【正文】 前提下進(jìn)行 。 人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 3） 報(bào)告中需提供必要的體檢常規(guī)項(xiàng)目資料及詳細(xì)的數(shù)據(jù) 。 各功能試驗(yàn)審評(píng)要點(diǎn) 3. 緩解體力疲勞檢驗(yàn)方法 主要指標(biāo)：血乳酸 血清尿素 肝糖原 /肌糖原 動(dòng)物負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn) 判定：負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性 ， 血乳酸曲線下面積 、 血清尿素 、 肝糖 /肌糖原 3項(xiàng)生化指標(biāo)中任 2項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性 。 主要指標(biāo)：體重 骨鈣含量 骨密度 判定： （ 方案一 ） 骨鈣含量 /骨密度顯著高于低鈣對(duì)照組且不低于相應(yīng)劑量的碳酸鈣對(duì)照組 ， 鈣的吸收率不低于碳酸鈣對(duì)照組 。 各功能試驗(yàn)審評(píng)要點(diǎn) （ 二 ） 只要求人體實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目有： 1. 緩解視疲勞功能試驗(yàn) 受試對(duì)象：為兒童 、 青少年或成人 ， 長(zhǎng)期用眼 ，視力易疲勞者 。 ? 自身前后對(duì)照 ， 不產(chǎn)生新的黃褐斑 。 ? 測(cè)定前額眉間皮膚的油份 。 人體試驗(yàn) 受試對(duì)象：選擇經(jīng)飲食控制或口服降糖藥治療后病情較穩(wěn)定 ， 不需要更換藥物品種及劑量 ， 僅服用維持量的成年 Ⅱ 型糖尿病病人 。 注意事項(xiàng)： （ 1） 用于改善兒童記憶的產(chǎn)品須用斷乳鼠；用于改善老年人記憶的產(chǎn)品必須采用成年鼠 。 注意事項(xiàng)：設(shè)陽(yáng)性對(duì)照時(shí) ， 推薦使用二丁基巰二酸或 Na2CaEDTA。 注意事項(xiàng)： 首選自發(fā)高血壓大鼠 ， 雌雄可以兼用 。 （ 3） 實(shí)驗(yàn)結(jié)束期限為仔鼠斷乳 （ 出生 21天左右 ） 。 動(dòng)物起始體重也可以適當(dāng)放寬 。 ① 在報(bào)告中提供完整的膳食分析 （ 于試驗(yàn)開始前 、 結(jié)束前進(jìn)行三天的詢問(wèn)法膳食調(diào)查 ） 。 （ 2） 如果食物利用率顯著低于對(duì)照組 ， 則該樣品含有不利于動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的成分 ， 則不具備改善生長(zhǎng)發(fā)育功能 。 受試對(duì)象：為小細(xì)胞低色素貧血 ， 且有明確的缺鐵原因和臨床表現(xiàn)的成人和兒童 。 （ 2） 本實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵是細(xì)菌培養(yǎng) ， 前提準(zhǔn)確無(wú)菌采取 。試驗(yàn)開始前進(jìn)行一次蟲卵糞常規(guī)檢查 。 （ 2） 墨汁推進(jìn)率需進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換 。 各功能試驗(yàn)審評(píng)要點(diǎn) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)： 無(wú)水乙醇 、 冰醋酸 、 消炎痛引起的胃粘膜損傷模型動(dòng)物中任選其一 主要指標(biāo)：胃粘膜損傷面積 （ 無(wú)水乙醇模型 ） 胃潰瘍面積 、 體積 （ 冰醋酸模型 ） 潰瘍?cè)u(píng)分 （ 消炎痛模型 ） 判定：三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任一項(xiàng)陽(yáng)性 。 第六部分 保健食品 功能評(píng)價(jià)方法修改情況 功能修改的基本原則 ? 指導(dǎo)思想 : 1 政策持續(xù)性 。 ? 若體外或體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)未觀察到或不易觀察到食品的保健作用或觀察到不同效應(yīng) ， 而有大量資料提示對(duì)人有保健作用時(shí) ，在保證安全的前提下 ， 應(yīng)進(jìn)行必要的人體試食試驗(yàn) 。 （ 2） 每日對(duì)受試者進(jìn)行詢問(wèn)并記錄 ， 同時(shí)記錄受試者服用受試樣品 ， 前 6天及試驗(yàn)時(shí)的情況 。 毒理學(xué)上動(dòng)物食物利用率在把握上可以適當(dāng)放寬 。 受試對(duì)象：由單純飲食不佳造成的體重在同齡平均正常體重值小于 1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差以內(nèi) ， 伴有消化不良等表現(xiàn)的 4～ 10歲兒童 。 （ 2） 雙歧桿菌和 /或乳桿菌明顯增加 ， 產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或無(wú)明顯變化 ， 腸球菌和/或腸桿菌明顯增加 ， 但增加的幅度低于雙歧桿菌 、 乳桿菌增加的幅度 。 （ 3） 動(dòng)物飲用水應(yīng)為去離子水或雙蒸水 。 各功能試驗(yàn)審評(píng)要點(diǎn) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 主要指標(biāo)：體重 、 身長(zhǎng) 、 食物利用率 判定： （ 1） 體重 、 身長(zhǎng)增加明顯高于對(duì)照組 ， 差異具有顯著性 ， （ 2） 食物利用率不顯著低于對(duì)照組 。 受試對(duì)象：?jiǎn)渭冃苑逝秩巳?， 排除病理性肥胖的人群 。 （ 2） 該實(shí)驗(yàn)經(jīng)常存在著毒理學(xué)與功能學(xué)食物利用率不一致的現(xiàn)象 。 注意事項(xiàng)： （ 1） 選用 3日內(nèi)產(chǎn)仔的第二胎母鼠及其仔鼠 ， 每窩仔鼠數(shù)目應(yīng)相同 。 要求：盡可能考慮如病程 、 年齡 、 性別等因素 ， 進(jìn)行均衡性檢驗(yàn) 。 （ 3） 施測(cè)順序是先聽(tīng)覺(jué)測(cè)試后視覺(jué)測(cè)試 。 （ 2） 與動(dòng)物試驗(yàn)不同 ， 過(guò)氧化質(zhì)含量 、 超氧化物歧化酶 、 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶三項(xiàng)試驗(yàn)中任一項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性 ， 可判定受試物具有抗氧化功能 。 各功能試驗(yàn)審評(píng)要點(diǎn) 2. 輔助降血糖功能檢驗(yàn)方法 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 主要指標(biāo)：空腹血糖 、 糖耐量 判定：在模型成立的前提下 ， 兩項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)陽(yáng)性 ， 且對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖無(wú)影響 。 要求： ? 考慮年齡等因素 ， 進(jìn)行均衡性檢驗(yàn) 。 要求： ? 盡可能考慮戶外活動(dòng) 、 年齡 、 性別等因素 ， 進(jìn)行均衡性檢驗(yàn) 。 方案二 主要指標(biāo)：丙二醛 +還原型谷胱甘肽 +甘油三酯 +肝組織病理學(xué)檢查 判定：滿足以下任一條件 ， 可判定該受試物具有對(duì)酒精性肝損傷有輔助性保護(hù)作用 ① 肝臟 MDA、 GSH、 TG三項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果陽(yáng)性； ② 肝臟 MDA、 GSH、 TG三指標(biāo)中任 2項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性 ， 且肝臟病理結(jié)果陽(yáng)性 。 注意事項(xiàng)：選用小鼠 ， 受試樣品于照射前給予 14～ 30天 ，照射后仍然給予受試物 ， 必要時(shí)可延至 45天 。 各功能試驗(yàn)審評(píng)要點(diǎn) 2. 改善睡眠功能檢驗(yàn)方法 主要指標(biāo)：戊巴比妥納睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn) 巴比妥鈉睡眠潛伏期實(shí)驗(yàn) 戊巴比妥鈉 （ 或巴比妥鈉 ） 閾下劑量催眠實(shí)驗(yàn) 判定： 3項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任 2項(xiàng)陽(yáng)性 ， 且直接睡眠作用 。 ? 常規(guī)的血液學(xué)指標(biāo) ? 生化指標(biāo) ? 功效性指標(biāo) ， 即與保健作用有關(guān)的指標(biāo) ， 如抗氧化 、 減肥等方面的指標(biāo) 。 人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求 （ 1） 保證受試對(duì)象的食用安全 。 ? 以大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須有相當(dāng)于人體推薦量 （ 折算為每公斤體重 ） 的 5倍劑量組 。 ：不做 TG、 AST； TC高達(dá) ；。 177。 177。 存在的問(wèn)題 ? 30天或 90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 177。 。 存在的問(wèn)題 ? 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 3. 藥食同源產(chǎn)品經(jīng)有機(jī)溶劑提取未做毒理試驗(yàn) ，或只做 LD50和微核試驗(yàn) 。 符合既定的配方 ， 生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 。 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 ①無(wú)食用史 需做四階段試驗(yàn) ②局部地區(qū)有食用史 需做三階段試驗(yàn) 可只做一、二階段實(shí)驗(yàn)的包括 1） 推薦食用量未超過(guò)人群常規(guī)用量的新原料，若根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)資料及成分分析，未發(fā)現(xiàn)有毒或毒性甚微不至對(duì)健康構(gòu)成損害，或者較大數(shù)量人群有長(zhǎng)期食用歷史且未發(fā)現(xiàn)有害作用的 2）已有權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行系統(tǒng)的毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)，且有資料證明所用原料與其一致 如試驗(yàn)結(jié)果與權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行的評(píng)價(jià)不一致，需進(jìn)入下階段的試驗(yàn) 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求 新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇 ③ 多個(gè)國(guó)家或國(guó)內(nèi)多數(shù)地區(qū)廣泛食用 1）推薦食用量未超過(guò)人群常規(guī)用量：先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒理學(xué)試驗(yàn) 2）推薦食用量超過(guò)人群常規(guī)用量：進(jìn)行第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。 （ 3）選擇安全性毒理學(xué)試驗(yàn)不符合程序規(guī)定，未完成相應(yīng)階段的毒理學(xué)試驗(yàn)。 （ 10％）或液體受試物經(jīng)濃縮后仍達(dá)不到最大觀察到有害作用劑量為人的可能攝入量的規(guī)定倍數(shù)時(shí)，如何綜合其它的毒性試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。 對(duì)孕婦、乳母或兒童食用的保健食品，應(yīng)特別注意其胚胎毒性或生殖發(fā)育毒性、神經(jīng)毒性和免疫毒性。 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均發(fā)生腫瘤，但實(shí)驗(yàn)組發(fā)生率高。 在中低劑量組中個(gè)別指標(biāo)與對(duì)照組相比有差異，應(yīng)綜合分析，決定取舍或進(jìn)行下一步毒理試驗(yàn)。 對(duì)于不能獲得 LD50的受試物 ：最高劑量為人可能攝入量的 100倍，或按最大灌胃劑量或在飼料中的最大摻入量。 30天喂養(yǎng)試驗(yàn) 目的 ：急性毒性試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，此試驗(yàn)可進(jìn)一步了解毒性作用，特別是觀察對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育的影響，并可初步估計(jì)最大觀察到的無(wú)作用劑量，估計(jì)亞慢性攝入的危害性。 小鼠睪丸染色體畸變?cè)囼?yàn) 目的 ：檢測(cè)整體動(dòng)物睪丸染色體畸變發(fā)生率，以評(píng)價(jià)受試物對(duì)整體哺乳動(dòng)物睪丸生殖細(xì)胞的致突變性。記錄染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的改變。同時(shí)觀察嗜多染紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的比例。 原理 ： 微核是在細(xì)胞有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時(shí)，仍然留在細(xì)胞質(zhì)中的色單體或染色體的無(wú)著絲點(diǎn)斷片 。 鼠傷寒沙門氏菌（ Ames）試驗(yàn) 目的： 檢測(cè)受試物的誘變性，預(yù)測(cè)其遺傳危害和潛在致癌作用的可能性。 毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目要點(diǎn)介紹 ? 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) ? 鼠傷寒沙門氏菌（ Ames）試驗(yàn) ? 骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn) ? 哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn) ? 小鼠精子畸形試驗(yàn) ? 小鼠睪丸染色體畸變?cè)囼?yàn) ? 30天喂養(yǎng)試驗(yàn) 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) 目的： 測(cè)定 LD50，毒性分級(jí)。 受試物濃縮倍數(shù)應(yīng)符合試驗(yàn)要求。 ? 衛(wèi)生部規(guī)定允許使用的動(dòng)植物及其提取物或微生物為原料的。 樣品的預(yù)處理原則 處理方法與產(chǎn)品推薦飲用方法相同 推薦用： 80℃ 90℃ 常壓用水浸泡 30min 水量為受試物的 10倍，提取 2次， 2次提取液合并濃縮至所需濃度 標(biāo)明該濃縮液與受試物的比例 樣品的預(yù)處理原則 （ 1）不需濃縮的受試物 乙醇濃度 15％ 直接進(jìn)行試驗(yàn) 乙醇濃度 15％ 乙醇濃度應(yīng)調(diào)至 15％ （ 2）需濃縮的受試物 乙醇濃度 15％ 濃縮后調(diào)至原乙醇濃度 乙醇濃度 15％ 濃縮后調(diào)至 15％乙醇濃度 在進(jìn)行乙醇濃度調(diào)整時(shí)必須用原酒基 樣品的預(yù)處理原則 選擇可溶性介質(zhì) 給受試物的方法：灌胃 其最高濃度最大灌胃量時(shí)達(dá)不到人體推薦量的 100倍，按采用實(shí)際達(dá)到的倍數(shù) 標(biāo)明受試物的膨脹系數(shù) 樣品的預(yù)處理原則 在進(jìn)行 Ames試驗(yàn)或體外細(xì)胞試驗(yàn)時(shí)需將受試物滅活。致死劑量通常用半數(shù)致死劑量 LD50表示。可設(shè)五個(gè)劑量組，組間距不超過(guò) 5倍。低劑量組應(yīng)不出現(xiàn)毒性反應(yīng)。 原理 ：當(dāng)受試物作用于細(xì)胞周期 G1期和 S期時(shí)，可誘發(fā)染色體型畸變，而作用于 G2期時(shí)則誘發(fā)染色體單體型畸變。 原理 ： 小鼠精子畸形受基因控制，具有高度遺傳性，許多常染色體及 X、 Y性染色體基因決定精子形態(tài)。 小鼠睪丸染色體畸變?cè)囼?yàn) 時(shí)間周期 ：一般為 7周 35天適應(yīng)期 小鼠經(jīng)口連續(xù)染毒 5天，與首次給樣后的 1214天處死動(dòng)物取材，（取材前 6h，腹腔注 射秋水仙素）。 30天喂養(yǎng)試驗(yàn) 時(shí)間周期 ：在獲得了急性毒性數(shù)據(jù)后，一般為 2月 35天，大鼠適應(yīng)期 30天，染毒及實(shí)驗(yàn)觀察期 再進(jìn)行大體解剖、血液、生化、器官病 理檢查。 血液學(xué)指標(biāo) ：喂養(yǎng)結(jié)束后測(cè)定血紅蛋白、紅和白細(xì)胞總數(shù)及分類，必要時(shí)測(cè)定血小板或網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)等指標(biāo)。 ? 90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn) ： 分，需大于或等于人攝入量的 100倍。 安全性評(píng)價(jià)的科學(xué)性和藝術(shù)性 安全性評(píng)價(jià)的藝術(shù)性 ： ； 、技術(shù)能力的相符性；