【文章內(nèi)容簡介】 益 )原則市場需求即經(jīng)濟(jì)效益。藥品作為一種商品，除了療效外，必須還有市場效益，否則，該新藥獲得證書后只能存在檔案室。因此，在新藥選題時必須進(jìn)行充分的市場調(diào)研，分析所選病種的發(fā)病率、當(dāng)前上市藥物的品種、臨床用藥狀況、各個品種的特點(diǎn)和目前市場占有率，根據(jù)擬選新藥的優(yōu)勢和特點(diǎn)，預(yù)測新藥上市后可能的市場占有率和市場前景。對于這一點(diǎn)，國內(nèi)的企業(yè)和科研單位做得不夠充分，較少有新藥研究單位在立項時能夠拿出一套詳細(xì)的市場調(diào)研報告，這也是為什么報批的新藥大部分不能很好地開發(fā)市場的重要原因。 35 3． 1． 4 立足創(chuàng)新原則 作為創(chuàng)新藥物必須立足于 “ 新 ” 字，中藥創(chuàng)新藥物的創(chuàng)新可以從三方面實現(xiàn)：①新物質(zhì)，包括新化合物和新有效部位；②新藥用，一個已知化合物或已知提取物，發(fā)現(xiàn)其藥用價值，將其開發(fā)成為新藥，也是非常有價值的，如砒霜，發(fā)現(xiàn)其可以治療白血病，曾引起國際上的轟動；③名優(yōu)中成藥的二次開發(fā)，對名優(yōu)中成藥進(jìn)行深入研究，闡明其有效部位，將其研制成為新的有效部位復(fù)方制劑，從而降低服用劑量、提高療效、建立有效的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對中成藥來說，也是很好的創(chuàng)新。 36 ?3． 1． 5 可行性原則 在創(chuàng)新藥物研發(fā)時必須注意生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可行性。因為，其一，生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)將伴隨著藥品的終生，一個無法工業(yè)化或高成本的生產(chǎn)工藝將使新藥無法投產(chǎn)，一個難以重現(xiàn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)將無法控制藥品的質(zhì)量；其二，有效成分新藥要求有效成分的含量達(dá)到提取物的 90％以上，有效部位的新藥要求有效部位含量達(dá)到提取物的 50％以上，在選擇藥材時就必須考慮是否能夠純化到相應(yīng)的含量，是否能夠測出這些成分的含量。根據(jù)我們的經(jīng)驗，創(chuàng)新藥物的研發(fā)必須考慮以下二點(diǎn)： 37 (1)生產(chǎn)工藝可行性：研制有效成分的新藥，應(yīng)選擇有效成分含量高、主成分明顯、易于分離的植物，如果該成分是針對某種重大疾病的特效藥物，則另當(dāng)別論；研制有效部位的新藥，應(yīng)選擇有效部位集中，化學(xué)成分類別較少的植物；研制復(fù)方有效部位的新藥，應(yīng)選擇藥味較少，方中各味藥的有效部位較明確的中藥復(fù)方。 38 (2)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可行性：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可行性主要是在有效部位新藥研發(fā)中存在的問題，因為有效部位新藥要求對各類成分進(jìn)行含量測定，且所測各類成分的含量之和必須大于 50％。因此，在有效部位新藥研發(fā)時首先必須考慮各類成分是否能夠測定、相互之間是否存在干擾。在定量方法建立時可考慮采用以下措施：a．選擇適當(dāng)?shù)姆椒?，將各類成分進(jìn)行分離，分別測定； b．選擇各類成分專屬的紫外一可見吸收波長分別進(jìn)行測定； e．采用各類成分專屬性強(qiáng)、且穩(wěn)定的顯色方法，排除成分之間的干擾。 39 ?3． 2 各類中藥創(chuàng)新藥物的研究思路 ?3． 2． 1 有效成分新藥 有效成分新藥實際上與化學(xué)藥沒有本質(zhì)性的區(qū)別，研發(fā)有效成分的新藥應(yīng)該與上市的適應(yīng)癥相同或相似的化學(xué)藥進(jìn)行比較，分析擬開發(fā)新藥在療效、安全性、生產(chǎn)成本等方面的優(yōu)勢或特色，如果沒有優(yōu)勢或特色，則該新藥的開發(fā)意義就不大。由于中藥中的成分多數(shù)情況下存在著協(xié)同作用，單體化合物的活性往往不是很強(qiáng)，難以與化學(xué)藥相比，從近幾年申報的中藥一一類新藥也可以看出這一點(diǎn)，所以開發(fā)有效成分新藥必須慎重。 40 ? 3． 2． 2有效部位新藥 中藥有效部位是經(jīng)過篩選確定的某一中藥或復(fù)方中的各類有效成分的組合，仍然是個混合物，只不過把無效成分去除，使療效更強(qiáng)、作用更專一，所以有效部位新藥仍然具有中藥多成分、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)，符合中醫(yī)藥理論。同時，經(jīng)過精制，除去無效成分，提高療效，降低服用劑量，達(dá)到化學(xué)成分清楚、質(zhì)量易控的目的，符合中藥現(xiàn)代化的發(fā)展趨勢。因此，有效部位新藥將是中藥創(chuàng)新藥物研發(fā)的主要方向，特別是根據(jù)中醫(yī)藥配伍理論結(jié)合現(xiàn)代藥效學(xué)篩選組成的中藥有效部位復(fù)方制劑，能夠更好地發(fā)揮中醫(yī)藥的特色與優(yōu)勢，將是今后有效部位新藥研發(fā)的主要方向。在開發(fā)有效部位的新藥中，單味藥的有效部位是研發(fā)的基礎(chǔ)。如果一個單位要進(jìn)行系列有效部位新藥的研發(fā)，應(yīng)該先進(jìn)行一些常用中藥的有效部位研究，申請專利。如果單味藥的有效部位能夠開發(fā)成為新藥，先進(jìn)行單味藥的開發(fā)，在此基礎(chǔ)上，再進(jìn)行有效部位復(fù)方制劑的開發(fā)，達(dá)到多快好省的目的。否則，常用中藥的有效部位的工藝和用途都被專利保護(hù)后，即使有很好的處方或思路，也無法進(jìn)行研發(fā)。 41 ? 3． 2． 3中成藥二次開發(fā)如前所述，名優(yōu)中成藥的二次開發(fā)是中藥創(chuàng)新藥物研發(fā)的重要組成部分。名優(yōu)中成藥的二次開發(fā)不是簡單的改變劑型或改變工藝，名優(yōu)中成藥的二次開發(fā)應(yīng)該在 “ 精、新、效、優(yōu) ” 四個字上做文章。 “ 精 ” ，是指精制，提高有效成分的含量，降低服用劑量，盡可能地將其研制成為有效部位的新藥，達(dá)到質(zhì)的飛躍，如果可測性成分含量難以達(dá)到 50％以上，也盡量往高含量研究。 “ 新 ” ，是指劑型新，根據(jù)疾病治療的需要，從制劑學(xué)上做文章，提高中藥的制劑水平。 “ 效 ” ，是指療效，通過二次開發(fā)應(yīng)提高藥物的療效，起碼與原制劑達(dá)到等效，如果二次開發(fā)，其他工作做得很好，但療效卻降低了，這樣的開發(fā)也是不成功的開發(fā)。 “ 優(yōu) ” ，是指質(zhì)量優(yōu)，主要表現(xiàn)在：① 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有了很大的提高，所建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能夠有效地控制產(chǎn)品的質(zhì)量；②藥品穩(wěn)定性和批次間的一致性均有了很大的提高。如果能夠?qū)崿F(xiàn)這幾點(diǎn)，二次開發(fā)就是一個很成功的開發(fā)。 42 二、天然藥物化學(xué)成分預(yù)實驗 （一）預(yù)試驗的目的和要求 中藥化學(xué)成分預(yù)試驗是指通過簡單的提取分離和定性反應(yīng)，初步檢驗?zāi)持兴幹锌赡芎心男┗瘜W(xué)成分，然后按照所含化學(xué)成分的性質(zhì)，設(shè)計有效成分提取、分離的具體方法。對預(yù)試驗的要求是簡便、快捷而正確。一般采用試管實驗，由于植物提取液大多顏色較深，顏色變化在試管內(nèi)觀察易產(chǎn)生干擾，可另采用紙片法，把試樣和試劑點(diǎn)在濾紙上，觀察其化學(xué)反應(yīng)后的顏色變化。如果還難以肯定，可進(jìn)一步采用紙色譜及薄層色譜方法，把各類成分初步分開后噴灑各類顯色劑，再加以判斷，靈敏度也可提高。薄層色譜比紙色譜展開時間短，操作方便，更適用于預(yù)試驗工作。 43 預(yù)試驗往往只能提供初步線索，其準(zhǔn)確性受多種因素影響，主要表現(xiàn)在：共存成分相互干擾；提取分離方案不很完善；提取液中雜質(zhì)多，顏色深，影響定性反應(yīng)的觀察；定性檢出試劑不夠?qū)Ｒ唬怀煞趾康?，與檢出試劑反應(yīng)不靈敏；成分在植物體中的存在狀態(tài)等。為提高預(yù)試驗檢出的準(zhǔn)確性，可從以下幾方面考慮： 44 ?1．預(yù)試驗前對藥材的性狀特征進(jìn)行認(rèn)真觀察，以引起提取檢識時的注意。如黃色藥材可能含有黃酮、蒽醌等；紅色藥材可能含有蒽醌或其他醌類、酮類化合物；具苦味的可能含生物堿、強(qiáng)心苷；具酸味的可能含有機(jī)酸；具甜味的常含糖類成分；具澀味的可能含鞣質(zhì)等。 ?2．制備供試液時，應(yīng)盡量除去雜質(zhì)，以減少成分間的相互干擾。如檢查生物堿時，可利用生物堿溶于酸水而與香豆素、中性內(nèi)酯分離，再用生物堿沉淀試劑檢出生物堿。 45 ? 3．在化學(xué)反應(yīng)檢識時，盡量采用專屬性強(qiáng)的檢出試劑，并選用幾種不同試劑同時檢查，根據(jù)反應(yīng)結(jié)果綜合分析。如強(qiáng)心苷首選 α 去氧糖反應(yīng)，再配合liebermannburchard和 Beljet反應(yīng)等。在檢識方法上，可配合 TLC或 PC檢識，往往可提高檢出的準(zhǔn)確度。 ? 4．反應(yīng)顏色判斷不準(zhǔn)確時，可同時作對照試驗和空白試驗。 ? 5．成分含量太低時，可配合生物測定方法。 預(yù)試驗結(jié)果只能提供藥材中可能含有哪些類型的化學(xué)成分，要完全肯定某類化學(xué)成分，則需提取分離得到后再進(jìn)一步檢識。 46 ?（二）預(yù)試驗的方法 天然藥物化學(xué)成分預(yù)試驗的方法可以分為兩類。一類是單項預(yù)試驗，即根據(jù)工作的需要有重點(diǎn)的檢查某一類成分。另一類是系統(tǒng)預(yù)試驗，即用簡便、快速的方法，對中藥中存在的各類化學(xué)成分進(jìn)行全面定性檢查。 47 （三）預(yù)試驗溶液的制備 ?1．單項預(yù)試驗溶液的制備 通常將中藥材分別用石油醚、 95％乙醇和水提取，便可以將絕大部分化學(xué)成分提取出來。 ?（ 1）水提取液：取藥材粉末 10g，加 100ml蒸餾水，室溫浸泡 24小時，濾過，取少量濾液檢查蛋白質(zhì)、氨基酸，剩余濾液和濾渣水浴加熱（ 55～ 60℃ ） 1小時，濾過，濾液檢查糖、皂苷、有機(jī)酸、鞣質(zhì)、生物堿鹽。 48 （ 2） 乙醇提取液 49 （ 3）石油醚提取液：取藥材粉末 1g，加 10ml石油醚（沸程： 60～ 90℃ ），浸漬 24小時，濾過，濾液進(jìn)行萜類、揮發(fā)油、甾體、油脂等親脂性成分