【文章內(nèi)容簡介】 確度 計算，按檢測報告要求填出相應(yīng)數(shù)據(jù) 標準操作： 測定結(jié)果精密度計算（ 極差 ； 平均值 ； 極差與平均值之 比值）， 測定結(jié)果準確度計算（平均值；平均值與對照值（測量值）之差； 10 0%?? 對照值平均值－對照值rE ， 按檢測報告要求填出相應(yīng)數(shù)據(jù)， 計算結(jié)果保留二位有效數(shù)字。 標準溶液配制 考核技能要點： 標準物質(zhì) 稱量、溶液配制 標準操作： 鋅 標準物質(zhì)稱量 ； 鹽酸溶解 ； 水浴蒸干；溶液定容； 溶液轉(zhuǎn)移 原子吸收分光光度計儀器的使用 考核技能要點： 開機、參數(shù)設(shè)置、關(guān)機 標準操作： 開機 ①打開乙炔鋼瓶主閥 ② 打開空壓機電源 ③ 打開主機電源④打開操作軟件，進行聯(lián)機自檢 參數(shù)設(shè)置： ①光學(xué)參數(shù)設(shè)置（波長、狹縫、點等方式、燈電流）②重復(fù)測定條件③測定參數(shù)④工作曲線參數(shù)⑤燃燒器、氣體流量參數(shù) 關(guān)機 20 ①退出軟件，關(guān)閉電腦 ②關(guān)閉 乙炔鋼瓶主閥 ②關(guān)閉 空壓機電源 ③關(guān)閉 主機電源 定量測定 考核技能要點： 點火前的準備工作、機器預(yù)熱 標準操 作： 點火前的準備工作 ①確認乙炔已供給 ② 確認空氣已供給 ③ 確認排風(fēng)系統(tǒng)處于工作狀態(tài) 點火 吸引純凈水，觀測火焰 預(yù)熱 15 分鐘 開始測定樣品 數(shù)據(jù)處理 考核技能要點： 數(shù)據(jù)參數(shù)的設(shè)置 標準操作： 測定參數(shù)設(shè)置，工作曲線參數(shù)設(shè)置，標準品參數(shù)設(shè)置，樣品組參數(shù)設(shè)置 檢測報告生成 考核技能要點： 報告生成 標準操作： 打開文件菜單下報告打印類型，設(shè)置打印內(nèi)容 （①譜線搜索圖②儀器參數(shù)③測定數(shù)據(jù)④工作曲線），保存報告，打印檢測報告 （二）食品 中有機磷農(nóng)藥殘留量檢測 本 賽 項 包括兩部分內(nèi)容： 氣相色譜法測定食品中有機磷農(nóng) 藥殘留 和 GCMS 虛擬軟件仿真測定 食品中有機磷農(nóng)藥殘留 。 操作規(guī)程參照 SN/T 01482021《 進出口水果蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量21 檢測方法 氣相色譜和氣相色譜 質(zhì)譜法 》。 1. 氣相色譜法測定食品中有機磷農(nóng)藥殘留（水果或根莖類蔬菜） 選擇 2 種有機磷農(nóng)藥為測定對象。 大賽 統(tǒng)一準備空白樣品，并 測定標樣譜圖 。比賽中每位選手需做 兩 份平行加標樣品（加標操作由一名裁判使用一把移液槍、一份標準溶液統(tǒng)一完成）。 其它試劑均由競賽組委會配制。 競賽中提供的玻璃器皿均潔凈干燥，無需再洗滌。 樣品前處理 （ 1） 樣品制備 考核 技能要點：取樣，樣品制備，樣品存放 標準操作：從具代表性樣品中取可食部分一定質(zhì)量，用搗碎機全部磨碎混合均勻，裝入潔凈、干燥的容器中。 （ 2） 提取 考核技能要點：天平選擇和使用，均質(zhì)，離心，固體試劑稱取和加入，提取液轉(zhuǎn)移，氮吹濃縮 標準操作：稱取均質(zhì)試樣 10 g（精確至 g），置于 50 mL玻璃離心管中，加入 10 mL 乙腈溶液，高速均質(zhì) 2 min，再加入約 4 g 無水硫酸鎂和 1 g 氯化鈉，蓋上塞子劇烈振蕩 2 min 后，以 4000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心 4 min，取出乙腈層裝入另一 50 mL 離心管，用 10 mL 乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液。提取液中加入1 g 無水硫酸鎂，劇烈振蕩，以 4000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心 1 min，移出上清液置于 25 mL 刻度試管中，氮吹（ 45 ℃ ） 近干，準確加入 mL 乙腈溶解提取物（對參考標準稍作改動） 。 （ 3） 凈化 22 考核技能要點：固相萃取柱活化、上樣、洗脫 標準操作：固相萃取柱置于裝置上，先用 5 mL 丙酮 甲苯混合 溶劑 淋洗，流速保持為 1 mL/min。提取液加入固相萃取柱，再用 10 mL 丙酮 甲苯混合 溶劑洗脫，收集全部洗脫液于 10 mL玻璃刻度試管中，置于 40 ℃ 下氮吹至 近 mL，用乙酸乙酯定容至 mL，待測。 上機操作 考核技能要點：氣相色譜開關(guān)機（在打印出的結(jié)果單上以文字敘述）、參數(shù)設(shè)定（進樣口溫度、柱溫、檢測器溫度、進樣量、進樣方式）、進樣序列、生成并打印報告單。 數(shù)據(jù)處理 （ 1） 定性分析 考核技能要點：識譜 標準操作： 確定譜圖中 色譜峰對應(yīng)成分名稱 ，標出保留時間和峰面積。 （ 2） 定量分析 考核技能要點：標準曲線制備、含量計算、加標回收率計算、相對標準偏差計算、數(shù)值修約、單位標注 標準操作： 以組委會提供的標樣譜圖（ 5 點）制備標準曲線，標出曲線 方程； 計算 3 份加標樣品中測得的各組分含量，求平均值； 以理論計算 實際 加標量計算加標回收率 ： 加標 回收率 (%)=[(加標測定量 平均值 樣品測定量 平均值 )/實際加標量 ] 100% 23 相對標準偏差： 計算結(jié)果均保留 2 位有效數(shù)字； 單位： mg/kg。 2. GCMS 虛擬軟件仿真測定食品中有機磷農(nóng)藥殘留 考核技能要點： 標準溶液配制 、 方法建立 、 儀器操作 （開關(guān)機、樣口溫度、柱溫、檢測器溫度、進樣量、進樣方式、離子源溫度、接口溫度、序列設(shè)置）、 定性分析 （ 識譜）、 定量分析 （制備標準曲線、樣品濃度計算）、 報告生成 （三）食品中微生物檢測（乳或肉） 1． 食品中菌落總數(shù)的檢測 考核技能要點 ： （ 1） 菌落總數(shù)檢測的依據(jù) （ 2） 梯度稀釋 （ 3） 傾注法倒平板 （ 4） 菌落總數(shù)的計數(shù)規(guī)則 （ 5） 原始記錄 （ 6） 檢測報告 標準操作： （ 1） 樣品的稀釋 ① 以無菌吸管吸取 25 mL 樣品于盛有 225 mL 生理鹽水的無菌錐形瓶，充分混勻，制成 1:10 的樣品勻液。 ② 用 1 mL 無菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1 mL，沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 稀釋液的無菌試管中，振搖試管使 其混勻，制成1( ) 100%1iin XX SS R SDn X?? ? ??24 1:100 的稀釋液。 ③ 按 ② 操作程序，制備 10 倍稀釋樣品勻液，每遞增稀釋一次，換用一次 1 mL 滅菌吸管。 ④ 選擇 3 個適宜稀釋度的樣品勻液，每個稀釋度分別吸取 1 mL 樣品勻液加入兩個無菌培養(yǎng)皿內(nèi) ， 同時做空白對照。 ⑤ 及時將 15～ 20 mL 冷卻至 46 ℃ 的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于恒溫水浴鍋中保溫）傾注到培養(yǎng)皿中，并轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿使其混合均勻。 （ 2） 培養(yǎng) 待培養(yǎng)基凝固后，翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，置 36 177。 1 ℃ 恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24 177。 1 h。 （ 3） 菌落計數(shù) 按照 中規(guī)定的菌落計數(shù)方法進行菌落計數(shù)，并規(guī)范做好原始記錄。 （ 4） 檢測結(jié)果報告 正確填寫檢測報告。 2. 革蘭氏染色及菌株形態(tài)鑒定 考核技能要點 ： （ 1） 細菌涂片 （ 2） 革蘭氏染色 （ 3） 使用普通光學(xué)顯微鏡 （ 4） 判斷菌株形態(tài)及 G＋或 G－ 標準 操作 ： （ 1） 制片 25 在酒精燈旁，選取一個計數(shù)后的菌落總數(shù)平板，挑取菌落在一塊載玻片上進行涂片、干燥和固定。 （ 2） 染色 進行初染、媒染、脫色及復(fù)染。 （ 3） 鏡檢 使用普通光學(xué)顯微鏡，進行鏡檢并觀察。 （ 4） 菌株形態(tài)鑒定 根據(jù)油鏡所觀察到菌 株的細胞形態(tài)及革蘭氏染色后的顏色，鑒定菌株形態(tài)，判斷是 G＋還是 G－，并正確填寫菌株鑒定報告。 3. “致病菌的生化及分子生物學(xué)鑒定 ”虛擬仿真軟件的操作 考核技能要點 ： （ 1） 菌種分離篩選 （ 2） 目標菌的培養(yǎng)條件及方法 （ 3） 目標菌生化鑒定材料的選取、實驗原理及結(jié)果判斷 （ 4） 基因組 DNA 提取、 PCR、電泳及結(jié)果分析 標準 操作 ： （ 1） 致病菌的檢測過程（前增菌、分離、培養(yǎng)） 根據(jù)任務(wù)要求，利用仿真軟件選擇各個過程所需材料和試劑，完成菌種鑒定的前處理過程 : ① 樣品獲取與制備 ② 選擇合適增菌培養(yǎng)基 ③ 根據(jù)目標菌選 取篩選培養(yǎng)基，并分區(qū)劃線或稀釋涂布平板分離單菌落；并根據(jù)單菌落形態(tài)特征確定疑似目標菌 ④ 將目標菌選用合適培養(yǎng)基擴大培養(yǎng) 26 （ 2） 生化鑒定 根據(jù)任務(wù)要求，利用仿真軟件選擇目標菌生化鑒定應(yīng)做的實驗項目，以及所需材料和試劑，完成菌種的生化鑒定 : ① 挑選并制備各種生化鑒定培養(yǎng)基 ② 接種 已 培養(yǎng)至對數(shù)生長期末的菌種 ③ 培養(yǎng)、處理并觀察現(xiàn)象 ④ 確定目標菌 （ 3） 分子生物學(xué)（ 16 s）鑒定 ① 基因組 DNA 提取 ② 合成目標菌引物 ③ PCR ④ 瓊脂糖凝膠電泳檢測 PCR 結(jié)果 ⑤ 測序 ⑥ GenBank Blast 十、評分標準制定原 則、評分方法、評分細則 （一） 評分原則 本競賽評分本著 “ 公平、公正、公開、科學(xué)、規(guī)范 ” 的原則，注重考核選手的職業(yè)綜合能力、團隊協(xié)作與組織能力和技術(shù)應(yīng)用能力。 （二） 評分與記分方法 1. 技能操作競賽成績包括四部分，前處理操作及上機操作部分由裁判員根據(jù)選手現(xiàn)場實際操作規(guī)范程度、操作質(zhì)量、文明操作情況等依據(jù)評分標準評分后得出；數(shù)據(jù)處理部分根據(jù)檢測數(shù)據(jù)質(zhì)量、依據(jù)評分標準評分后得出 。虛擬仿真軟件考核按選手完27 成的記錄表依據(jù)評分細則評分后得出。 2. 現(xiàn)場技能操作環(huán)節(jié)按照每位參賽選手均由 3~4名裁判員同時給出分數(shù)，將按 平均分計算出選手的技能現(xiàn)場競賽成績。 3. 參賽選手的比賽成績名次依據(jù)各項成績的累加成績排定。當(dāng)出現(xiàn)成績相同時，現(xiàn)場操作成績高者名次在前。 （ 三 ）評分細則 食品營養(yǎng)素檢測 技能競賽各項成績按照百分制計分，其中 食品中鋅元素檢測 —— 二硫腙比色法成績占 80%； 虛擬仿真軟件成績占 20%；即選手的競賽總分 =二硫腙比色法成績 80%+虛擬仿真軟件操作成績 20%。 食品中鋅元素檢測 —— 二硫腙比色法評分細則 考核內(nèi)容 分值 考核記錄（以 √ 表示） 得分 樣品前處理（ 4 分） 按食品性狀特點選擇 前處 理 方法 2 正確進行， +2分 試樣處理方法不當(dāng)，未混合均勻， 2分 文明操作 2 操作 完成后，進行臺面的清潔 ， +2分 操作 完成后， 未 進行臺面的清潔 ， 2分 樣品 稱量（ 8 分） 天平檢查 ① 零點 ② 水平 ③ 稱盤清掃 2 正確進行， +2分 未檢查水平， 未清掃稱盤， 未檢查天平零點， 1分 樣品取放 1 正確進行， +1分 燒杯未放在稱盤中央，一次 稱量操作 ① 開關(guān)天平門 ② 稱量操作 ③ 讀數(shù)記錄 2 正確進行， +2分 未做到隨手開關(guān)天平門，一次 稱量前將未及時將天平回零，一次 分 未及時記錄或用鉛筆記錄數(shù)據(jù)，一次 稱量結(jié)束后 1 正確進行， +1分 28 續(xù)表 樣品、天平復(fù)位 未將天平回零， 未關(guān)天平門或天平開關(guān)， 1分 未清掃天平， 文明操作 2 操作 完成后，進行臺面的清潔 ， +2分 操作 完成后， 未 進行臺面的清潔 ， 2分 樣液 制備（ 24分） 吸量管潤洗 1 正確進 行， +1分 未用蒸餾水潤洗或潤洗少于 3 次，一次 未用待裝液潤洗或潤洗少于 3 次，一次 潤洗時有吸空現(xiàn)象，一次 吸量管插入溶液前及調(diào)節(jié)液面前應(yīng)用濾紙擦拭管尖 1 正確進行， +1分 未進行，一次 吸量管調(diào)節(jié)液面 2 正確進行， +2分 視線與刻度線不平齊，一次 吸量管不垂直，一次 考核內(nèi)容 分值 考核記錄（以 √ 表示） 得分 調(diào)節(jié)液面的廢液放回原容量瓶， 一次 放出溶液 1 正確進行， +1分 吸量管不垂直，一次 管尖貼在容量瓶磨砂口處，一次 分 溶液放盡后，吸量管停留 15秒后移開 1 正確進行， +1分 未進行或停留時間太短，一次 用 量筒加 蒸餾水至10mL 1 正確進行， +1分 未進行，一次 1分 滴加甲基橙指示液 1滴 1 正確操作 +1分 ，滴管與分液漏斗垂直 進行 未 正確操作 ， 1分 逐滴加入 氨水調(diào)溶液由紅變黃 2 正確操作 +1分 ；顏色 判斷正確 +1分 未 正確操作 1 分 ；顏色判斷不正確 1分 搖勻 4 正確 操作 ， +4分 操作過程中漏液 ，一次 1分 劇烈振搖 4 振搖手法正確能夠熟練進行排氣操作 ，+4分 排氣操作不熟練， 一次 1分 29 續(xù)表 靜置分層，收集四氯化碳 層 4 調(diào)節(jié)分液