生化工程6-種子擴(kuò)大(編輯修改稿)
2025-06-16 12:04 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 控制 ? 菌種的穩(wěn)定性檢查與復(fù)壯 ? 無雜菌檢查 青霉素生產(chǎn)的種子制備 制備過程 安培管 → 斜面孢子 → 大米孢子 → 一級(jí)種子 → 二級(jí)種子 → 發(fā)酵 斜面孢子 培養(yǎng)基：甘油、 葡萄糖、 蛋白胨等 培養(yǎng)基特點(diǎn)：有利于長(zhǎng)孢子，用量少而精細(xì) 培養(yǎng)條件： 25℃ 、 7天，濕度 50%左右 大米孢子 培養(yǎng)基：大米及氮源（玉米漿） 培養(yǎng)基的特點(diǎn) ： 成本低、米粒之間結(jié)構(gòu)疏松提高，比表面積大，利于氧的傳質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)適當(dāng)有利于孢子的生長(zhǎng)。 培養(yǎng)條件： 25℃ 、 7天，控制濕度 大米孢子的要求 ： 1粒米含 *106個(gè)孢子 一級(jí)種子 培養(yǎng)基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米漿 目的 ： 長(zhǎng)菌體 培養(yǎng)條件： 27℃ ， 40小時(shí) 接種量： 200億孢子 /噸 二級(jí)種子 培養(yǎng)基：同上 培養(yǎng)條件： 27℃ 、 1014小時(shí) 接種量： 10% 質(zhì)量要求 菌絲長(zhǎng)稠呈絲狀、菌絲團(tuán)少 青霉素發(fā)酵菌絲體的生長(zhǎng)共分為 6個(gè)期， 14為年青期， 46期合成青霉素的能力最強(qiáng) 發(fā) 酵工藝控制 ? 微生物發(fā)酵過程可分為，分批，分批補(bǔ)料，半連續(xù)和連續(xù)等幾種發(fā)酵方式。不同的發(fā)酵工藝方式各有其優(yōu)缺點(diǎn)。 分批發(fā)酵 ? 分批發(fā)酵：接種后成為準(zhǔn)封閉系統(tǒng)，除了通氣外沒有別的物質(zhì)交流。 微生物生長(zhǎng)分為：停滯期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期和死亡期 在停滯期，菌體沒有分裂只有生長(zhǎng)，因?yàn)楫?dāng)菌種接種入一個(gè)新的環(huán)境，細(xì)胞內(nèi)的核酸、酶等稀釋，這時(shí)細(xì)胞不能分裂。 分批發(fā)酵 當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的與細(xì)胞分裂相關(guān)的物質(zhì)濃度達(dá)到一定程度，細(xì)胞開始分裂，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)很快，比生長(zhǎng)速率幾近常數(shù)。這個(gè)時(shí)期稱為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 隨著細(xì)胞生長(zhǎng)，培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物減少，廢物積累，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速率下降，進(jìn)入減速期和穩(wěn)定期。最后當(dāng)細(xì)胞死亡速率大于生成速率，進(jìn)入死亡期 二次生長(zhǎng)曲線 分批培養(yǎng)各時(shí)期的 影響因素和意義 ◆ 菌種 ： 繁殖速度較快的菌種的延遲期一般較短； ◆接種物菌齡 ： 用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種接種時(shí)，其延遲期較短，甚至檢查不到延遲期； ◆ 接種量：一般來說， 接種量增大可縮短甚至消除延遲期； ◆培養(yǎng)基成分： 在營(yíng)養(yǎng)成分豐富的天然培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的延滯期比在合成培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)短； 接種后培養(yǎng)基成分有較大變化時(shí)，會(huì)使延滯期加長(zhǎng)，所以發(fā)酵工業(yè)上盡量使發(fā)酵培養(yǎng)基的成分與種子培養(yǎng)基接近。 影響延滯期長(zhǎng)短的因素： 在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短延遲期； 采取的 縮短延滯期的 措施有： 增加接種量； （群體優(yōu)勢(shì) 適應(yīng)性增強(qiáng)） 采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的健壯菌種； 調(diào)整培養(yǎng)基的成分，在種子培養(yǎng)基中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些成分。 選用繁殖快的菌種 對(duì)數(shù)期的應(yīng)用意義 ? 此 時(shí)期的菌種比較健壯，增 殖菌 體的最適菌齡；生產(chǎn)上用作接種的最
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