【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 階段毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒理學(xué)試驗(yàn) 2）推薦食用量超過人群常規(guī)用量：進(jìn)行第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 ④ 根據(jù)新原料的特性、作用機(jī)制、已有的試驗(yàn)資料及產(chǎn)品的適宜人群等信息，有針對(duì)性地選擇敏感試驗(yàn)、敏感動(dòng)物、敏感指標(biāo)，以全面了解新原料的毒性。 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 ⑤ 微生物類新原料除按上述要求進(jìn)行安全性毒理學(xué)試驗(yàn)外，還應(yīng)進(jìn)行以下試驗(yàn)： 1）菌種毒力試驗(yàn)； 2）耐藥性試驗(yàn)； 3）有可能產(chǎn)生抗菌素、真菌毒素或其他活性物質(zhì)的菌種，應(yīng)進(jìn)行有關(guān)抗菌素、真菌毒素或其他活性物質(zhì)的檢測(cè)； 4）菌種代謝產(chǎn)物分析及其不產(chǎn)生有毒有害作用的試驗(yàn)。 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì) 高劑量組應(yīng)出現(xiàn)毒性作用但不引起動(dòng)物死亡，低劑量組應(yīng)不出現(xiàn)毒性作用，并求出未觀察到有害作用劑量（ NOAEL）。 若根據(jù)已掌握的資料（包括第一、二階段的毒性試驗(yàn)及預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果等）判定新原料毒性較小，或人體推薦量較大，則試驗(yàn)最高劑量應(yīng)為可給予的最大劑量（即：飼料中最大摻入量或最大灌胃濃度下一次最大灌胃量）。 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果 ? 新原料的未觀察到有害作用劑量（ NOAEL）應(yīng)大于或等于人群可能攝入量的 100倍； ? 如果人體推薦攝入量較大，試驗(yàn)中可給予的最大劑量小于人群可能攝入量的 100倍，則在可給予的最大劑量下不應(yīng)觀察到有害作用。 第四部分 保健食品安全性毒理學(xué) 評(píng)價(jià)中存在的問題 存在的問題 鑒于制訂此程序的歷史背景與目前情況有所不同 ， 因此 ， 對(duì)保健食品的安全性評(píng)價(jià)時(shí) ， 出現(xiàn)了選擇毒理試驗(yàn)的項(xiàng)目 、 劑量 、 樣品前處理等問題 ， 現(xiàn)就上述問題一并提出供討論 。 存在的問題 ? 充分了解受試物 ， 至少是中試產(chǎn)品 。 符合既定的配方 ， 生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 。 、 化學(xué)性質(zhì)（ 包括化學(xué)結(jié)構(gòu) 、 純度 、 穩(wěn)定性等 ） 。 。 。 存在的問題 ? 動(dòng)物年齡 主要指 30天和 90天喂養(yǎng)試驗(yàn) ， “ 程序 ” 中規(guī)定用離乳大鼠 ， 而保健食品應(yīng)視具體情況而異 。 最典型的是人參 、 鹿茸 、 減肥產(chǎn)品 ， 并非受試物本身有毒影響了動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育 ， 而是因?yàn)檫@類產(chǎn)品的服用對(duì)象是成人 ， 所用的動(dòng)物是離乳大鼠 。 存在的問題 ? 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 1. 配方中含有僅限局部地區(qū)人群食用而又不在 “ 51號(hào) ”名單上的原料 ， 只對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行了兩階段毒理試驗(yàn) ，而未對(duì)原料本身按要求進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)價(jià) ， 有的進(jìn)行了評(píng)價(jià)但給予動(dòng)物受試物的方式與實(shí)際食用方式不一樣 ， 如袋泡茶摻在飼料中給予動(dòng)物 。 2. 含 “ 51號(hào) ” 文附錄二名單上原料的產(chǎn)品只做了 LD50和三項(xiàng)致空變?cè)囼?yàn) 。 存在的問題 ? 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 3. 藥食同源產(chǎn)品經(jīng)有機(jī)溶劑提取未做毒理試驗(yàn) ，或只做 LD50和微核試驗(yàn) 。 4. 從食品中提取某一成分的粗提物只做了 LD50和三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn) ， 如大豆異黃酮 。 5. 配方中僅有單一成分 ， 如人參 、 西洋參 、 蜂王漿不必進(jìn)行全部二階段毒理試驗(yàn) 。 存在的問題 ? 樣品前處理 （ 一 ） 液體類 （ 二 ） 酒類 （ 三 ） 固體類 （ 四 ） 菌類 （ 五 ） 以某些食品為載體的保健食品：如富含微量元素的雞蛋 、 南瓜粉等 存在的問題 ? LD50中存在的問題 LD50還用對(duì)照組 。 。 ,結(jié)論是 ﹥ 10g/KgBW。 24小時(shí) 。 存在的問題 ? Ames實(shí)驗(yàn) 8磅15分鐘高壓滅菌 。 。 而不是二倍而出具了合格的報(bào)告 存在的問題 ? Ames實(shí)驗(yàn) 具了 5mg/皿菌落回變數(shù)正常的報(bào)告 。 ， 而不進(jìn)行除組氨酸的前處理 。 XAD2樹脂對(duì)樣品進(jìn)行前處理 5mg/皿含義：系指有效成份 ， 如某些產(chǎn)品含有 80%的糖 ， 沒進(jìn)行樣品前處理或向送樣方提出要求 ， 直接用產(chǎn)品做 5mg/皿 ， 實(shí)際上是 1mg/皿 。 存在的問題 ? 微核 、 精子畸形以及睪丸染色體畸變?cè)囼?yàn) ：幾份報(bào)告中都有陽(yáng)性對(duì)照的數(shù)據(jù) ，而這幾份原始記錄中皆無陽(yáng)性對(duì)照 。 ：陽(yáng)性對(duì)照組精子畸形率 ﹤ %，即判斷陰性對(duì)照組與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異有顯著性 P﹤ 。 （ 正?；温蕿?%） 。 ：陽(yáng)性對(duì)照持續(xù)應(yīng)用一年以上 。 存在的問題 ? 30天或 90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 6 7 8 9 10 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 1 2 3 4 5 雄（ n=30) 雌（ n=30) 雄（ n=30) 雌（ n=30) 體重 (g) 周齡 （周） 體重 (g) 周齡 （周） 上表為 SD大鼠正常體重 存在的問題 ? 30天或 90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) ， 或?yàn)閷⒋?、 雄性大鼠食物利用率拉開差距 ， 雌性和雄性大鼠的進(jìn)食量基本一致 。 ， 雌性大鼠 700多克 、 600多克 ， 而體重與食物利用率和以前的差不多 。 ：相當(dāng)于推薦量 （ 以 g/Kg BW計(jì) ） 的 、 26和105倍 ， 這是先設(shè)計(jì)再做試驗(yàn) ， 還是先做試驗(yàn)再設(shè)計(jì) ？ 18%， 袋泡茶摻入飼料給予動(dòng)物 。 存在的問題 ? 30天或 90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 30天喂養(yǎng)試驗(yàn)以體重的 10%計(jì) ， 90天喂養(yǎng)試驗(yàn)以體重的 8%計(jì) ， 這是經(jīng)過大量資料統(tǒng)計(jì)得出 ，但將受試物以 1020%的濃度飲水給予動(dòng)物 ， 又不計(jì)飲水量 ， 與報(bào)告的劑量設(shè)計(jì)是否基本一致 ？ 有的按每 100gBw給 10ml含有受試物的水 ， 飲畢再給飲用水 ？ ， 解釋是受試物不好吃 。 ：不做 TG、 AST； TC高達(dá) ；。 存在的問題 ? 30天或 90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) ， 大鼠的代謝與人不完全一樣 ，可將尿酸轉(zhuǎn)化為尿囊素排出 。 ：心肝脾無毒性損傷 ， 兩個(gè)產(chǎn)品 ， 兩份報(bào)告來自同一檢測(cè)單位； A4紙寫了一大篇 ， 詳細(xì)描述了病理組織結(jié)構(gòu) ， 沒有一點(diǎn)異常 ， 四個(gè)產(chǎn)品 、 四份報(bào)告來源同一檢驗(yàn)單位；寫一小段也比較詳細(xì)的描述了病理組織結(jié)構(gòu) ，亦無任何異常三個(gè)產(chǎn)品 、 三份報(bào)告亦來源于同一檢驗(yàn)單位 。 存在的問題 ? 傳統(tǒng)致畸試驗(yàn) 其劑量設(shè)計(jì)比 30天喂養(yǎng)還高 ， 程序已明確以亞急性試驗(yàn)的最大無作用劑量為高劑量 ， 目的是：找強(qiáng)致畸物 ， 即具有致畸作用 ， 但無母體毒性出現(xiàn) ，這種受試物致畸作用往往較強(qiáng) 存在的問題 ? 其他典型問題 推薦量較大的產(chǎn)品 ， 同一檢測(cè)單位 ， 30天喂養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行了樣品前處理達(dá)到足夠倍數(shù) ， 但 LD50、 三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)未進(jìn)行樣品前處理 ， 相當(dāng)于人推薦量的倍數(shù)很低；樣品進(jìn)行了前處理但折合到樣品的量不一致；樣品進(jìn)行了前處理 ， 但報(bào)告中寫取一定量的樣品用回旋蒸發(fā)儀濃縮至所需濃度 ， 劑量設(shè)計(jì)寫的是 2 50、 100ml/KgBw；有的報(bào)告要從字里行間為依據(jù)替檢測(cè)單位計(jì)算出劑量設(shè)計(jì)是否正確； Ames試驗(yàn)的劑量以每皿百分之多少計(jì) 。 第五部分 保健食品功能性檢驗(yàn)及評(píng)價(jià) 主要內(nèi)容 ? 基本要求 （ 一般程序 ） ? 動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 ? 人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 ? 各功能學(xué)試驗(yàn)主要指標(biāo)評(píng)審要求 保健食品功能評(píng)價(jià)的基本要求 提供樣品物理、化學(xué)性質(zhì)的有關(guān)資料 必須是規(guī)格化的定型產(chǎn)品 提供衛(wèi)生學(xué)和毒理學(xué)檢驗(yàn)報(bào)告，樣品必須同一批次 提供功效成分和特征成分或營(yíng)養(yǎng)成分的名稱及含量 以乙醇和糖為載體的樣品必須提供乙醇和糖的含量 所提供的受試物為組成成分、比例及純度與實(shí)際產(chǎn)品相同的樣品；必須在保質(zhì)期內(nèi)。 （具體方法同安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)） ? 處理方法需在試驗(yàn)報(bào)告中詳細(xì)描述 ? 必須說明受試物濃縮或稀釋倍數(shù)、濃度，據(jù)此計(jì)算出的給予劑量 動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 、 受試物給予方式及時(shí)間 （ 1） 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物： 性別 單一性別 年齡 依試驗(yàn)要求進(jìn)行選擇 數(shù)量 大鼠每組 812只 小鼠每組 1015只 其余要求同安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)要求 動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 2）受試物給予方式： 必須經(jīng)口給予， 首選灌胃 ；若選擇飲水或摻入飼料， 最高劑量不超過 10％ ；提供每日每劑量組平均飲水量、食物攝入量及周食物利用率 （ 3）給樣時(shí)間： 根據(jù)具體功能主要指標(biāo)而定， 7天 120天，一般為 30天。 動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 1） 根據(jù)產(chǎn)品說明書注明的食用方法及用量 ， 確定功能學(xué)試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)是否合理 。 （ 2） 進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)至少設(shè)三個(gè)劑量組 ， 一個(gè)陰性對(duì)照組 ， 必要時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組或空白對(duì)照組 。 ? 以大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須有相當(dāng)于人體推薦量 （ 折算為每公斤體重 ） 的 5倍劑量組 。 ? 以小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須有相當(dāng)于人體推薦量 （ 折算為每公斤體重 ） 的 10倍劑量組 。 ? 最高劑量組不超過 30倍 ， 還必須在毒理學(xué)評(píng)價(jià)確定的安全劑量范圍內(nèi) 。 ? 當(dāng)載體或輔料本身可能具有與受試物相同的功能時(shí) ， 應(yīng)設(shè)載體對(duì)照 。 動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 1） 合理選擇受試者 按照 《 保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范 （ 2023年 ）》 規(guī)定的試驗(yàn)對(duì)象納入與排除標(biāo)準(zhǔn) ， 并同時(shí)考慮試食設(shè)計(jì)要求 、 受試樣品的性質(zhì)等因素 。 （ 2） 人數(shù) 試食組和對(duì)照組的有效例數(shù)不少于 50人 ， 且試驗(yàn)的脫離率一般不得超過 10%。 試驗(yàn)報(bào)告中必須注明脫離率 ， 否則應(yīng)予以補(bǔ)充說明 。 （ 3） 均衡性 試驗(yàn)組間年齡、性別、社會(huì)狀況構(gòu)成、身體狀況以及試驗(yàn)開始時(shí)各項(xiàng)功能主要指標(biāo)均衡可比。 人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 1） 保證受試對(duì)象的食用安全 。 必須在衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn) 、 動(dòng)物毒理學(xué)安全性試驗(yàn)及興奮劑檢測(cè) （ 僅限改善生長(zhǎng)發(fā)育 、 減肥功能 )完成之后確定產(chǎn)品是安全的 ， 符合有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求的情況下再進(jìn)行 。 原則上還應(yīng)在動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)證明其有效的前提下進(jìn)行 。 注意： 報(bào)告中應(yīng)注明試驗(yàn)開始日期和報(bào)告日期 。 開始時(shí)間應(yīng)晚于其它試驗(yàn)報(bào)告時(shí)間 。 如果試驗(yàn)在不同單位進(jìn)行的 ， 必須提供同批號(hào)的受試樣品 。 人體試驗(yàn)必須得到檢查單位倫理學(xué)審查委員會(huì)的批準(zhǔn)方能進(jìn)行 ， 送審資料必須有審查委員的簽字 。 人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 2）受試者在試驗(yàn)開始前應(yīng)進(jìn)行常規(guī)體檢 ? 主觀感覺 ? 生理指標(biāo) ， 癥狀和體征 。 ? 常規(guī)的血液學(xué)指標(biāo) ? 生化指標(biāo) ? 功效性指標(biāo) ， 即與保健作用有關(guān)的指標(biāo) ， 如抗氧化 、 減肥等方面的指標(biāo) 。 兒童一般不要求測(cè)心電圖 、 胸透 、 腹部 B超及肝 、 腎功能項(xiàng) 改善生長(zhǎng)發(fā)育