食品安全分析課件(編輯修改稿)
2025-02-02 19:42 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 擾成分。層析介質(zhì)為硅藻土、中性氧化鋁 ?此法測(cè)定的是維生素 D2和維生素 D3的總量 （一）三氯化銻比色法 （二）液相色譜法 ? 靈敏度較比色法高 30倍以上，且操作簡(jiǎn)便，精度高，分析速度快。是目前分析維生素 D的最好方法。 ? 試樣經(jīng)皂化后，用苯提取不皂化物，蒸餾除苯，先采用反相 C18柱分取維生素 D，除去大部分雜質(zhì)。進(jìn)一步采用正相色譜分離，紫外檢測(cè)定量。 ?反相色譜條件 ? 色譜柱： Nucleosil C18,*300mm ? 流動(dòng)相：乙腈＋甲醇（ 1＋ 1） ? 流速： mL/min ? 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)： 254nm ?正相色譜條件 ? 色譜柱：正相柱 Zorbax SIL,*250mm ? 流動(dòng)相： %異丙酮的己烷溶液 ? 流速： mL/min ? 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)： 254nm ?注意事項(xiàng) ? VD2 與 VD3分不開(kāi) ? 皂化時(shí)加入焦性沒(méi)食子酸作為抗氧化劑 ? 標(biāo)樣與試樣在同樣條件下皂化，消除了 VD的熱 異性化損失。 ? 也可用硅藻土及皂土柱層析，除去甾醇、 VA、胡蘿卜素的干擾。 第三節(jié) 水溶性維生素的測(cè)定 ? 水溶性維生素 B B2和 C，廣泛存在于動(dòng)植物組織中，飲食來(lái)源充足。但是由于它們本身的水溶性質(zhì)，除滿足人體生理、生化作用外，任何多余量都會(huì)從小便中排出。為避免耗盡，需要經(jīng)常由飲食來(lái)提供。 ?水溶性維生素都易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多數(shù)有機(jī)溶劑。在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，既使加熱也不破壞；但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，特別在堿性條件下加熱，可大部分或全部破壞。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響； ? 維生素 B2對(duì)光，特別是紫外線敏感，易被光 線破壞；維生素 C對(duì)氧、銅離子敏感，易被氧化。 ? 根據(jù)上述性質(zhì)，測(cè)定水溶性維生素時(shí)，一般都在酸性溶液中進(jìn)行前處理。 ? 維生素 Bl、 B2 鹽酸水解 酶解 提取 純化 ? 維生素 C通常采用草酸、草酸 — 醋酸、偏磷酸 — 醋酸溶液直接提取。在一定濃度的酸性介質(zhì)中，可以消除某些還原性雜質(zhì)對(duì)維生素 C的破壞作用。草酸價(jià)廉，使用方便，對(duì)維生素 C有很好 淀粉酶 木瓜蛋白酶 活性人造浮石 硅鎂吸附劑 一、維生素 B1的測(cè)定 ? 維生素 B1又名硫胺素、抗神經(jīng)炎素，通常以游離態(tài)，或以焦磷酸酯形式存在于自然界。在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色蔬菜和牛乳、蛋黃中含量較為豐富。 ? 分析方法： GB/T — 2023中唯一的方法是熒光計(jì)法 ? 此法檢出限 原理 ? 硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中被氧化成硫色素（噻嘧色素），在紫外線下，硫色素發(fā)出熒光。在給定的條件下，以及沒(méi)有其他物質(zhì)干擾時(shí)，此熒光強(qiáng)度與硫色素量成正比，即與溶液中硫胺素量成正比。從而測(cè)定其含量。 分析步驟 ?制樣 → 水解 → 凈化 → 氧化 → 干燥 → 測(cè)定 → 結(jié)果計(jì)算 （ 1）提取 ? 精確稱取一定量試樣 5－ 20g（硫胺素含量約為 10－ 30ug）置于 100mL三角瓶中，加入 50－ 75mL ，瓶口加蓋小燒杯后放入高壓鍋中加熱水解 104Pa 30min,涼后取出。 ? 用 2mol/L乙酸鈉調(diào)其 pH值為 （以 %溴甲酚綠為指示劑） ? 按每克試樣加入 20mg淀粉酶的比例加入淀粉酶。于 45－ 50℃ 溫箱過(guò)夜保溫（約 16h）。 ? 冷至室溫，定容至 100mL，然后混勻過(guò)濾，即為提取液 （ 2）凈化 ? 用少許脫脂棉鋪于層析柱的底部，加水將棉纖維中氣泡排出，再加約 1g活性人造沸石使之達(dá)到交換柱的三分之一高度。保持層析柱中液面始終高于活性人造沸石。 ? 用移液管加入提取液 20－ 80mL（使通過(guò)活性人造沸石的硫胺素總量約為 2－ 5μg） ? 加入約 10 mL熱水沖洗交換柱，棄去洗液。如此 重復(fù)三次。 ? 加入 25％酸性氯化鉀（溫度為 90℃ 左右） 20mL，收集此液于25mL刻度試管內(nèi)，冷至室溫，用 25％酸性氯化鉀定容至
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