽(三)子囊孢子的觀察(四)酵母死活細胞的觀察?！步Y果分析〕描述釀酒酵母霉菌的菌落形態(tài)特征；繪圖釀酒酵母的菌體、出芽方式及細胞細節(jié)；（一）酵母的菌落濕潤，大而隆起，