【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 確度 計(jì)算，按檢測(cè)報(bào)告要求填出相應(yīng)數(shù)據(jù) 標(biāo)準(zhǔn)操作： 測(cè)定結(jié)果精密度計(jì)算（ 極差 ； 平均值 ； 極差與平均值之 比值）， 測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度計(jì)算（平均值；平均值與對(duì)照值（測(cè)量值）之差； 10 0%?? 對(duì)照值平均值－對(duì)照值rE ， 按檢測(cè)報(bào)告要求填出相應(yīng)數(shù)據(jù)， 計(jì)算結(jié)果保留二位有效數(shù)字。 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 考核技能要點(diǎn)： 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 稱(chēng)量、溶液配制 標(biāo)準(zhǔn)操作： 鋅 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱(chēng)量 ； 鹽酸溶解 ； 水浴蒸干；溶液定容； 溶液轉(zhuǎn)移 原子吸收分光光度計(jì)儀器的使用 考核技能要點(diǎn)： 開(kāi)機(jī)、參數(shù)設(shè)置、關(guān)機(jī) 標(biāo)準(zhǔn)操作： 開(kāi)機(jī) ①打開(kāi)乙炔鋼瓶主閥 ② 打開(kāi)空壓機(jī)電源 ③ 打開(kāi)主機(jī)電源④打開(kāi)操作軟件，進(jìn)行聯(lián)機(jī)自檢 參數(shù)設(shè)置： ①光學(xué)參數(shù)設(shè)置（波長(zhǎng)、狹縫、點(diǎn)等方式、燈電流）②重復(fù)測(cè)定條件③測(cè)定參數(shù)④工作曲線參數(shù)⑤燃燒器、氣體流量參數(shù) 關(guān)機(jī) 20 ①退出軟件，關(guān)閉電腦 ②關(guān)閉 乙炔鋼瓶主閥 ②關(guān)閉 空壓機(jī)電源 ③關(guān)閉 主機(jī)電源 定量測(cè)定 考核技能要點(diǎn)： 點(diǎn)火前的準(zhǔn)備工作、機(jī)器預(yù)熱 標(biāo)準(zhǔn)操 作： 點(diǎn)火前的準(zhǔn)備工作 ①確認(rèn)乙炔已供給 ② 確認(rèn)空氣已供給 ③ 確認(rèn)排風(fēng)系統(tǒng)處于工作狀態(tài) 點(diǎn)火 吸引純凈水，觀測(cè)火焰 預(yù)熱 15 分鐘 開(kāi)始測(cè)定樣品 數(shù)據(jù)處理 考核技能要點(diǎn)： 數(shù)據(jù)參數(shù)的設(shè)置 標(biāo)準(zhǔn)操作： 測(cè)定參數(shù)設(shè)置，工作曲線參數(shù)設(shè)置，標(biāo)準(zhǔn)品參數(shù)設(shè)置，樣品組參數(shù)設(shè)置 檢測(cè)報(bào)告生成 考核技能要點(diǎn)： 報(bào)告生成 標(biāo)準(zhǔn)操作： 打開(kāi)文件菜單下報(bào)告打印類(lèi)型，設(shè)置打印內(nèi)容 （①譜線搜索圖②儀器參數(shù)③測(cè)定數(shù)據(jù)④工作曲線），保存報(bào)告，打印檢測(cè)報(bào)告 （二）食品 中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量檢測(cè) 本 賽 項(xiàng) 包括兩部分內(nèi)容： 氣相色譜法測(cè)定食品中有機(jī)磷農(nóng) 藥殘留 和 GCMS 虛擬軟件仿真測(cè)定 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留 。 操作規(guī)程參照 SN/T 01482021《 進(jìn)出口水果蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量21 檢測(cè)方法 氣相色譜和氣相色譜 質(zhì)譜法 》。 1. 氣相色譜法測(cè)定食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留（水果或根莖類(lèi)蔬菜） 選擇 2 種有機(jī)磷農(nóng)藥為測(cè)定對(duì)象。 大賽 統(tǒng)一準(zhǔn)備空白樣品，并 測(cè)定標(biāo)樣譜圖 。比賽中每位選手需做 兩 份平行加標(biāo)樣品（加標(biāo)操作由一名裁判使用一把移液槍、一份標(biāo)準(zhǔn)溶液統(tǒng)一完成）。 其它試劑均由競(jìng)賽組委會(huì)配制。 競(jìng)賽中提供的玻璃器皿均潔凈干燥，無(wú)需再洗滌。 樣品前處理 （ 1） 樣品制備 考核 技能要點(diǎn)：取樣，樣品制備，樣品存放 標(biāo)準(zhǔn)操作：從具代表性樣品中取可食部分一定質(zhì)量，用搗碎機(jī)全部磨碎混合均勻，裝入潔凈、干燥的容器中。 （ 2） 提取 考核技能要點(diǎn)：天平選擇和使用，均質(zhì)，離心，固體試劑稱(chēng)取和加入，提取液轉(zhuǎn)移，氮吹濃縮 標(biāo)準(zhǔn)操作：稱(chēng)取均質(zhì)試樣 10 g（精確至 g），置于 50 mL玻璃離心管中，加入 10 mL 乙腈溶液，高速均質(zhì) 2 min，再加入約 4 g 無(wú)水硫酸鎂和 1 g 氯化鈉，蓋上塞子劇烈振蕩 2 min 后，以 4000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心 4 min，取出乙腈層裝入另一 50 mL 離心管，用 10 mL 乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液。提取液中加入1 g 無(wú)水硫酸鎂，劇烈振蕩，以 4000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心 1 min，移出上清液置于 25 mL 刻度試管中，氮吹（ 45 ℃ ） 近干，準(zhǔn)確加入 mL 乙腈溶解提取物（對(duì)參考標(biāo)準(zhǔn)稍作改動(dòng)） 。 （ 3） 凈化 22 考核技能要點(diǎn)：固相萃取柱活化、上樣、洗脫 標(biāo)準(zhǔn)操作：固相萃取柱置于裝置上，先用 5 mL 丙酮 甲苯混合 溶劑 淋洗，流速保持為 1 mL/min。提取液加入固相萃取柱，再用 10 mL 丙酮 甲苯混合 溶劑洗脫，收集全部洗脫液于 10 mL玻璃刻度試管中，置于 40 ℃ 下氮吹至 近 mL，用乙酸乙酯定容至 mL，待測(cè)。 上機(jī)操作 考核技能要點(diǎn)：氣相色譜開(kāi)關(guān)機(jī)（在打印出的結(jié)果單上以文字?jǐn)⑹觯?、參?shù)設(shè)定（進(jìn)樣口溫度、柱溫、檢測(cè)器溫度、進(jìn)樣量、進(jìn)樣方式）、進(jìn)樣序列、生成并打印報(bào)告單。 數(shù)據(jù)處理 （ 1） 定性分析 考核技能要點(diǎn)：識(shí)譜 標(biāo)準(zhǔn)操作： 確定譜圖中 色譜峰對(duì)應(yīng)成分名稱(chēng) ，標(biāo)出保留時(shí)間和峰面積。 （ 2） 定量分析 考核技能要點(diǎn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線制備、含量計(jì)算、加標(biāo)回收率計(jì)算、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算、數(shù)值修約、單位標(biāo)注 標(biāo)準(zhǔn)操作： 以組委會(huì)提供的標(biāo)樣譜圖（ 5 點(diǎn)）制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)出曲線 方程； 計(jì)算 3 份加標(biāo)樣品中測(cè)得的各組分含量，求平均值； 以理論計(jì)算 實(shí)際 加標(biāo)量計(jì)算加標(biāo)回收率 ： 加標(biāo) 回收率 (%)=[(加標(biāo)測(cè)定量 平均值 樣品測(cè)定量 平均值 )/實(shí)際加標(biāo)量 ] 100% 23 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差： 計(jì)算結(jié)果均保留 2 位有效數(shù)字； 單位： mg/kg。 2. GCMS 虛擬軟件仿真測(cè)定食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留 考核技能要點(diǎn)： 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 、 方法建立 、 儀器操作 （開(kāi)關(guān)機(jī)、樣口溫度、柱溫、檢測(cè)器溫度、進(jìn)樣量、進(jìn)樣方式、離子源溫度、接口溫度、序列設(shè)置）、 定性分析 （ 識(shí)譜）、 定量分析 （制備標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣品濃度計(jì)算）、 報(bào)告生成 （三）食品中微生物檢測(cè)（乳或肉） 1． 食品中菌落總數(shù)的檢測(cè) 考核技能要點(diǎn) ： （ 1） 菌落總數(shù)檢測(cè)的依據(jù) （ 2） 梯度稀釋 （ 3） 傾注法倒平板 （ 4） 菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)規(guī)則 （ 5） 原始記錄 （ 6） 檢測(cè)報(bào)告 標(biāo)準(zhǔn)操作： （ 1） 樣品的稀釋 ① 以無(wú)菌吸管吸取 25 mL 樣品于盛有 225 mL 生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶，充分混勻，制成 1:10 的樣品勻液。 ② 用 1 mL 無(wú)菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1 mL，沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 稀釋液的無(wú)菌試管中，振搖試管使 其混勻，制成1( ) 100%1iin XX SS R SDn X?? ? ??24 1:100 的稀釋液。 ③ 按 ② 操作程序，制備 10 倍稀釋樣品勻液，每遞增稀釋一次，換用一次 1 mL 滅菌吸管。 ④ 選擇 3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液，每個(gè)稀釋度分別吸取 1 mL 樣品勻液加入兩個(gè)無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi) ， 同時(shí)做空白對(duì)照。 ⑤ 及時(shí)將 15～ 20 mL 冷卻至 46 ℃ 的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于恒溫水浴鍋中保溫）傾注到培養(yǎng)皿中，并轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿使其混合均勻。 （ 2） 培養(yǎng) 待培養(yǎng)基凝固后，翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，置 36 177。 1 ℃ 恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24 177。 1 h。 （ 3） 菌落計(jì)數(shù) 按照 中規(guī)定的菌落計(jì)數(shù)方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，并規(guī)范做好原始記錄。 （ 4） 檢測(cè)結(jié)果報(bào)告 正確填寫(xiě)檢測(cè)報(bào)告。 2. 革蘭氏染色及菌株形態(tài)鑒定 考核技能要點(diǎn) ： （ 1） 細(xì)菌涂片 （ 2） 革蘭氏染色 （ 3） 使用普通光學(xué)顯微鏡 （ 4） 判斷菌株形態(tài)及 G＋或 G－ 標(biāo)準(zhǔn) 操作 ： （ 1） 制片 25 在酒精燈旁，選取一個(gè)計(jì)數(shù)后的菌落總數(shù)平板，挑取菌落在一塊載玻片上進(jìn)行涂片、干燥和固定。 （ 2） 染色 進(jìn)行初染、媒染、脫色及復(fù)染。 （ 3） 鏡檢 使用普通光學(xué)顯微鏡，進(jìn)行鏡檢并觀察。 （ 4） 菌株形態(tài)鑒定 根據(jù)油鏡所觀察到菌 株的細(xì)胞形態(tài)及革蘭氏染色后的顏色，鑒定菌株形態(tài)，判斷是 G＋還是 G－，并正確填寫(xiě)菌株鑒定報(bào)告。 3. “致病菌的生化及分子生物學(xué)鑒定 ”虛擬仿真軟件的操作 考核技能要點(diǎn) ： （ 1） 菌種分離篩選 （ 2） 目標(biāo)菌的培養(yǎng)條件及方法 （ 3） 目標(biāo)菌生化鑒定材料的選取、實(shí)驗(yàn)原理及結(jié)果判斷 （ 4） 基因組 DNA 提取、 PCR、電泳及結(jié)果分析 標(biāo)準(zhǔn) 操作 ： （ 1） 致病菌的檢測(cè)過(guò)程（前增菌、分離、培養(yǎng)） 根據(jù)任務(wù)要求，利用仿真軟件選擇各個(gè)過(guò)程所需材料和試劑，完成菌種鑒定的前處理過(guò)程 : ① 樣品獲取與制備 ② 選擇合適增菌培養(yǎng)基 ③ 根據(jù)目標(biāo)菌選 取篩選培養(yǎng)基，并分區(qū)劃線或稀釋涂布平板分離單菌落；并根據(jù)單菌落形態(tài)特征確定疑似目標(biāo)菌 ④ 將目標(biāo)菌選用合適培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng) 26 （ 2） 生化鑒定 根據(jù)任務(wù)要求，利用仿真軟件選擇目標(biāo)菌生化鑒定應(yīng)做的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，以及所需材料和試劑，完成菌種的生化鑒定 : ① 挑選并制備各種生化鑒定培養(yǎng)基 ② 接種 已 培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末的菌種 ③ 培養(yǎng)、處理并觀察現(xiàn)象 ④ 確定目標(biāo)菌 （ 3） 分子生物學(xué)（ 16 s）鑒定 ① 基因組 DNA 提取 ② 合成目標(biāo)菌引物 ③ PCR ④ 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) PCR 結(jié)果 ⑤ 測(cè)序 ⑥ GenBank Blast 十、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)制定原 則、評(píng)分方法、評(píng)分細(xì)則 （一） 評(píng)分原則 本競(jìng)賽評(píng)分本著 “ 公平、公正、公開(kāi)、科學(xué)、規(guī)范 ” 的原則，注重考核選手的職業(yè)綜合能力、團(tuán)隊(duì)協(xié)作與組織能力和技術(shù)應(yīng)用能力。 （二） 評(píng)分與記分方法 1. 技能操作競(jìng)賽成績(jī)包括四部分，前處理操作及上機(jī)操作部分由裁判員根據(jù)選手現(xiàn)場(chǎng)實(shí)際操作規(guī)范程度、操作質(zhì)量、文明操作情況等依據(jù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分后得出；數(shù)據(jù)處理部分根據(jù)檢測(cè)數(shù)據(jù)質(zhì)量、依據(jù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分后得出 。虛擬仿真軟件考核按選手完27 成的記錄表依據(jù)評(píng)分細(xì)則評(píng)分后得出。 2. 現(xiàn)場(chǎng)技能操作環(huán)節(jié)按照每位參賽選手均由 3~4名裁判員同時(shí)給出分?jǐn)?shù)，將按 平均分計(jì)算出選手的技能現(xiàn)場(chǎng)競(jìng)賽成績(jī)。 3. 參賽選手的比賽成績(jī)名次依據(jù)各項(xiàng)成績(jī)的累加成績(jī)排定。當(dāng)出現(xiàn)成績(jī)相同時(shí)，現(xiàn)場(chǎng)操作成績(jī)高者名次在前。 （ 三 ）評(píng)分細(xì)則 食品營(yíng)養(yǎng)素檢測(cè) 技能競(jìng)賽各項(xiàng)成績(jī)按照百分制計(jì)分，其中 食品中鋅元素檢測(cè) —— 二硫腙比色法成績(jī)占 80%； 虛擬仿真軟件成績(jī)占 20%；即選手的競(jìng)賽總分 =二硫腙比色法成績(jī) 80%+虛擬仿真軟件操作成績(jī) 20%。 食品中鋅元素檢測(cè) —— 二硫腙比色法評(píng)分細(xì)則 考核內(nèi)容 分值 考核記錄（以 √ 表示） 得分 樣品前處理（ 4 分） 按食品性狀特點(diǎn)選擇 前處 理 方法 2 正確進(jìn)行， +2分 試樣處理方法不當(dāng)，未混合均勻， 2分 文明操作 2 操作 完成后，進(jìn)行臺(tái)面的清潔 ， +2分 操作 完成后， 未 進(jìn)行臺(tái)面的清潔 ， 2分 樣品 稱(chēng)量（ 8 分） 天平檢查 ① 零點(diǎn) ② 水平 ③ 稱(chēng)盤(pán)清掃 2 正確進(jìn)行， +2分 未檢查水平， 未清掃稱(chēng)盤(pán)， 未檢查天平零點(diǎn)， 1分 樣品取放 1 正確進(jìn)行， +1分 燒杯未放在稱(chēng)盤(pán)中央，一次 稱(chēng)量操作 ① 開(kāi)關(guān)天平門(mén) ② 稱(chēng)量操作 ③ 讀數(shù)記錄 2 正確進(jìn)行， +2分 未做到隨手開(kāi)關(guān)天平門(mén)，一次 稱(chēng)量前將未及時(shí)將天平回零，一次 分 未及時(shí)記錄或用鉛筆記錄數(shù)據(jù)，一次 稱(chēng)量結(jié)束后 1 正確進(jìn)行， +1分 28 續(xù)表 樣品、天平復(fù)位 未將天平回零， 未關(guān)天平門(mén)或天平開(kāi)關(guān)， 1分 未清掃天平， 文明操作 2 操作 完成后，進(jìn)行臺(tái)面的清潔 ， +2分 操作 完成后， 未 進(jìn)行臺(tái)面的清潔 ， 2分 樣液 制備（ 24分） 吸量管潤(rùn)洗 1 正確進(jìn) 行， +1分 未用蒸餾水潤(rùn)洗或潤(rùn)洗少于 3 次，一次 未用待裝液潤(rùn)洗或潤(rùn)洗少于 3 次，一次 潤(rùn)洗時(shí)有吸空現(xiàn)象，一次 吸量管插入溶液前及調(diào)節(jié)液面前應(yīng)用濾紙擦拭管尖 1 正確進(jìn)行， +1分 未進(jìn)行，一次 吸量管調(diào)節(jié)液面 2 正確進(jìn)行， +2分 視線與刻度線不平齊，一次 吸量管不垂直，一次 考核內(nèi)容 分值 考核記錄（以 √ 表示） 得分 調(diào)節(jié)液面的廢液放回原容量瓶， 一次 放出溶液 1 正確進(jìn)行， +1分 吸量管不垂直，一次 管尖貼在容量瓶磨砂口處，一次 分 溶液放盡后，吸量管停留 15秒后移開(kāi) 1 正確進(jìn)行， +1分 未進(jìn)行或停留時(shí)間太短，一次 用 量筒加 蒸餾水至10mL 1 正確進(jìn)行， +1分 未進(jìn)行，一次 1分 滴加甲基橙指示液 1滴 1 正確操作 +1分 ，滴管與分液漏斗垂直 進(jìn)行 未 正確操作 ， 1分 逐滴加入 氨水調(diào)溶液由紅變黃 2 正確操作 +1分 ；顏色 判斷正確 +1分 未 正確操作 1 分 ；顏色判斷不正確 1分 搖勻 4 正確 操作 ， +4分 操作過(guò)程中漏液 ，一次 1分 劇烈振搖 4 振搖手法正確能夠熟練進(jìn)行排氣操作 ，+4分 排氣操作不熟練， 一次 1分 29 續(xù)表 靜置分層，收集四氯化碳 層 4 調(diào)節(jié)分液