基因工程基本工具(編輯修改稿)
2025-01-25 17:53 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 連接部位 在兩 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵 將單個核苷酸加到已存在的核酸片段的 3’末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵 通常以質(zhì)粒作為載體 質(zhì)粒 —— 細(xì)菌細(xì)胞中一種很小的環(huán)狀 DNA分子。 裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌之外，并且有自我復(fù)制能力 氨芐青霉素抗性基因 質(zhì)粒 擬核 大腸桿菌細(xì)胞 目的基因插入位點 復(fù)制原點 三、 “分子運輸車” — 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體： 質(zhì)粒 載體應(yīng)具備的四個條件 (1)能在宿主細(xì)胞內(nèi) 穩(wěn)定保存 并自我 復(fù)制 。 (2)有一個至 多個限制酶切點 ，以便與外源基因連接 (3)具有某些標(biāo)記基因 ，以便進(jìn)行篩選 （ 4）結(jié)構(gòu)簡單 ,獨立于細(xì)菌外的 DNA 目前常用的兩類運載體 ，它是細(xì)菌染色體DNA以外的小型環(huán)狀 DNA(一般有 1200kb， kb為千堿基對 )，有的細(xì)菌只有一個，有的細(xì)菌有多個 DNA。 以 質(zhì) 粒 為 載 體 的 DNA 克 隆 過 程 小結(jié) 基因工程 的工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有專一性 (識別序列 ) 切開 DNA分子的磷酸二酯鍵 DNA連 接酶 連接磷酸二酯鍵 種類 T4 DNA連接酶 運載 工具 具備的 條件 結(jié)構(gòu)簡單 ,大小適中 能在宿主細(xì)胞中自 我復(fù)制并穩(wěn)定存在 具一個至多個限制酶切位點 具標(biāo)記基因 質(zhì)粒、 λ噬菌體衍生物、動植物病毒 （ ） A、 所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列 B、 質(zhì)粒是基因工程中唯一的運載體 C、 運載體必須具備的條件之一是：具有多個限制酶切點 ， 以便與外源基因連接 D、 DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵 C 練習(xí) 是 A、能復(fù)制 B、 有多個限制酶切點 C、 具有標(biāo)記基因 D、 它是環(huán)狀 DNA D 3. 已知標(biāo)記基因有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素的基因，現(xiàn)探討某細(xì)菌的質(zhì)粒中有無標(biāo)記基因或標(biāo)記
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