【總結(jié)】第四章聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈反應(yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點。?1971年,Khorana提出:DNA經(jīng)過變性,與合適引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,
2025-01-05 16:46
【總結(jié)】聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)[學(xué)習(xí)目標(biāo)定位]1.簡述PCR的原理。2.了解PCR技術(shù)的基本操作過程。3.討論P(yáng)CR技術(shù)的影響因素。第15課時本課欄目開關(guān)知識·儲備區(qū)學(xué)習(xí)·探究區(qū)自我·檢測區(qū)1.DNA分子復(fù)制是指以親代DNA為
2024-11-09 05:24
【總結(jié)】聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PolymeraseChainReaction上海第二醫(yī)科大學(xué)檢驗系樊綺詩PCR技術(shù)?由美國Cetus公司于1983年建立?能在體外復(fù)制已知序列的DNA片段?具有擴(kuò)增效率高和特異性強(qiáng)的特點?為生命科學(xué)領(lǐng)域的研究開創(chuàng)了嶄新時代PCR原理5’
2025-08-01 13:50
【總結(jié)】一、PCR實驗背景二、PCR基本原理三、PCR引物設(shè)計原則四、PCR反應(yīng)注意事項五、常見問題與對策六、PCR的應(yīng)用講解內(nèi)容第二次實驗課、DNA片段擴(kuò)增及DNA連接一.實驗背景?Thepolymerasechainreaction(PCR)isinventedbyK.Mulli
2025-05-07 18:05
2025-01-12 08:02
【總結(jié)】第四節(jié)DNA限制酶切反應(yīng)和限制酶譜繪制一.DNA的限制酶反應(yīng)1.酶單位定義:使1μg某種DNA在最適反應(yīng)條件下和1小時內(nèi)完全酶切所需的限制酶活性。2.酶切反應(yīng)類型1)完全酶切SV40(5243
2025-01-05 02:55
【總結(jié)】第四節(jié)重核裂變和鏈?zhǔn)椒磻?yīng)核能開發(fā)的歷史進(jìn)程1.1919年,英國盧瑟福用α粒子轟擊氮原子核,使其嬗變成氧原子。2.1932年,查得威克發(fā)現(xiàn)中子3.1934年,法國約里奧-居里夫婦用α粒子轟擊鋁,產(chǎn)生了一個磷的同位素,但很快放出正電子蛻變?yōu)楣琛?.盧瑟福(1933)和愛因斯坦(1935)均沒有意識到原子能的實際利用
2025-05-15 00:08
【總結(jié)】第三章聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction,PCR)聚合酶鏈反應(yīng)?又稱體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。是指利用耐熱DNA聚合酶的反復(fù)作用,通過變性-退火-延伸循環(huán)操作,在體外特異地擴(kuò)增所需要的DNA片段的一種技術(shù)。它能快速將皮克(pg)水平的DNA特異地擴(kuò)增100萬倍左右,達(dá)到微
2025-01-16 22:18
【總結(jié)】第十一章DNA損傷反應(yīng)?自發(fā)突變?誘發(fā)突變?化學(xué)物質(zhì)和射線。?損傷的DNA在其復(fù)制或分離前得到修復(fù),因此基因序列上的改變極少會傳遞到子細(xì)胞中。?細(xì)胞內(nèi)存在感應(yīng)蛋白,能夠?qū)蚪M進(jìn)行掃描,探測DNA的損傷,招募特定的酶來進(jìn)行修復(fù)?!挥绊懠?xì)胞功能?如果DNA的大面積損傷并且不容易修復(fù),損傷感應(yīng)
2025-04-29 04:51
【總結(jié)】實驗二質(zhì)粒DNA的酶切鑒定及瓊脂糖凝膠電泳1.實驗?zāi)康暮鸵髮W(xué)習(xí)和掌握限制性內(nèi)切酶的特性、酶解和瓊脂糖凝膠電泳的操作方法,并理解限制性內(nèi)切酶是DNA重組技術(shù)的關(guān)鍵工具,瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定DNA片段的有效方法。2.相關(guān)基礎(chǔ)知識限制性核酸內(nèi)切酶:是一類能識別雙鏈DNA分子特異性核酸序列的DNA水解酶。
2025-05-26 18:28
【總結(jié)】實驗七基因片段的亞克隆(DNA的酶切、回收和連接)一.實驗?zāi)康腄NA酶切的基本原理。使用方法。DNA片段膠回收的方法二.實驗原理類專一識別雙鏈DNA中特定堿基序列的核酸水解酶,它們的功能類似于高等動物的免疫系統(tǒng),用于抗擊外來DNA的侵襲。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)幾百種限制性內(nèi)
2025-08-04 17:39
【總結(jié)】Q&A?關(guān)于質(zhì)粒提取結(jié)果的分析預(yù)實驗結(jié)果載體()123PETBlue質(zhì)粒DNA的瓊脂糖電泳(1%)Lane1:sample1Lane2:sample2Lane3:sample3一條帶雜帶預(yù)實驗結(jié)果PETBlue質(zhì)粒DNA的瓊脂糖電泳(1%)
【總結(jié)】實驗三、質(zhì)粒DNA的限制性酶切鑒定、割膠回收與純化(10學(xué)時)1.內(nèi)切酶的作用原理2.常用的酶切體系及作用條3.影響酶切的因素4.電泳檢測5.膠回收試劑盒的操作步驟及注意事項概述?沒有核酸限制性內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用,就沒有分子生物學(xué)的興旺發(fā)展,在基因工程和分子生物學(xué)中,沒有一種酶像限制性內(nèi)切酶那樣舉
2024-08-24 21:25
【總結(jié)】實驗5限制性酶切分析一.實驗?zāi)康耐ㄟ^本實驗了解限制性內(nèi)切酶的作用原理,限制性酶切技術(shù)及限制性酶切圖譜的分析方法。二.實驗原理限制性內(nèi)切酶是一類能識別并切割雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列的核酸內(nèi)切酶。限制性酶切反應(yīng)體系的組成1,DNA2,緩沖液提供限制性酶作用所需的離子濃度及種類;提供限制性酶
2025-01-05 02:57
【總結(jié)】實驗三Feulgen反應(yīng)顯示DNA一、實驗?zāi)康?.掌握臨時制片法。2.熟悉Feulgen反應(yīng)的原理及操作步驟。3.觀察細(xì)胞中DNA的分布二、實驗原理DNA經(jīng)酸(1mol/LHCl)水解后,分子中的嘌呤和脫氧核糖連接的配糖鍵被打開,脫氧核糖的一端釋放出游離的醛基,并在原位與Schiff試劑反應(yīng)形成特異性的紫紅
2025-05-13 01:12